用原生质体融合技术选育谷氨酸高产菌株

用适当方法制得枯草杆菌BR151(Trp~-,Lys~-,Met~-)和黄色短杆菌ZAU89101(Bio~-)的原生质体,在DNase存在条件下,用40％聚乙二醇(PEG)做助融剂,进行两菌株的原生质体融合。融合率为2.69×10~(-5)～3.6×10~(-6)。随机挑选10株融合子进行生化及谷氨酸发酵实验,证实了融合子的杂种性质。融合子的细胞、菌落形态和大小、形成芽孢能力及谷氨酸发酵能力等性状均较亲本有不同程度的变异。通过摇瓶发酵实验获得一株谷氨酸产率为7.29％以上的融合子。经长时间培养,此菌株仍保持了稳定性,因而具有应用前景。     

基因工程菌株VB84酵母的啤酒发酵特性研究

5株通过质粒转导而获得β-葡聚糖酶基因的下面啤酒酵母,都能在啤酒主发酵期内将麦芽汁中90％以上的β-葡聚糖分解.其中VB84菌株能在4天内分解β-葡聚糖94.1％.它在啤酒发酵过程中的繁殖速率、细胞浓度、降糖速率和最终发酵度均保持正常.随着β-葡聚糖的分解,啤酒的易滤性得到明显改善,V_(max)值提高56.3％.对β-葡聚糖凝胶的分解速率略低于对溶胶态β-葡聚糖的分解.啤酒的各项质量指标正常,对泡持性没有影响.     

云南省啤酒产业链的关键技术研究与应用

阐述了中国啤酒产业链的关键问题，云南省啤酒大麦育种及其产业化、啤酒麦芽酿造等关键技术研究和特色啤酒研制开发。强调了关键技术在云南啤酒工业中的显著效益。     

枯草芽孢杆菌ZJF-1A5 β-葡聚糖酶基因的克隆、序列分析和表达

β-1,3-1,4-葡聚糖酶是重要的工业用酶,可有效减少大麦β-葡聚糖在啤酒酿造中所造成的麦汁过滤困难和啤酒的非生物性浑浊等负面影响.但内源β-葡聚糖酶在麦芽干燥和糖化过程中丧失了大部分活性.而微生物来源β-葡聚糖酶与麦芽内源酶有相同的底物专一性,且热稳定性优于麦芽内源酶.本研究对Bacillus subtilis mutant ZJF-1A5葡聚糖酶基因进行克隆、序列分析和表达,并对酶在细胞中的分布和酶的热学性质进行了研究.     

法夫酵母虾青素提取工艺的优化研究

从破壁方法、浸提溶剂及提取条件等方面对法夫酵母虾青素提取工艺进行了优化研究。用单因子试验对破壁方法及浸提溶剂进行选择，结果表明二甲亚砜(DMSO)法是法夫酵母破壁提取虾青素的最佳方法，丙酮是理想的提取溶剂。用析因试验对破壁提取的条件进行了分析研究，结果表明破壁的温度、破壁的时间、浸提溶剂的添加量及浸提温度等都会对法夫酵母破壁提取虾青素产生显著影响，但以破壁的温度及丙酮的添加量影响最大。通过最速上升和中心组合设计试验，优化得到适宜的提取条件为：二甲亚砜加量25 mL/g(以干菌体计，下同)、破壁温度75.6℃、破壁时间20 min、丙酮添加量77.4 mL/g、浸提温度为40℃，优化后提取液中虾青素的浓度为3.145 μg/mL，比未优化时增加了27.02%。     

氯粘康酸环异构酶基因克隆及序列研究

研究从土壤中分离出1株降解2,4-二氯酚能力较强的假单胞菌菌株“GT241-1”,并从中克隆出参与降解2,4-二氯酚的氯粘康酸环异构酶基因(dcpC),该基因编码的氯粘康酸环异构酶可将2,4-二氯-顺,顺-粘康酸转化为反式-2-氯-双烯内酯。采用的基因克隆策略是用Southern杂交对其邻近基因进行定位后构建基因组文库,再用斑点杂交从基因文库中筛选目的转化子。经序列测定得知dcpC基因编码区1110bp,且核苷酸和推测的编码氨基酸序列分析表明dcpC属氯粘康酸环异构酶基因家族,并与该基因家族的其他基因有一定差异。     

基因工程菌EGs2产β-葡聚糖酶条件优化及产酶特性

摘要：用乳清粉作为主要培养基组成，采用正交试验对重组菌EGs2的发酵条件进行了优化，并对粗酶液的酶学性质进行了研究。重组菌EGs2的最佳发酵条件为：摇床转速170 r•min-1，接种量1 ％，发酵培养基初始pH值6.0，种龄12 h。重组菌EGs2β－葡聚糖酶的表达与菌体生长呈正相关，发酵14h后，菌体生物量最高可达1.71 g•L -1，β－葡聚糖酶活力最高可达321.56 U•ml-1。所得粗酶液的最适反应温度和pH值分别为60 ℃和6.0，在70 ℃以下保温20 min后，残余酶活力均在80 %以上。在pH 5.0-9.0 放置48 h后仍能保持均90 %以上的残余酶活力。     

微孔滤膜氧化法再生的研究

试验以德国Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ公司的醋酸纤维素微孔滤膜为材料，运用强氧化剂ＫＭｎＯ４－Ｈ２ＳＯ４对被堵的滤膜进行再生．试验中采用了三因素三水平正交多项式回归设计，并建立了影响再生效果的数学模型．结果表明：在ｐＨ为４、ＫＭｎＯ４浓度为０．１５％～０．２０％、温度为４０～４５℃，８～１０ｈ的处理可获得较佳的膜再生效果     

2,4-二氯酚降解细菌菌株对含2,4-二氯酚废水的好氧处理

从土壤中分离到两株能以2,4-二氯酚为唯一碳源和能源生长的、具有降解2,4-二氯酚能力的细菌GT241-1和GT141-2,鉴定后确定它们是假单胞菌属(Pseudomonas sp.). 菌株GT241-1和菌株GT141-2在最适温度25～30 ℃下,能将60～100 mg/L的2,4-二氯酚分别降解到8～12 mg/L和25～30 mg/L. 经驯化的活性污泥在投加污泥总量0.59%和1.18%(以干重计)的假单胞菌GT241-1菌体后,对含2,4-二氯酚60 mg/L和COD 1500 mg/L的模拟废水分批处理20 h左右后可使2,4-二氯酚含量降到最低值9 mg/L,与未投加GT241-1菌体的对照相比它们对2,4-二氯酚降解速度较快. 用活性污泥法对含2,4-二氯酚废水进行连续处理时, 投加GT241-1菌体可加快反应器的起动; 反应器以2,4-二氯酚浓度60 mg/L、HRT 20 h通入模拟废水运行时, 投加GT241-1菌体者与未投加菌体的对照的出水中2,4-二氯酚含量分别为11.2 mg/L和16.7 mg/L, 前者对2,4-二氯酚的处理效果较好.     

固定化Zymomonas mobilis酒精发酵的研究

以Ｚｙｍｏｍｏｎａｓｍｏｂｉｌｉｓ作为酒精生产菌，用海藻酸钙包埋，制成直径为３ｍｍ左右的细胞固定化球，进行酒精发酵和发酵条件试验，研究表明，固定化细胞和游离细胞酒精发酵条件基本一致，最适温度为３０℃，最适ｐＨ为５～６．溶解氧对该茵酒精发酵有抑制作用，在固定化细胞多批次半连续发酵试验中，在６小时内其乙醇产率系数达到０．４９左右。