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为建立一种牛支原体(Mycoplasma bovis,MB)和牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)的快速鉴别诊断方法,针对MB的uvr C基因和BVDV的5'端非编码区(5'-UTR)保守基因序列,分别设计两对特异引物,并将三温式PCR扩增程序简化为二个温度梯度,建立了鉴别MB和BVDV的二重二温式PCR方法。该方法能同时扩增MB和BVDV,扩增产物大小分别为412和170 bp。特异性试验结果显示,该方法对参试的所有毒株只扩增MB和BVDV基因组,对其它牛病原体无扩增;敏感性试验结果显示,该方法最低能同时检测到104拷贝的两种目的核酸;干扰性试验结果显示,该方法能同时检测两个模板不同浓度的组合,试验结果不受模板影响。综上,本研究所建立的二重二温式PCR方法特异、敏感、快速、简便,可应用于MB和BVDV临床鉴别诊断和流行病学调查。 相似文献
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孕牛血清中早孕因子的分离纯化 总被引:2,自引:0,他引:2
采用DEAE-Sepharose(DEAE-琼脂糖凝胶)、CM-Sepharose(CM-琼脂糖凝胶)等离子交换层析、抗孕牛全血清IgG-Sepharose 4B亲和层析等技术,分离纯化妊娠4-5个月健康孕牛全血清中的早孕因子(EPF),用玫瑰花环抑制实验对各阶段产物EPF活性进行检测。结果表明,经层析过柱后的CM-ⅡA提取物有EPF活性。经SDS-PAGE银染显色证实它含有分子量为21、67、80KD的蛋白,实验结果支持21KD的多肽为主要EPF活性物成分。同时实验表明了亲和层析对进一步纯化EPF是可行的。 相似文献
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规模猪场母猪繁殖障碍综合征的病因调查 总被引:3,自引:0,他引:3
作者采用9套试剂盒,检测了7种能引起猪繁殖障碍综合征的传染病,对来自有繁殖障碍症状的305场次进行猪瘟(HC)抗原检测,并对包括这305场次在内的978个猪场(次)病例的6346份血清样品及52698份田间血清样品进行HC、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、伪狂犬病(PR)、日本乙型脑炎(JE)、细小病毒感染(DPV)、猪衣原体病(Chla)、布鲁氏菌病(Bruc)等7种传染病的抗体检测。结果表明,在有繁殖障碍症状的猪场,HC抗原检出率高达61.97%,并且在不使用疫苗的情况下,PR3RS、PR、JE、Chla和PPV的抗体阳性场分别为49.42%、34.29%、12.72%、31.71%、和48.08%。HC和:PR交叉感染率达23.81%;HC和:PRRS交叉感染率为9.52%,PR和PRRS交叉感染率高达59.65%;另外JE、PPV也同HC、PR、PRRS存在部分交叉感染。不使用疫苗的田间血清样品的PRRS、PR的抗体阳性率也高。HC与PRRS.PR、Chla、JE和PPV中的一种或几种混合感染可能是引起繁殖障碍造成严重损失的主要原因。加强综合防制,优化免疫程序、把握引种关、加强生物安全措施是防制猪繁殖障碍综合征的关键。 相似文献
29.
哺乳动物卵母细胞孤雌激活的研究进展 总被引:3,自引:0,他引:3
本文概述了卵母细胞孤雌激活的研究历程,并从激活机制、激活方法及影响因素等方面对孤雌激活的研究意义和发展前景进行了综述。 相似文献
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为了探讨利用近红外漫反射光谱技术(NIDRS)快速定量分析饲料添加剂L-赖氨酸硫酸盐中L-赖氨酸含量的可行性,本试验在全国范围内收集了具有代表性的L-赖氨酸硫酸盐添加剂76个,采用国家标准方法对样品中的L-赖氨酸含量进行化学赋值;用光栅型近红外光谱仪扫描L-赖氨酸硫酸盐样品,获取了不同物理状态下样品的近红外光谱图。依据L-赖氨酸含量将样品分为定标集和验证集,运用适当的光谱预处理方法,采用竞争性自适应重加权(CARS)算法结合偏最小二乘法(PLS)建立了L-赖氨酸硫酸盐的近红外定标分析模型,并将该模型与全波长模型进行了比较。结果表明:用烘干、60目粉碎后的样品结合CARS算法建立的定标模型最优,定标集校正决定系数(R2C)为0.954,校正集标准偏差(SEC)为0.510,交互验证标准偏差(SECV)为0.659;验证集预测决定系数(R2P)为0.952,预测标准偏差(SEP)为0.554,相对分析误差(RPD)值为3.83。由此可见,NIDRS定量分析L-赖氨酸硫酸盐具有一定可行性,对于丰富我国氨基酸盐及其他氨基酸制品的快速检测方法具有实际的应用意义。 相似文献