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为建立适宜新疆野生樱桃李的SSR分子标记技术体系,通过对PCR反应程序、反应体系(DNA模板量、引物浓度、Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶用量)以及退火温度进行了探索,建立了适宜野生樱桃李的SSR-PCR反应体系。结果表明:在25μL反应体系中,Mg2+1.0 mmol/L、引物0.5μmol/L、dNTPs 0.20 mmol/L、TaqDNA聚合酶1.0 U、模板DNA 30 ng、退火温度为60℃。SSR扩增程序:94℃预变性5 min,35个循环(94℃30 s,60℃1 min,72℃1 min),72℃延伸10 min,可筛选出稳定性好、多态性高的SSR引物。 相似文献
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AIM: To investigate the pattern of Th1/Th2 balance in systemic lupus erythematosus(SLE) patients and the relationship between CD28/CTLA-4(cytotoxic T-lymphocyte antigen-4) molecule expression and Th1/Th2 balance.METHODS: Eighteen SLE patients met the ARA 1997 updated SLE criteria were selected in the study. According to Bombardier's SLEDAI criteria, all patients were classified into two groups: active group(12 cases) and static group(6 cases). Fourteen normal individuals, matched for age and sex of the patients, served as controls. The peripheral blood mononuclear cells(PBMCs) were isolated by density gradient centrifugation and cultured in RPMI-1640 culture medium. After treated with PMA(5 μg/L) and ionomycin(500 μg/L) for 72 h, the PBMCs were collected, the contents of IFN-γ and IL-10 in the supernatant of cultured PBMCs were detected using enzyme linked immunosorbent assay(ELISA). The expression of CD28 and CTLA-4 molecules on T cells were detected by flow cytometric technique with double staining by FITC or PE labeled monoclonal antibodies. RESULTS: The level of IL-10 was higher in the PBMCs of active and static SLE patients(351.29 ng/L±153.31 ng/L and 319.37 ng/L±153.39 ng/L) than that in controls(254.48 ng/L±120.69 ng/L), but the difference did not reach statistical significance(P>0.05). The level of IFN-γ was significantly lower in the PBMCs of active SLE patients(25.76 ng/L±16.09 ng/L) than that in controls(50.71 ng/L±27.92 ng/L, P<0.05). The ratio of IL-10/IFN-γ was significantly higher in active SLE patients(18.74±13.77) than that in controls(6.66±4.95, P<0.05). Either before or after culture, the expression of CD28 molecule on CD3+and CD8+ T cells from all SLE patients was not remarkably different from that in the cells of controls. Before culture, the expression of CTLA-4 molecule on CD3+T cells of active SLE patients(0.79%+0.37%) was significantly lower than that in the cells of controls(1.31%+0.61%, P<0.05). After culture, the expression of CTLA-4 molecule on CD3+ T cells of SLE patients was still lower than that in the cells of normal controls without statistical significance(P>0.05).The expression level of CD28 molecule on CD3+ or CD8+ T cells in active SLE patients and controls was not correlated with the levels of IFN-γ and IL-10 in the supernatants(P>0.05). The level of CTLA-4 molecule expression on CD3+ T cells of active SLE patients was positively correlated with IFN-γ level(r=0.681, P<0.05), while was negatively correlated with IL-10 levels(r=-0.624,P<0.05) and the ratio of IL-10/IFN-γ(r=-0.738, P<0.01). The level of CTLA-4 molecule expression on CD3+ or CD8+ T cells of controls showed no correlation with IFN-γ levels, while showed negative correlations with IL-10 level(r=-0.587, P<0.05; r=-0.563, P<0.05, respectively).CONCLUSION: There is a bias in the differentiation of Th0 cells towards Th2 in SLE patients. CTLA-4 probably plays an important role in this mechanism through suppressing the signal transmitted by CD28. 相似文献
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改善政府投资项目的投资决策体系具有十分重要的现实意义,这也是政府投资项目管理的重要组成部分。文章从政府投资项目全过程管理的角度,分析了我国现行的政府投资项目的审批制度和投资控制的全过程,针对存在的弊端,提出了建立政府项目投资决策体系的建议。 相似文献
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以南方稻田为研究对象,以再生水安全灌溉调控为目标,基于田间试验,研究了不同灌溉水源(农村生活污水一级处理水R1、二级处理水R2、生态塘净化水R3和河道清水R4)、不同灌溉调控(低水位W1、中水位W2和高水位W3)对土壤-作物典型重金属(镉Cd、铅Pb、铬Cr、铜Cu、锌Zn)质量比变化的影响,分析了农村生活再生水灌溉调控对土壤重金属生态风险.研究表明,农村生活污水再生灌溉稻田Cd, Pb质量比略有升高,Cr, Cu, Zn含量下降;水稻植株各部分器官重金属质量比按植株器官排序从大到小依次为茎,稻米≈叶,重金属组成从大到小依次为Zn, Cr, Pb, Cd,相对灌溉水源,水位调控对水稻植株各部分器官重金属质量比累积影响较小,再生水灌溉条件下水稻籽粒重金属质量比并未明显增加,符合稻谷污染物的限量要求;农村生活污水再生灌溉稻田Cd生态风险系数最高,Cu和Pb次之,Cr和Zn风险系数较低,R3水源灌溉下土壤重金属污染潜在生态风险最低,总体上,再生水灌溉并未对土壤造成严重污染,但长期进行再生水灌溉是否会造成重金属污染风险持续增加有待研究. 相似文献