Effects of three kinds of calcium activator on the proliferation of cultured vascular smooth muscle cells in rats

AIM: To investigate the effects of intracellular free calcium ([Ca²⁺]i) from different resources on the proliferation mediated by mitogen activated protein kinase (MAPK) in vascular smooth muscle cells (VSMCs). METHODS: Cultured VSMCs were used in all experiments. Calcium influx was stimulated by angiotension Ⅱ(Ang Ⅱ). The release of intracellular calcium stores was induced by inositol trisphosphate (IP₃) and ryanodine (RY). MAPK activity was measured by [γ-³²P]-ATP incorporation MAPK protein expression by western blot, VSMCs proliferation by [³H]-Leucine ([³H]-Leu) and [³H]-Thymidine ([³H]-TdR) incorporation. RESULTS: Compared to the control VSMCs, Ang Ⅱ, IP₃ and RY significantly increased [Ca²⁺]i concentration activity of MAPK and its protein content in VSMCs. The promotion of [³H]-Leu and [³H]-TdR incorporation in VSMCs was also observed (P<0.01). CONCLUSION: The study indicated that calcium activator-induced increase in the activity and protein content of MAPK was involved in the proliferation of VSMCs, which was closely related to the [Ca²⁺]i concentration but independent to its origin.     

非洲猪瘟病毒无标签重组B602L抗原制备与鉴定

为了获得无标签重组抗原用于非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体检测,本研究将B602L与类弹性蛋白多肽(ELP)基因进行融合表达,利用简单、经济的相变循环(ITC)纯化ELP-B602L融合蛋白,用烟草蚀纹病毒(TEV)蛋白酶活性包涵体切除ELP标签,再用ITC回收重组B602L蛋白;用抗体阳性猪血清对重组B602L进行鉴定;以重组B602L蛋白为包被抗原进行ELISA鉴定。结果显示重组大肠杆菌能正确表达ELP-B602L融合蛋白,纯化融合蛋白纯度大于85%;TEV蛋白酶活性包涵体切除ELP标签的效率大于90%,回收的重组B602L蛋白纯度大于90%,能与抗体阳性猪血清反应;以重组B602L蛋白为包被抗原建立的ELISA与抗体阳性血清反应为阳性,与抗体阴性血清反应为阴性,OD450值与血清稀释倍数具有线性相关性。     

内蒙古草地退化防治对策及碳增汇途径研究

全球变化背景下草地生态系统的退化及碳循环过程是生态学、地学、植物学和农学领域的研究热点之一。本文介绍了草地退化的概念、层次及退化现状,探讨了开垦、放牧、气候变化等人为因素和自然因素对内蒙古地区草地退化的驱动作用,重点分析了草地退化对碳循环过程的影响机制及退化草地恢复的固碳潜力,以期加深对草地生态系统退化及恢复过程中碳循环动态变化的理解。本文提出了内蒙古退化草地恢复过程中尚需解决的主要问题以及草业和畜牧业可持续发展的战略计划,以期为草地碳增汇方面的研究提供新的思路,并为决策者合理调整草地利用和保护布局提供理论基础。     

"自杀性"DNA疫苗研究进展

DNA疫苗作为第三代全新的疫苗,具有传统疫苗和其他基因工程苗不可比拟的优点.但由于其安全性方面存在着一些尚待解决的问题,使得实际应用受到限制."自杀性"DNA疫苗是基于常规的DNA疫苗和自主复制型RNA疫苗而发展起来的一种新型疫苗.由于其制备原理和过程与常规DNA疫苗相类似,所以它具备常规DNA疫苗在制作、运输储存以及免疫等各方面的优点.同时由于它以甲病毒复制子为基础能诱导转染细胞自主凋亡,故比常规DNA疫苗更为安全有效.文章针对"自杀性"DNA疫苗载体的构建、作用机理、优点以及国内外研究情况作一介绍.     

安徽地区野生大豆饲用价值研究

一直以来,我国研究者对野生大豆的研究多集中在对其遗传基因的开发利用方面,对其饲用价值的研究偏少,且多集中在野生大豆种子的营养成分和饲用价值上,对于野生大豆全株饲用价值的分析近乎空白。该试验在安徽省境内22个地市（县）共采集野生大豆样本22份,在半野外环境下种植,并对其全株的主要营养成分和刈割价值进行分析,发现野生大豆蛋白质含量较高,与饲用苜蓿草粉相当,野生大豆的生物学产量也很高,有良好的抗旱性,是一种优良的饲草资源。     

急性感染猪瘟病毒猪体外排毒规律的观察

为研究CSFV感染后在体外的传播途径、排毒规律,针对CSFV基因组设计了一对引物和一条探针,建立了一套CSFV荧光定量PCR(FQ-PCR)检测方法,并以质粒为标准品得到扩增标准曲线.对18个CSFV阳性质控样本检测全阳性,6个CSFV阴性质控样本检测全阴性,显示良好敏感性和特异性.应用此方法对石门株感染的16头60日龄长白猪和1头阴性对照猪的粪便、尿液、眼分泌物和唾液中病毒含量进行了动态测定,结果表明从感染后第1天到频死前第8天,粪便中均能检测出病毒;尿液和眼分泌物至少能从第3天,唾液从第4天开始检测出病毒,且病毒含量呈增加趋势.本研究对急性感染猪瘟病毒猪体外排毒规律进行了系统研究,为弄清CSFV感染病程、致病机理及临床诊断奠定了重要理论基础.     

高效液相色谱法测定杨树花口服液中水杨苷的含量

建立了高效液相色谱分离测定杨树花口服液中水杨苷含量的方法。采用Waters XBridge C18色谱柱（150mm×4．6mm,5μm）,以甲醇-水（10：90）为流动相,流速为1．0mL／min,检测波长269nm,柱温30℃。水杨苷的线性范围为0．025～0．5mg／mL（r=0．9995）,平均加样回收率（n=6）为100．8％,RSD为1．49％。建立的方法准确、快速,操作简便,可用于杨树花口服液中水杨苷的含量测定。     

亚洲璃眼蜱差异表达新基因P18的克隆和鉴定

为了进行抗蜱和蜱传病疫苗的研究,本实验对亚洲璃眼蜱雌蜱吸血前后唾液腺消减文库中获取的一个全长编码基因P18进行了研究。该基因全长519bp,共编码170个氨基酸,分子量为18.36Ku,等电点为4.28。BLAST分析表明,该基因预测的氨基酸与肩突硬蜱、篦子硬蜱唾液腺的抗凝血小肽有30%～40%低度同源性。将该基因亚克隆到pET-32a( )表达载体,转化BL21(DE3)宿主菌,经IPTG诱导,重组融合蛋白以可溶性形式高效表达。将可溶性重组蛋白免疫小鼠后获得的抗血清。经免疫印迹分析表明,该重组蛋白抗体可特异性的识别半饱雌蜱唾液腺中的天然蛋白抗原,而未吸血雌蜱唾液腺中则不显现特异条带。RT-PCR结果进一步证实,该基因在蜱吸血后的唾液腺中差异表达。     

苦瓜新品种比较试验

以本课题组选育的苦瓜新品种如玉171、1702、如玉162、1614、1613、如玉136、如玉119、如玉135、如玉146、如玉129为试验材料,以新翠为对照,开展苦瓜新品种比较试验,对苦瓜的长势、抗病性、产量等方面进行调查研究,筛选出高产优质且抗病性强的如玉162、如玉171与如玉119共3个苦瓜新品种,为苦瓜新品种的示范与推广提供技术支撑。     

苏州口岸入境集装箱媒介生物分析

通过对入境集装箱携带输入性医学媒介生物蝇、蚊、蜚蠊、蠓等的调查与统计分析,系统了解苏州陆路口岸进境集装箱携带输入性医学媒介生物的情况,并提出相应控制措施.