食源性沙门氏菌的PCR检测

该试验根据GenBank数据库沙门氏菌的特有基因invA(AE008832)设计扩增长度为285 bp的引物,研究PCR技术在检测冷冻肉中沙门氏菌的检测限度.在生理盐水中食源性沙门氏菌的检测限度为103 cfu/mL;在人为污染肉汤中,普通FCR的检出限为1.98×103 cfu/mL;人为污染后的样品肉汤中沙门氏菌浓度为100,101,102 cfu/mL时,分别培养7.6.6h即可检测到.     

13种蒲公英属植物核型似近系数聚类分析

为探究蒲公英属植物亲缘关系,本研究对13种蒲公英属（Taraxacum. F. H. Wigg.）植物进行了核型似近系数聚类分析,并计算了物种间遗传距离。结果表明：当核型似近系数接近0.6960时,13种蒲公英可以聚为4大类群;当核型似近系数接近0.4641时,13种蒲公英共属一类。异苞蒲公英与狭戟片蒲公英的亲缘关系最近,其似近系数最大,为0.9969,核型进化距离最小,为0.0031;多裂蒲公英和亚洲蒲公英的亲缘关系最远,似近系数为0.3343,核型进化距离为1.0959。本研究结果为蒲公英属植物的亲缘关系辨析、种质鉴定及物种进化分析提供依据。     

3株鸡传染性贫血病毒的全基因组序列分析

通过对3株鸡传染性贫血病毒(CIAV)的全基因组序列比较分析,部分表明广西南宁鸡群CIAV毒株的遗传变异特征。将阳性CIAV的组织样品进行DNA抽提后,运用PCR方法分段扩增CIAV的全基因组,将获得的PCR产物进行基因克隆并进行阳性克隆菌鉴定后送测序。将所获得的基因序列进行拼接成CIAV基因组全长后,应用LaserGene7.1和MEGA4.1软件对CIAV全基因、Viral protein 3(VP3)、Viral protein 1(VP1)和Viral protein 2(VP2)基因序列进行核苷酸、氨基酸同源性分析和遗传进化分析;并对VP1、VP2和VP3蛋白上与毒力、蛋白磷酸酶活性和细胞凋亡相关的氨基酸位点进行分析。结果获得3株CIAV的全基因序列,分别命名为GX1801、GX1804和GX1810;CIAV全基因遗传进化分析表明GX1801、GX1804和GX1810均同属于Group A群,与国内强毒株GD-103和GD-104毒株的亲缘关系较近;基于VP1基因构建的遗传进化树与全基因构建的进化树最相似;GX1801、GX1804和GX1810 VP1蛋白上与毒力相关位点的第75、89、125、141、144、394位氨基酸位点与日本强毒株C368株、国内强毒株GD-103和GD-104株在同一位点保持一致;GX1801、GX1804和GX1810 VP2蛋白上与磷酸酶活性相关的基序(I^94CNCGQFRKH^103)均未发生变异;GX1801、GX1804和GX1810 VP3蛋白与诱导细胞凋亡相关的重要区域(VP3蛋白N端结构域的第1~69位氨基酸)均高度保守。本研究对3株CIAV全基因组进行测定并进行基因分析,获得了其基因组特征,为进一步研究广西CIAV的分子流行和致病性提供参考。     

猪细小病毒NS基因原核表达与多克隆抗体制备

旨在制备抗猪细小病毒(PPV)非结构蛋白共有氨基酸的NS多肽多克隆抗体。根据GenBank(MK993540)公布的PPV基因组序列,克隆其非结构蛋白NS1、NS2共有基因序列(NS基因),并进行生物信息学分析。进而将NS基因克隆至原核表达载体pET-32a,构建重组质粒pET-32a-NS,转化至大肠埃希菌Rosetta(DE3)中进行诱导表达,利用镍柱亲和层析技术纯化表达的重组多肽,用重组多肽免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体。结果显示,PPV杨凌株NS基因长258bp,编码86个氨基酸的多肽,是具有亲水性的非跨膜NS多肽,具有大量的B细胞线性表位。NS多肽在37℃、0.8mol/L IPTG条件下,诱导6h有大量的可溶性表达。免疫印迹试验结果显示,该多肽具有较好的抗原性。用纯化NS多肽免疫小鼠后获得鼠抗NS多肽的血清抗体效价为1∶12800。用制备的NS多克隆抗体检测纯化的NS重组多肽及真核表达的NS1蛋白,均能检测出相应特异性条带,为进一步研究NS蛋白在PPV致病过程中的作用奠定了基础。     

黑大蜜蜂的研究进展

黑大蜜蜂Apis laboriosa是蜜蜂属个体最大的蜜蜂,与大蜜蜂有很多相似之处。目前,我国黑大蜜蜂仍处于半野生状态的原始方式饲养。概述黑大蜜蜂的分类地位、生物学、天敌及防御机制、经济价值等,提出保护黑大蜜蜂的重要意义及建议,旨在利用黑大蜜蜂为农业发展带来最大效益。     

贵州省某猪场体表脓肿病原菌的分离鉴定及药敏分析

为探明贵州省某猪场引起猪体表脓肿的原因,本研究对该猪场脓肿部位的脓汁进行细菌分离培养,并对分离所得的细菌进行革兰氏染色镜检、生化试验、药敏试验、16S rDNA序列分子分析及动物感染试验。结果显示,从脓汁中成功分离到了3株菌落形态不一的菌株,分别为金黄色葡萄球菌、化脓隐秘杆菌、停乳链球菌类马亚种,根据分离地点和时间将其分别命名为GZGP2018-1、GZGP2018-2和GZGP2018-3;GZGP2018-1菌株与NCBI上金黄色葡萄球菌的同源性高达99.9%,GZGP2018-2菌株与NCBI上化脓隐秘杆菌的同源性高达99.9%,GZGP2018-3菌株与NCBI上停乳链球菌类马亚种的同源性高达100%;3株分离菌株对头孢拉定、环丙沙星、磺胺间甲氧嘧啶和氟苯尼考较敏感,对青霉素类药物和红霉素耐药;3株分离菌株对试验小鼠均具有致死性。本研究为该猪场猪体表脓肿的发病原因、实验室诊断方法及日常防控提供了理论参考。     

光照强度对Kisspeptin及其受体GPR54在鸡脑表达的影响

随机选用100日龄京红Ⅰ号蛋鸡,分别接受光照强度30,20,10,1 lx处理,运用免疫组化技术测定Kisspeptin和GPR54免疫反应阳性神经元在鸡中脑和间脑的分布和表达。结果显示:Kisspeptin免疫反应阳性神经元主要分布于中脑SGC、Imc、Ipc、顶盖前核(Pt)、外侧螺旋核(SPL)。在SGC、Imc、Ipc,平均灰度值和面积百分比,30,20 lx组显著高于10,1 lx组(P<0.05),在Pt和SPL,30 lx平均灰度值和面积百分比最高。GPR54免疫反应阳性神经元主要分布于中脑的lmc、Ipc、SP/IPS、nbor、SGC,平均灰度值和面积百分比,光照强度30,20 lx组显著大于l0,1 lx组(P<0.05)。Kisspeptin免疫反应阳性神经元主要分布于间脑的下丘脑后内侧核(MPH)、丘脑室旁核前部(PVa)、PHN、PVN、Rot。在Rot、PHN、PVN和PVa,Kisspeptin免疫反应阳性神经元平均灰度值和面积百分比,30,20 lx组显著大于l0,1 lx组(P>0.05);在MPH,30 lx高于20 lx,20 lx高于10 lx,10 lx高于1 lx组。GPR54免疫阳性神经元主要分布于鸡间脑PVN、GLv、Rot、PHN和CPa。平均灰度值和面积百分比在Rot,30 lx组最大,但各组间差异不显著(P>0.05),在PVN、PHN、GLv和CPa,30,20 lx组显著大于10,1 lx组(P<0.05)。Kisspeptin免疫反应阳性细胞在腺垂体的平均灰度值,光照强度20 lx组最大,面积百分比30 lx最大,但差异不显著(P>0.05)。结果表明,光照强度能促进Kisspeptin和GRP54在蛋鸡中脑和间脑表达,随光照强度增加,表达量增加。Kisspeptin接受光信息调控,通过调节GnRH分泌,参与调节鸡的生殖机能。     

30个紫花苜蓿品种对苜蓿花叶病毒病的田间抗性初步研究

为了比较不同紫花苜蓿品种对病毒病的抗性,对30个紫花苜蓿品种的病毒病发病情况进行了田间调查,利用小RNA深度测序技术结合RT-PCR技术检测鉴定各紫花苜蓿品种中的病毒种类,并测定了各紫花苜蓿品种的发病率、病情指数、相对株高、相对单株干重、相对茎秆直径、相对叶面积、相对叶长和相对叶宽,综合比较各紫花苜蓿品种的抗性,并对部分指标进行系统聚类分析。结果表明:30个紫花苜蓿品种均只受到苜蓿花叶病毒(alfalfa mosaic virus, AMV)的侵染,所有紫花苜蓿品种的田间发病率均超过94%,病情指数范围为31.53～55.50;30个紫花苜蓿品种中,抗性较强的品种有1个,为射手2号,抗性一般的品种有6个,其余23个品种的抗性较差,分别占供试品种的3.33%,20.00%和76.67%;聚类分析结果表明,抗性较强的射手2号与其他紫花苜蓿品种的亲缘关系较远,与其杂交有可能产生较大的杂种优势。     

全基因组SNP分型技术在畜禽遗传育种研究中的应用

随着畜禽资源分子鉴定、物种进化、全基因组育种等热点领域的逐渐兴起,准确的全基因组SNP分型成为了畜禽基因组研究的关键。基因芯片、重测序、简化基因组测序及靶向捕获测序等全基因组SNP分型技术已广泛应用于畜禽基因组研究中。本文概述了全基因组SNP分型技术的原理及其在全基因组关联分析、选择信号分析和畜禽遗传资源背景分析等方面的应用,以期为畜禽基因组研究和育种应用提供借鉴和参考。     

生长猪大米蛋白消化能、代谢能的评定及预测模型研究

本试验通过采集我国多个地区大米蛋白样品,分析大米蛋白常规成分,测定生长猪消化能(DE)、代谢能(ME),建立大米蛋白常规成分与生长猪DE、ME之间的关系。试验选用体重(33.0±1.3)kg的"杜×长×大"三元杂交健康去势公猪12头,采用2个6×6拉丁方试验设计,包括1种基础饲粮和11种大米蛋白替代15%基础饲粮的试验饲粮。采用全收粪法和套算法结合测定大米蛋白猪DE、ME,并将大米蛋白的常规成分与猪DE、ME进行相关和回归分析,建立大米蛋白猪DE、ME预测模型。结果表明,11种大米蛋白风干基础下猪DE为(18.13±1.12)M J/kg,M E为(16.44±1.59)M J/kg。由此得出,大米蛋白猪DE最佳预测模型(绝干基础)为DE=22.17-0.51NDF(R2=0.50,RSD=0.93),DE=18.58-0.49 CF+0.31 EE(R2=0.70,RSD=0.77);M E最佳预测模型(绝干基础)为ME=21.42-0.74 NDF(R2=0.52,RSD=1.30)。NDF为大米蛋白猪DE、M E最佳预测因子。