应用荧光定量PCR 技术分析普通菜豆品种中尖镰孢菜豆专化型定殖量

尖镰孢菜豆专化型(Fusarium oxysporum f. sp. phaseoli)引起的菜豆枯萎病是菜豆生产中最严重的维管束类病害之一, 防治该病害有效方法是利用抗病品种。因此, 一种能够从菜豆受侵染组织中准确鉴定并定量检测枯萎病原菌含量的方法将有助于筛选抗性品种, 应用于普通菜豆枯萎病抗病育种。本研究基于荧光定量PCR技术开发出一种能够对定殖于菜豆组织中的枯萎病原菌准确定量的新方法。该技术对根、茎组织中病原菌DNA的最低检测量为1 pg, 能在接种病原菌6 d后明显区分抗病性不同的品种, 可在菜豆植株表现出明显发病症状前准确鉴定不同品种抗性水平的差异。经验证参试的感病品种BRB-130和A0640-1根、茎组织中定殖的病原菌DNA量显著高于抗病品种260205和黑芸豆, 与表型鉴定的结果完全符合。利用荧光定量PCR技术能够在病原菌侵染早期快速、准确、高效定量菜豆组织中定殖的病原菌, 这对指导菜豆抗病育种和植物病害传播的研究都具有非常重要价值。     

一株保加利亚乳杆菌N~+诱变前后特性比较研究

以一株N+诱变保加利亚乳杆菌为研究对象,比较研究诱变前后菌种的形态、活力、产酸性、产黏性等特性变化,探讨N+诱变处理保加利亚乳杆菌在工业生产中应用的可行性。结果表明,在发酵培养基(11%脱脂乳)培养条件下,出发菌株L0603菌株活力为0.39,N+诱变菌株P0603活力为0.29,诱变后菌株活力降低了35%;P0603凝乳性能良好,但产酸性比L0603差,诱变后产酸性降低;P0603黏度最高值为360mPa.s,L0603的黏度最高值为151.5mPa.s,诱变后菌株黏度提高了60.6%;L0603的胞外多糖最高产量为17.56mg/L,P0603的最高产量为44.6mg/L,诱变后菌株胞外多糖产量提高了57.9%。     

肉牛屠宰线不同工序中沙门菌和大肠杆菌污染调查及分离鉴定

为了确定肉牛屠宰线沙门菌和大肠杆菌的污染情况,选取山西省2家屠宰厂(A、B),分别在屠宰线7道不同工序和屠宰刀具上进行采样,采用传统方法进行沙门菌和大肠杆菌的分离、培养,利用生化鉴定法和16SrDNA序列分析法对分离菌株进行鉴定。结果表明:A厂所有工序均未发现沙门菌和大肠杆菌污染情况;B厂所有工序均未检测出沙门菌,但在宰前皮毛和粪便中检测到8株疑似大肠杆菌,经生化鉴定法和16SrDNA序列分析法全部确定为大肠杆菌。综上表明,选取的2个肉牛屠宰加工企业屠宰线相关工序消毒、减菌措施到位,但应注重宰前动物的规范化管理,以减少宰前污染。     

鸭茅幼苗生长及形态对铝胁迫的响应

选取我国西南地区的鸭茅(Dactylis glomerata)主栽品种‘德纳塔’、‘安巴’、‘宝兴’和‘牧友’为供试材料,研究酸性环境下不同梯度的铝离子(0,10,30,50和100 μM)对鸭茅幼苗生长及形态的影响。结果表明:铝胁迫下,鸭茅枝条干重、根系干重、植株形态及根系伸长均受到显著抑制,且随着浓度的增加呈现出下降趋势;低浓度(10～30 μM)铝离子处理对鸭茅生长造成的抑制较弱,对鸭茅植株的健康形态塑造没有造成影响;而高浓度(≥50 μM)铝离子处理则对鸭茅植株根系伸长和植株形态造成严重的抑制,不利于植株后期的健康生长;供试鸭茅地下部根系积累铝的量要大于地上部枝条,且品种间存在一定差异,‘牧友’根系中铝含量最低,耐受性较强。表明鸭茅通过改变植株形态和调控自身积累铝的水平来应对酸性土壤中的铝离子胁迫,但是酸性铝离子环境对鸭茅早期生长仍具有一定的毒害作用,低浓度造成的影响较小,而高浓度则对鸭茅植株生长和形态塑造均造成不良的影响。     

伪狂犬病毒UL14基因缺失突变株的构建及其生物学特性研究

UL14在α-疱疹病毒中相当保守,但其在伪狂犬病毒中的功能尚不清楚。本研究以伪狂犬病毒鄂A株（PRV-Ea）为亲本株,通过同源重组,将编码EGFP的真核表达盒插入到伪狂犬病毒基因组的UL14基因中,PCR检测和荧光观察证实获得了能稳定表达EGFP的UL14插入失活突变株PRV-UL14D。将PRV-UL14D感染IBRS-2细胞,发现该突变株较PRV-Ea野毒株增殖缓慢,而且PRV-UL14D突变株感染细胞后形成的蚀斑也明显小于PRV-Ea野毒株,但在稳定表达UL14的IBRS-2细胞系中,PRV-UL14D与PRV-Ea野毒株的增殖速度、形成的蚀斑大小均无明显差异。进一步将PRV-UL14D感染BALB/c小鼠,发现与相同剂量的PRV-Ea野毒株感染相比,小鼠平均死亡时间明显延缓。上述研究结果表明,UL14并非伪狂犬病毒增殖必需的,但其缺失可延缓病毒增殖,推测UL14可能与病毒粒子在细胞间的扩散有关。     

青海高原地区良种肉牛改良当地黄牛的效果

在青海高原环境下,用引进的良种肉牛蓝白花、利木赞、西门塔尔和皮尔蒙特改良当地黄牛.结果显示四个杂交组合F1代不同年龄的生长速度和体尺指标均明显优于青海黄牛(P＜0.01),说明用良种肉牛改良青海黄牛效果明显;在不同杂交后代的比较中,皮×黄F1代各年龄段体重均高于蓝×黄F1、利×黄F1和西×黄F1(P＜0.01),皮×黄F1代还保留了青海黄牛抗逆性强,耐粗饲等优良特性,杂交组合较为理想;皮尔蒙特牛可作为当前高原环境下改良青海黄牛的理想父本品种使用.     

上海市规模化猪场保育猪传染病的调查分析

于2003年-2004年间对上海的13个规模化猪场的保育猪进行了集中采样,并结合临床检查、细菌学检测、血清学检测和病毒学诊断等方式对保育猪传染病进行了综合性调查,基本弄清了保育猪传染病的主要致病因子,为采取切实有效的针对性措施提供了技术支持。     

ie-1和lef-1基因dsRNA表达元件转染及转化细胞对家蚕核型多角体病毒增殖的抑制

通过RNAi介导可以抑制病毒增殖,将相应的RNAi元件通过转基因转入宿主有可能使宿主对病毒产生一定的抗性。根据家蚕核型多角体病毒(BmNPV)基因组中的病毒复制必需基因ie-1、lef-1设计相应的RNA干扰区段,并构建相应的转基因载体转入家蚕BmN细胞中,瞬时表达结果显示转染了转基因RNAi载体的BmN细胞均对BmNPV有一定的抑制作用。IE dsRNA在病毒滴度为10-4时有抑制作用,在病毒滴度为10-5时有比较好的作用;LEF dsRNA则在病毒滴度为10-5时有抑制作用,在病毒滴度为10-6时有较好的抑制作用。通过转基因及G418筛选后,转基因IE dsRNA细胞在病毒滴度为10-4显示出一定的抑制作用,在病毒滴度为10-5表现了明显的抑制作用;而转基因LEF dsRNA细胞在病毒滴度为10-5有一定的抑制作用,但只维持了一个时段。     

中国桑树害虫名录(Ⅳ)

记述了分布于我国的鳞翅目(Lepidoptera)夜蛾总科(Noctuoidea)的灯蛾科(Arctiidae)、夜蛾科(Noctuidae)和毒蛾科(Lymantriidae)桑树害虫共68种,分别介绍了害虫的中文名称、学名、寄主种类及主要分布区域,为了解桑树灯蛾类、夜蛾类和毒蛾类害虫的发生与危害提供相关的基础信息。     

南疆玉米和不同糖分甜高粱的青贮品质分析

 为筛选适宜南疆地区的青贮甜高粱品种,采用罐装青贮的方法,以青贮玉米为对照,研究了糖分含量存在差异的６个品种甜高粱青贮的感观性状及其营养成分。结果显示,１）新高粱２号、考利和丽欧３个甜高粱品种青贮成功率均达到了１００％,ｐＨ 值小于４．１２,感官评价为１级优等。甜饲１号和玉米青贮成功率为８０％,ｐＨ 值分别为４．２７和４．１８,感官定级为２级尚好。大力士青贮成功率为４０％,ｐＨ 值为４．９７,感官定级为３级中等。Ｘ０９６青贮 成功率为２０％,ｐＨ５．３１,定级为４级腐败。丽欧、考利、新高粱２号及玉米青贮的乳酸含量较高,丁酸含量较低;而Ｘ０９６、大力士青贮丁酸含量偏高,乳酸含量则较低。２）大力士甜高粱青贮水分含量最高（P ＜０．０５）,Ｘ０９６甜高粱青贮饲料水分含量最低（P ＜０．０５）。甜高粱丽欧、考利和玉米青贮饲料的粗蛋白含量均超过了７％,显著高于其他各青贮样本（P ＜０．０５）,Ｘ０９６青贮饲料粗蛋白质含量最低（P ＜０．０５）。粗脂肪含量以考利甜高粱青贮饲料最高,为３．３０％,显著高于玉米、大力士和Ｘ０９６ 青贮饲料（P ＜０．０５）。考利和丽欧甜高粱青贮饲料水溶性碳水化合物（ｗａｔｅｒｓｏｌｕｂｌｅｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ,ＷＳＣ）含量均超过了４．５％,显著高于其他各青贮饲料ＷＳＣ 含量（P ＜０．０５）。青贮玉米ＷＳＣ 含量高于Ｘ０９６和甜饲１ 号。３）粗纤维、中性洗涤纤维及酸性洗涤纤维含量,以Ｘ０９６ 甜高粱青贮最高（P ＜０．０５）,丽欧、考利、甜饲１号和玉米青贮基本在同一水平（P ＞０．０５）。４）各品种甜高粱及玉米青贮的灰分、钙、磷含量无显著性差异（P ＞０．０５）。可见,在南疆可选择新高粱２号、考利、丽欧等甜高粱品种替代玉米来制作青贮饲料;选择大力士制作青贮,应采取延迟收割或晾晒等方法,以降低青贮前水分偏高的问题。