绿色荧光蛋白转基因小鼠胚胎成纤维细胞的分离和培养

研究了不同胎龄、消化液、培养液对转绿色荧光蛋白(GFP)基因小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)分离和培养的影响,并对其生长形态进行观察。结果表明,在实验室条件下,12.5～14.5d胎龄的GFP-MEF分离效果最好,0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA所用时间短,消化后培养细胞贴壁率高;GFP-MEF形态以小梭形为主,呈漩涡状、鱼群状生长;最佳培养液为DMEM添加10%胎牛血清。研究获得了实验室分离制备GFP-MEF的方法,为制作饲养层和进一步构建转基因动物奠定基础。     

福建省马铃薯新品种(系)的SSR遗传分析和指纹图谱构建

为对福建省马铃薯新品种(系)鉴定提供分子水平上的依据,利用筛选出的11对多态性较好的SSR标记对9份马铃薯新品种(系)及其主要亲本进行遗传分析并构建指纹图谱。结果表明,供试材料共扩增出89个等位位点,其中84个为多态性位点,多态性比率达94.38%。不同引物扩增出等位位点数5(STM1049)-15(STI027)个,平均8.09个。利用STI027、STI052、STI033、STI047、STM3023和STM0030共6对引物构建了供试品种(系)的SSR指纹图谱。其中引物STI027可以将13份品种(系)完全区分开,引物STM0030可以将10个品种(系)区分开。聚类分析表明,在相似系数0.628处,可将13份品种(系)分为四类,聚类结果与供试品种(系)的系谱来源有较好一致性。     

南京八字山公园景观改造工程中植物造景分析

介绍了南京八字山公园一期景观改造工程中以季相变化、地形特点、因地制宜、生物多样性等特点的植物造景状况,同时阐述了植物造景运用的相关技术措施,并分析了本工程植物造景的经验。     

长白猪和哈白猪超数排卵的研究

近几十年来，对单胎家畜的超排研究较为深入。但对猪超排研究相对较少，其超数排卵的意义也远不如单胎动物大，但猪却能给生物技术研究提供大量的胚胎。近年来，随着细胞核移植技术在畜牧科研和生产上的应用，猪的超数排卵技术开始受到应有的重视。此次试验对长白猪和哈白猪进行了超数排卵研究，其目的是建立有效的猪超数排卵技术，为进一步做好猪胚胎生物工程研究提供必要的方法和数据；为猪的细胞核移植研究，提供尽可能多的卵母细胞和胚胎。     

8个水培叶用莴苣品种比较

【目的】为了筛选出适宜水培生产的叶用莴苣品种。【方法】设置产量、形态、营养、风味4个维度指标,通过隶属函数法综合评价8个水培叶用莴苣品种优劣。【结果】单株质量最大的是‘橡叶绿’,净菜率最高的是‘巴达维亚’。形态表现最优的是‘奶油红’,综合营养品质最好的是‘奶油红’,风味口感最好的是‘西班牙绿’。‘小奶油绿’的综合隶属函数值最高,为0.605 1;‘橡叶红’的综合隶属函数值最低,为0.324 6。【结论】‘小奶油绿’、‘橡叶绿’是较适宜水培生产条件的叶用莴苣品种,‘橡叶红’、‘脆叶绿’相对不适宜本试验中的水培生产条件。     

细胞和个体水平沉默效应的差异

[目的]研究3种不同长度的四联shRNA载体及其在细胞与个体水平的沉默效应差异。[方法]以EGFP为靶标基因,用hU6、mU6、h7SK、hH1 4种启动子,构建21、27、29 bp的3种四联沉默载体,通过转染Vero细胞和注射小鼠肌肉,以实时荧光定量PCR的方法检测绿色荧光蛋白基因的mRNA水平。[结果]3种载体都有很强的沉默效应,其在细胞水平上的沉默效应远高于个体水平上,可以通过未成年鼠的肌肉注射进行转基因。[结论]多位点串联表达shRNA是一种可以达到较好干扰效果的方法,肌肉注射将是一个简便的转基因途径。     

葡萄抗寒砧木外植体愈伤组织诱导和植株再生体系的研究

[目的] 研究葡萄抗寒砧木外植体愈伤组织的诱导和植株再生体系的建立.[方法] 以河岸、山河系列葡萄抗寒砧木为试材,采用对比试验和正交试验,研究葡萄试管苗再生的最佳外植体、最佳激素组合.[结果] 通过对葡萄叶片、叶柄砧、无芽茎段、新根再生的研究,得出最佳再生外植体为叶柄砧.利用细胞分裂素6-BA、TDZ与生长素组合诱导不定芽,MS＋ 6-BA 3.0mg/L＋ NAA 0.05 mg/L不定芽生成诱导率为6.52％;以MS＋TDZ 3.0 mg/L＋ IAA0.05 mg/L为培养基,诱导率为2.5％.[结论] 建立了葡萄抗寒砧木的再生体系.     

甘薯瘟两种不同致病型的初步研究

为明确甘薯瘟Ⅰ型菌与Ⅱ型菌接种同一甘薯品种后具有不同致病力的原因,对2种菌系进行了形态学观察和基因组DNA多态性差异分析.研究结果如下:(1)用甘薯瘟Ⅰ型菌与Ⅱ型菌分别接种金山57,结果表明金山57对Ⅰ型菌表现高抗,对Ⅱ型菌表现高感;(2) 400倍显微镜和10 000倍电镜下观察结果表明,2种菌均为杆状菌、有极生鞭毛,两端钝圆或尖圆,形态学结构无差别;(3)经16SrDNA扩增检测,确认所提取2个菌系的DNA为细菌DNA,运用RAPD分子标记方法对2个菌系的基因组DNA进行PCR扩增,10条RAPD引物共扩增出104条带,其中多态性条带有25条,多态性条带比率为24.04％,2个菌系基因组DNA之间存在明显多态性,基因组DNA之间的差异可能是导致其致病力显著不同的内在原因.     

油页岩的热解特性试验研究

通过实验测试与分析,揭示了油页岩的热解特性。对抚顺油页岩进行了高温热解失重实验,并且得到了油页岩在20～1000℃范围内的TG和DTG曲线,揭示了抚顺油页岩在330～480℃范围内具有集中热解的特性,失重约占总质量的15%。从而为油页岩的地下原位开采技术提供可靠的理论依据。     

植物ACC合成酶在大肠杆菌中高效表达及表达产物活性测定

丝瓜ACC合成酶cDNA在T7启动子的作用下，经IPTG诱导，在大肠杆菌中高效表达，表达外源蛋白可占菌体总蛋白的45.2%.表达的ACC合成酶一部分以可溶的形式存在，具有与天然ACC合成酶相似的酶活性，将反应底物S-腺苷蛋氨酸(SAM)转化为1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)并在细菌培养基中积累，另一部分则以无活性的包涵体形式存在于菌体中.