柑橘全爪螨钠离子通道基因差异性分析

为弄清钠离子通道基因与柑橘全爪螨Panonychus citri噻螨酮抗性的关系,通过柑橘全爪螨转录组分析鉴定了钠离子通道基因;采用序列比对和Sanger测序,分别对柑橘全爪螨敏感品系和噻螨酮抗性品系钠离子通道基因序列进行单核苷酸多态性分析;进一步采用RPKM法和荧光定量PCR对抗性品系和敏感品系钠离子通道基因进行表达差异分析.从柑橘全爪螨转录组中获得了39条钠离子通道基因,相对于敏感品系,抗性品系中有21条表达上调,17条表达下调,Nay1.8.1和Nay1.6.4分别为上调倍数最高的2个钠离子通道基因[log2 Ratio(RS/SS)分别为10.59,10.30],进一步荧光定量PCR分析发现,Nav1.8.1和Nav1.6.4上调倍数分别为3.92和1.68;基因序列比较和Sanger测序发现,抗性品系中,Nay1.9.4在344,441,468位和Nav1.7.3在第786分别有3个和1个SNP位点,进一步分析编码的氨基酸序列发现,Nav1.9.4只有第468位G突变为A导致蛋氨酸突变为异亮氨酸,Nav1.7.3在第786位T突变为C导致亮氨酸突变为色氨酸.钠离子通道基因差异性分析及验证为进一步研究柑橘全爪螨抗性分子机理提供了有价值的基因资源.     

柑桔全爪螨噻螨酮抗性与敏感品系GST基因表达差异分析

为了明确谷胱甘肽S-转移酶（glutathion S-transferases,GSTs）基因与柑桔全爪螨Panony-chus citri抗性的关系,通过BLAST搜索,对柑桔全爪螨转录组数据库的GST基因进行鉴定,进一步采用RPKM法分析柑桔全爪螨噻螨酮敏感品系（SS）和抗性品系（RS）的GST基因表达差异。从柑桔全爪螨转录组中获得了30条GST基因,11条基因属于Delta家族,10条属于Mu家族,6条属于Kappa家族,2条属于Omega家族,1条属于Zeta家族,同一家族的基因聚在同一进化分支上;两个品系有5条GST基因表达没有差异,此外,抗性品系中有16条发生了下调,有9条GST基因发生了上调;抗性品系上调倍数最高的3个GST基因分别是GSTd6、GSTm5和GSTm4,log₂(RPKM_RS/RPKM_SS)分别仅为1.05、0.74和0.71,荧光定量PCR分析测得上调倍数分别仅为1.13、1.42和1.21,上调倍数均不高。推断,GST基因上调可能不是柑桔全爪螨对噻螨酮产生抗性的重要原因。     

5％啶虫脒乳油对柑橘粉虱的防效研究

[目的]明确啶虫脒对柑橘粉虱的防治效果。[方法]对5％啶虫脒乳油进行了田间防治柑橘粉虱的药效试验。[结果]结果表明,在试验剂量范围内,各处理对柑橘粉虱都有较好的防治效果,以2000倍（25mg／kg）和3000倍（16．67mg／kg）防治效果较优,可以在生产上应用。防治最好在第1代1～2龄若虫孵化高峰期进行,重点在于喷施新梢嫩叶的叶背。[结论]研究结果为柑橘粉虱的防治提供了参考。     

柑桔溃疡病防治药剂的筛选研究

 对24种药剂进行柑桔溃疡病菌的室内毒力筛选。结果表明,噻霉酮、溴菌腈和农用链霉素的抑菌效果较好。选择噻霉酮、溴菌腈、农用链霉素、菌立清、松脂酸铜、甲基硫菌灵·异菌脲等10种药剂进行田间药效试验,春雷霉素400倍液（防效7863%）、噻霉酮900倍液（防效7701%）、琥胶肥酸铜600倍液（防效7346%）、农用链霉素1000倍液（防效7277%）对柑桔溃疡病防治效果较好,推荐生产上使用生物制剂春雷霉素及农用链霉素。     

柑桔园链格孢菌Mp3毒素作用机制研究

为了明确柑桔园链格孢菌Mp3(Alternariasp.)毒素的作用机制,在试验条件下提取菌株Mp3的粗毒素进行致敏性反应和显色反应,并测定粗毒素处理的卡里佐枳橙幼苗叶片的丙二醛(MDA)含量及过氧化物酶(POD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性。结果发现,链格孢菌Mp3的毒素为酮类物质,与已经报道的A.citri产生的ACT毒素相似。Mp3的毒素处理后,卡里佐枳橙叶片的MDA含量升高,POD、APX活性最终下降,说明Mp3的毒素能够抑制卡里佐枳橙叶片的保护性酶系统,细胞内活性氧清除系统遭到破坏,导致活性氧大量积累,使质膜发生过氧化反应,产生MDA,而且MDA含量随着Mp3毒素浓度的增加而增加。证明Mp3毒素的作用位点为质膜,这与ACT毒素的作用位点一致。此研究为柑桔园中链格孢菌的鉴定和防治提供了参考。     

几种不容忽视的柑桔枝干病虫害

近年来在我国大部分柑桔栽培区都发现有部分柑桔园有相当部分植株被脚腐病、流胶病、星天牛、褐天牛、绿桔天牛和爆皮虫等不同程度为害 ,尤以部分老果园受害最重 ,造成植株衰弱 ,甚至整株枯死。个别幼龄桔园也有部分植株试花前就造成根颈腐烂甚至环割 ,丧失结果能力 ,失去经济价值。由于这些病虫主要为害主干和大枝 ,故暂将其统称为“枝干病虫害”。究其原因 ,主要是忽视常规管理 ,防治不及时所致。主要由于以柑桔红蜘蛛和矢尖蚧为主的螨、蚧类在各柑桔园为害引起落叶落果或枝叶干枯 ,给产量和品质造成很大损失 ,为此果农每年都要投入很多的…     

31种中草药提取物对柑橘全爪螨的杀螨活性

室内测定了31种植物的乙醇提取物对柑橘全爪螨的杀螨活性。结果表明:小茴香等4种植物的活性较高,24 h校正死亡率大于90%;藁本等7种植物的活性中等,校正死亡率为60%~90%;其余植物提取物的校正死亡率在60%以下。进一步测定了4种植物提取物对柑橘全爪螨的雌成螨和卵的触杀毒力,表明:小茴香对柑橘全爪螨的毒力最高,LC50值分别为0.065 8 g/L和144.180 5 g/L,可以作为下一步的研究对象。     

3种杀菌剂对柑桔溃疡病菌的室内毒力测定

为筛选防治柑桔溃疡病的高效药剂,将23种常见商品杀菌剂分别稀释成200 mg/L,采用喷雾法进行室内抑菌试验,选择3种初筛抑菌效果较好的药剂进行室内毒力测定.结果表明,噻霉酮、农用链霉素、溴菌腈的抑菌效果较好,其EC_(50)分别为46.59、86.18、102.91 mg/kg,噻霉酮的毒性最强.结合供试药剂有效成分和作用机理的比较,确定农用链霉素效果最佳.     

桔全爪螨田间种群对双甲脒的敏感性及其两种酶的生化特性

分别对采自重庆市北碚、忠县、万州和长寿四个地区的桔全爪螨雌成螨对双甲脒的敏感性进行了生物测定,其LD50分别为0.014、0.031、0.111和0.007 mg/L。同时测定了四个地区桔全爪螨成螨体内羧酸酯酶和乙酰胆碱酯酶的活性,其中羧酸酯酶活性依次为7.78、3.15、6.56和6.00nmol/（min·insect）,乙酰胆碱酯酶比活力依次为1.07、0.49、0.50和0.37nmol/（min·mg）。四个地区桔全爪螨体内羧酸酯酶和乙酰胆碱酯酶的动力学常数也存在不同程度的差异。离体抑制作用表明,双甲脒对四个地区桔全爪螨羧酸酯酶和乙酰胆碱酯酶具有明显的抑制作用,当双甲脒浓度达到14.67mmol/L时,抑制作用最强,对北碚、忠县、万州和长寿四个地区桔全爪螨羧酸酯酶的抑制率分别为65.27%、73.84%、81.44%和88.36%,对乙酰胆碱酯酶的抑制率分别为86.84%、84.36%、73.32%和70.85%。     

金柑流胶病致病菌的分离与初步鉴定

近年来在金柑上出现流胶现象,施用防治流胶病的药剂没有明显作用,且其致病菌目前报道很少。本实验室通过从金柑流胶病株上分离纯化得到5株真菌,编号为JG1、JG2、JG3、JG4、JG5。致病性测定发现5株真菌的致病程度不同,JG4孢子悬浮液处理发病最重,JG1处理发病最轻。对这5种真菌进行形态学、分子生物学鉴定,发现JG2、JG3、JG4属于链格孢（Alternaria sp.）,JG1属于叶点霉（Phyllosticta sp.）,JG5属于镰孢霉（Fusarium sp.）。这为金柑流胶病的防治和快速鉴定奠定了基础。