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骨形态发生蛋白15(bone morphogenetic protein 15,BMP15)基因突变对绵羊排卵率、产仔数以及繁殖力有很大影响,本研究旨在建立快速可视化检测BMP15基因B2突变的技术。将改良的扩增阻滞突变系统(amplification refractory mutation system,ARMS)与核酸染料SYBR Green Ⅰ结合,针对BMP15基因B2突变设计ARMS特异性引物,使引物下游3'端的最后一个碱基为A,并在下游引物3'端的第3位碱基处设计额外的错配,以提高引物的特异性;经ARMS PCR扩增后,向产物中加入SYBR Green Ⅰ,通过肉眼观察PCR管内的颜色变化来检测BMP15基因的B2突变。经测序发现所采集的样本均为野生型,因此,利用重叠延伸PCR构建BMP15基因B2突变型模板,测序结果显示BMP15基因B2突变型模板构建成功。ARMS PCR结果显示,ARMS特异性引物能够只扩增突变型模板,而不会扩增野生型模板,且扩增效果良好。ARMS PCR扩增后加入SYBR Green Ⅰ发现已知野生型模板与阴性对照一致,呈SYBR Green Ⅰ原始颜色橙黄色,而已知突变型模板呈亮绿色,且色差明显,肉眼可辨。用建立的可视化检测BMP15基因B2突变的技术检测50个小尾寒羊基因组DNA (随机向其中20个样本中加入构建的BMP15基因B2突变型模板),将可视化检测的突变型样本编号与混合样本时记录的编号对比,结果表明该技术能够准确检测绵羊BMP15基因的B2突变,且准确率高达100%。将构建的BMP15基因B2突变型的模板进行梯度稀释,对本试验可视化检测体系的灵敏度进行检测,发现ARMS可视化检测技术的灵敏度达到0.006 ng/μL。因此,本研究建立的技术能够可视化地检测绵羊BMP15基因B2突变,且准确率高,有望为高繁殖力绵羊的选育提供技术支持。 相似文献
942.
我国是饲料生产加工大国,饲料生产量在世界上占据领先地位,饲料进出口贸易成交量较为庞大.在我国饲料进出口贸易中,近年来的贸易差有扩大趋势.这是由于我国长期在国外进口大量的饲料原料、粮食、产品导致的,另外,由于我国饲料出口贸易表现不够突出,对我国经济增长难以起到明显推动作用.本文从进出口贸易对经济的影响出发,通过分析我国饲... 相似文献
943.
Mei-Ju Liu Hong Chen Wen Li Xin-Xia Chen Chuan-Hong Wang Qing-Yuan Sun Xue-Yuan Heng 《Animal Science Journal》2021,92(1):e13608
This study aims to investigate the morphology and distribution of mitochondria, spindles, and chromosomes in oocytes of aged mice and examine the effects of SRT1720 on oocyte maturation. C57BL/6J mice were divided into young (4–8 weeks) and aged groups (48–52 weeks). In vitro maturation media contained (0.05, 0.1, and 1.0 μM) SRT1720 and 0.1-μM dimethyl sulfoxide (DMSO control). The rate of chromosome misalignment and spindle misorientation in oocytes of aged mice were significantly higher than that of young mice (P < 0.01). Fluorescence intensity of mitochondria from oocytes of aged mice was significantly lower than that of young mice (P < 0.01). SRT1720 at 0.1 μM significantly improved oocyte maturation, fertilization, and blastocyst formation in aged mice compared with young mice (P < 0.01). Additionally, immunofluorescence intensity of mitochondria, normal spindle morphology, and chromosome alignment were notably enhanced with SRT1720 when compared with the DSMO control group for metaphase II (MII)-stage oocytes matured in vitro (P < 0.01); 0.1-μM SRT1720 enhanced the expression level of SRIT1 in oocytes from aged mice. In summary, the aged mice oocytes showed increased nuclear and cytoplasmic defects, whereas SRT1720 enhanced oocyte maturation and quality. We concluded that 0.1-μM SRT1720 was an appropriate concentration for in vitro maturation media. 相似文献
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948.
采用症状自评量表(SCL-90)及自编的心理干预调查表对413名中学生进行调查。结果表明:22.1%的中学生接受过心理干预;接受干预组的中学生在躯体化、人际敏感、焦虑和精神赢性四个因子上显著低于未接受干预组;接受干预组的女生在焦虑、精神病性两个因子上得分显著低于未接受干预组;初二年级接受干预组的中学生在人际敏感、精神病性两个因个子上得分显著低于未干预组,初三年级接受干预组的中学生在躯体化因子上得分显著低于未干预组。地震后中学生心理健康状况欠佳,心理干预能有效地改善中学生心理健康状况,在重大创伤性事件后有必要及时给予心理干预。 相似文献
949.
表达马立克氏病病毒CVI988/Rispens株糖蛋白B基因的重组鸡痘病毒疫苗的免疫保护研究 总被引:1,自引:0,他引:1
用鸡痘病毒载体表达马立克氏病病毒(MDV)糖蛋白B(gB)基因构建成重组鸡痘病毒(rFPV)。以MDV GA或Md5和RBIB混合攻毒,在不同品种的鸡中评价rFPV-gB/R单价苗和与火鸡疱疹病毒(HVT)组成的二价苗的免疫保护效力。试验结果表明,MDV疫苗和FPV母源抗体阴性的SPF鸡和母源抗体阳性的商品鸡中,rFDV-gB/R均能提供免疫保护作用,且其中一种商品蛋鸡中rFPV-gB/R与HVT液氮苗或HVT冻干苗结合使用,均有显著的免疫协同保护作用。免疫学研究指出,rFPV-gB/R与常规疫苗一样,可显著地降低疫苗免疫攻毒鸡的病毒血症和羽囊排毒。 相似文献
950.
果子狸细小病毒性肠炎首次诊断及防治初探 总被引:1,自引:0,他引:1
1999年 9~ 1 0月 ,湖南某果子狸驯养场发生一起以下痢、便血为主要症状的急性病毒性传染病 ,60d内造成 1 87只果子狸发病 ,1 56只果子狸死亡 ,尤其是当年生仔狸的发病率和死亡率很高 ,分别为 66 0 %和 96 2 %。根据流行病情况、临床症状、病理变化和血清学检验 ,以及病原体分离、电镜检查和生物学试验证实 ,此疫情为细小病毒感染。用此病毒与细小病毒抗体血清做交叉血清学检测反应为阳性 ,因此证明此病毒与犬细小病毒有共同抗原关系。通过对健康狸进行紧急脏器疫苗接种和用犬细小病毒弱毒疫苗加强免疫 ,以及采取其他综合防治措施 ,迅速使本病得到有效控制 相似文献