羊奇异变形杆菌的分离鉴定及药敏试验

为查明宁夏地区某羊场羔羊腹泻的发病原因并选择敏感药物用于治疗,从患病羔羊粪便中分离出4株细菌,进行形态特征、培养特性、16S rRNA测序、VITEK微生物鉴定系统鉴定、致病性试验及药敏试验。结果显示,分离菌为奇异变形杆菌。动物试验表明,4株奇异变形杆菌对小鼠具有很强的致病性。药敏试验表明,4株奇异变形杆菌对氨基糖甙类抗生素(阿米卡星、卡那霉素、链霉素)、氟苯尼考及头孢菌素类抗生素敏感,而对大环内酯类(红霉素和克林霉素)、复方新诺明、恩诺沙星全部耐药。对青霉素类(哌拉西林、氨苄西林、阿莫西林)、喹诺酮类(环丙沙星、氧氟沙星、诺氟沙星)、四环素、万古霉素、庆大霉素呈现不同程度的耐药。结果表明,该4株奇异变形杆菌具有较强的致病力和多重耐药性,可能是此次羔羊腹泻的致病菌,治疗首选氨基糖甙类、氟苯尼考及头孢菌素类抗生素。     

禽流感病毒H9N2亚型三重PCR检测方法的建立

为建立简便快速检测禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)并同时区分出H9、N2亚型的方法,本试验根据基因库中H9亚型AIV的HA基因、N2亚型AIV的NA基因及AIV的M基因序列,分别设计了3对针对这3种基因保守序列的引物,建立了AIV H9N2亚型的三重PCR检测方法。应用该方法对H9N2亚型AIV模板进行PCR扩增,可得到3条与试验设计相符的目的条带,分别为313 bp (HA基因)、451 bp (NA基因)和667 bp(M基因);对非H9亚型的N2亚型AIV模板进行扩增,出现2条特异性扩增条带,即451 bp (NA基因)和667 bp(M基因);对非H9、N2亚型AIV模板进行扩增则只出现一条目的条带,即667 bp(M基因);对其他禽呼吸道病原体进行PCR扩增,结果均为阴性。敏感性试验结果显示此三重PCR方法最低检出限为10^-2 ng/μL。应用所建立的三重PCR方法对120份临床病料进行检测的结果与病毒分离鉴定结果一致。各项试验结果均表明,该方法对于禽流感病毒尤其是H9、N2亚型禽流感病毒的检测具有快捷、特异、灵敏的特点。     

胞质型磷脂酶A2基因克隆及其表达量随大黄鱼仔稚鱼生长发育的变化

利用同源克隆技术和cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆大黄鱼胞质型磷脂酶A2(cPLA2)基因的cDNA全长.此外,应用实时定量PCR法检测不同日龄大黄鱼仔稚鱼cPLA2基因的表达量.序列分析结果表明:cPLA2基因全长2 550 bp(GenBank登录号:KF006240.1),其中5'端非编码区176 bp,开放阅读框2 169 bp,3'端非编码区205 bp,共编码723个氨基酸.系统进化树分析结果表明:克隆所得大黄鱼cPLA2基因与其他鱼类的cPLA2基因亲缘关系较近,与哺乳动物的亲缘关系较远.定量检测结果表明:大黄鱼仔稚鱼cPLA2基因的表达量随日龄的增加为先显著升高(1、3、7日龄vs.15日龄,P＜0.05),在15日龄时达到最高值,随后显著下降(15日龄vs.19日龄,P＜0.05),之后趋于平稳.由此可知,大黄鱼从仔稚鱼到幼鱼早期的变形过程中,磷脂分解代谢的关键酶cPLA2基因的表达量呈现有规律的变化,这可能对机体保持体内磷脂的动态平衡、维护细胞膜的流动性具有重要的意义.大黄鱼仔稚鱼cPLA2基因表达量的变化趋势在一定程度上可以衡量大黄鱼消化系统的发育情况.     

草原生态服务价值计量方法的研究

在对草原生态服务系统详细分类的基础上,针对草原生态系统提供的生态服务功能类型的不同以及各种具体计量方法适用范围的不同,总结出适合不同草原生态服务价值的机会成本法、影子工程法、市场价值法和旅行费用法等计量方法。     

猪圆环病毒2型核酸疫苗的小鼠免疫保护试验

为了研究猪圆环病毒2型(PCV2)核酸疫苗在小鼠攻毒试验中的免疫保护效果,以PCV-2 GXWZ-1株为模板,扩增出ORF2基因及其截短基因8个片段(A(ORF2)、B(51-100aa)、C(101-150aa)、D(181-235aa)、E(151-200aa)、F(51-150aa)、G(101-235aa)、H(51-235aa)),将其插入到pcDNA3.0载体中,构建出真核表达质粒,并将其转染至PK-15细胞,用间接免疫荧光试验检测其瞬时表达情况。将试验小鼠随机分成9组,其中免疫组7组,阴阳性对照各1组,将纯化的真核表达质粒对小鼠进行组合免疫;二免后,用经处理过的PCV-2 GXWZ-2株阳性病料悬液腹腔注射免疫组和非免疫对照组小鼠,阴性对照组用生理盐水腹腔注射;其后进行体重记录、病理切片制作及PCR检测。结果表明:共有6个真核表达质粒成功在PK-15细胞中表达。在攻毒后的3周内,阳性对照组小鼠PCR诊断均为阳性;免疫组中,部分组小鼠在攻毒后第1周或在第2周为阳性,到第3周时各免疫组小鼠全部为阴性;阴性对照组始终为阴性。免疫组在病理保护学方面明显优于非免疫对照组,非免疫对照组的体重增长速率略低于免疫组和阴性对照组。由此可见猪圆环病毒2型核酸疫苗在小鼠攻毒试验中有明显的保护作用。     

周期性去叶对地毯草克隆生长的影响

以地毯草为研究对象,通过随机区组试验,初步研究不同去叶周期对地毯草克隆生长的影响。结果表明,不同的去叶周期之间存在显著或极显著性差异,中等强度去叶(D20)最适宜地毯草的生长。而过度去叶(D10)或长时间未去叶(D60)都抑制了地毯草的正常生长,从而导致地毯草草坪使用价值下降。因此,中度去叶有利于地毯草的克隆生长,提高成坪速率及其观赏价值。     

细胞因子在奶牛乳房炎生物学防治中的应用

鉴于细胞因子对乳房免疫机能独特有效的操纵和调节,在奶牛乳房炎控制中具有一定独特优势,作者就细胞因子的生物学活性、作用机制和特点进行了综述,并重点对国内外应用奶牛重组细胞因子防治奶牛乳房炎进行了总结、分析,有望为控制奶牛乳房炎提供安全、有效、实用的生物学防治途径。     

细胞壁降解相关酶以及在反刍动物应用中活性测定标准化的建议

针对当前国内外饲料酶制剂在反刍动物应用上结果不一致的现象,本文从酶制剂的角度,简要地分析了可能引起这些不一致的原因,同时就此总结了与细胞壁降解相关的主要的酶及其功能,并给出其活性测定标准化建议,为酶制剂的开发和应用提供参考。     

犬黄嘌呤尿结石症的诊断:36例临床病理报告

36只尿石症病犬表现体温下降,剧烈呕吐,食欲废绝,血清尿酸、肌酐、尿素氮升高,尿沉渣中有众多结晶体析出,经尿液和血清生化指标测定、B超探察、X线影像并结合饮食结构调查,确诊为黄嘌呤结石症。     

Evaluation of Associative Effects of Alfalfa Meal and Ammoniated Corn Straw by Gas Production Technique in vitro

This experiment was conducted to determine the best roughage combination of alfalfa meal (AM) and ammoniated corn straw (ACS),so as to improve the efficiency of roughage utilization and reduce the cost of feeding. The AM was mixed with ACS in the proportion of 100:0,80:20,60:40,50:50,40:60,20:80 and 0:100 with 3 replicates per group. The accumulated gas production (GP) at fermentation for 3,6,12,24,48 h,and the changes of pH,dry matter disappearance rate (DMD),ammonia nitrogen (NH₃-N) concentration, microbial protein (MCP) and volatile fat acids (VFA) concentration,and their single factor associative effects index (SFAEI) and multiply factors associative effects index (MFAEI) were determined by gas production technique in vitro after fermentation for 48 h. The results showed as follows:The accumulated gas production of AM20:ACS80 group was higher than that of the other groups,and the DMD of AM0:ACS100 group was significantly lower than other groups (P<0.05).The NH₃-N concentration of AM20:ACS80 and AM0:ACS100 groups was significantly higher than the other groups (P<0.05).The MCP concentration was highest in AM20:ACS80 group,and the concentration of acetic acid and TVFA in AM20:ACS80 group was the highest (P<0.05),and the acetic acid/propionic acid ratio in all groups was more than 3,which indicating that it belonged to the acetic acid fermentation type.The pH during the fermentation ranged from 6.69 to 6.85.The results of MFAEI and SFAEI of each combination indicated that only the AM20:ACS80 group showed the positive associative effects. In conclusion,the 20:80 combination ratio for AM and ACS showed the best associative effects.