牛传染性鼻气管炎病毒gD基因截短表达及其抗血清制备

gD糖蛋白是IBRV感染细胞的主要分子,在病毒吸附和侵入宿主细胞中发挥着重要作用。利用IBRV基因组DNA为模板,经生物学软件DNAstar分析主要抗原区,PCR扩增gD基因786bp片段,定向连接到pET32a(+)表达载体中,筛选阳性克隆转化BL21(DE3)表达菌中,IPTG诱导表达部分可溶的重组蛋白。Ni-NTA非变性纯化系统纯化蛋白,纯化的蛋白免疫新西兰兔制备抗血清,利用间接ELISA法检测抗血清效价为1∶6400;同时以该血清进行血清中和病毒实验,中和指数为1∶640,显示该抗血清具有良好的抗病毒能力,为进一步开发牛传染性鼻气管炎(IBR)的诊断检测试剂和疫苗奠定了重要基础。     

驻马店小麦条锈病发生气象指数预报方法探讨

小麦条锈病是河南省驻马店市小麦生产中的主要病害之一,历史上曾多次造成小麦严重减产。在分析小麦条锈病发病及流行特征的基础上,应用统计方法建立了条锈病病发气象指数预报气候模型和指数预测方程,并连续2a准确作出病发气象指数预报,为植保部门正确作出病害流行趋势预测预报提供了科学依据。     

白羊草根系形态特征对土壤水分阶段变化的响应

根系形态特征是评价植物适应胁迫环境的重要指标。以黄土丘陵半干旱区天然草地群落优势种白羊草为材料,研究了其根系生长和形态特征与水分供应条件的关系。采用盆栽控制试验,设置3个水分处理:高水(HW,80%田间持水量)、中水(MW,60%田间持水量)和低水(LW,40%田间持水量),分别在拔节期、开花期、结实期改善水分供应水平,在生育期末测定了白羊草根系生物量和各项形态指标。结果表明:白羊草根系生长与水分供应条件密切相关,持续高水处理有利于白羊草根系生长,其根系生物量、总根长和根表面积均显著提高(P<0.05);水分胁迫抑制了白羊草根系生长,但对白羊草根系平均直径影响不显著;根系生物量、总根长和根表面积间存在显著的正相关关系(P<0.01);不同生育期阶段胁迫后复水,白羊草根系表现出较强的可塑性,在拔节期复水且高的复水幅度能够显著提高白羊草根系生物量、总根长和根表面积(P<0.05)。这些说明白羊草根系对干旱胁迫有较强的耐受能力,其对阶段干旱胁迫后复水的响应与生育期及复水前干旱胁迫程度密切相关。     

不同植被恢复模式下呼伦贝尔沙地土壤反硝化细菌nirK基因组成结构和多样性研究

本研究选取呼伦贝尔沙地5种植被恢复模式(单播冰草、单播羊柴、单播柠条、冰草+柠条和冰草+柠条+羊柴+披碱草)为研究对象,以完全退化的沙地为对照,采用分子生物学技术分析了土壤反硝化细菌nirK基因组成结构和多样性,并探讨了与土壤理化因子的相关性。结果表明,土壤反硝化细菌nirK基因组成存在明显差异。单播羊柴模式土壤反硝化细菌nirK基因多样性指数最高,其次为单播冰草和单播柠条,而两种混播模式最低,这5种植被恢复模式均显著高于对照裸地。序列和系统发育分析结果表明,所获得的nirK基因片段与NCBI数据库中的nirK基因的相似度在81%99%之间,分别归属于苍白杆菌属、根瘤菌属及不可培养的细菌,其中与不可培养细菌相关的片段占到总数的50%以上。典范对应和相关分析结果表明,速效磷、pH、全氮、全磷和含水量对反硝化细菌的影响均达到显著水平,且5种理化因子间均具有极显著相关性,说明这5种理化因子相互关联,共同对反硝化细菌nirK基因组成变化起到决定作用。     

Effects of astragaloside on the levels of sex hormone and oxidative stress injury in rats with polycystic ovary syndrome

AIM To investigate the effects of astragaloside on the levels of sex hormone and oxidative stress in rats with polycystic ovary syndrome （PCOS）. METHODS Female SD rats （n=60） were randomly divided into normal control group, model group, Diane-35 （0.339 2 mg/kg） group, low dose astragaloside （12.5 mg/kg） group and high dose astragaloside （50 mg/kg） group, with 12 rats in each group. The PCOS model was induced by letrozole （1 mg/kg）, which was administered by gavage once a day for 3 weeks. After administration, the estrus cycle of the rats was observed by vaginal smear, and the ovarian index was calculated. HE staining was used to observe the histopathological changes of the ovaries. Serum levels of the sex hormones testosterone （T）, estradiol （E₂）, luteinizing hormone （LH） and follicle-stimulating hormone （FSH） were measured by ELISA. The levels of superoxide dismutase （SOD）, malondialdehyde （MDA） and glutathione peroxidase （GSH-Px） in serum and ovarian tissue were detected by colorimetry, and the protein levels of steroidogenetic acute regulatory protein （StAR） and apoptosis-related proteins cleaved caspase-3, Bax and Bcl-2 in ovarian tissue were detected by Western blot. RESULT Compared with control group, the oestrous cycle of the rats in model group was disorder, and the ovarian index was increased, ovary was polycystic. The serum levels of T, LH and MDAwere significantly increased （P<0.05）, while the contents of E2, FSH and the activities of GSH-Px and SOD were significantly decreased （P<0.05）. The levels of MDA, StAR, cleaved caspase-3 and Bax proteins in ovarian tissue were significantly up-regulated （P<0.05）. GSH-Px and SOD activities and Bcl-2 protein levels were significantly down-regulated （P<0.05）. CONCLUSION Astragalosideeffectively balances the levels of sex hormone in PCOS rats and relieves the oxidative stress injury, the mechanism may be related to the inhibition of StAR expression.     

鸽舍内环境因素与细菌总数的相关性研究

为了掌握规模化鸽场鸽舍内环境因素和环境中的细菌总数,为预防肉鸽疾病、保障健康提供科学依据,采用环境检测方法对南京市郊某规模化肉鸽场的4栋鸽舍进行空气质量检测。结果表明,鸽舍内春、夏、秋、冬的平均温度分别是15．69℃、29．94℃、21．44℃、4．33℃;平均相对湿度分别是79．53％、81．44％、78．24％、74．11％;平均风速分别是0．16 m／s、0．43 m／s、0．24 m／s、0．14 m／s;平均光照强度分别是37．25 lx、39．12 lx、38．53 lx、38．08 lx ;环境中的细菌总数分别是22．6×103 cf u／m3、44．93×103 cf u／m3、39．86×103 cf u／m3、14．99×103 cf u／m3。春、夏、秋季节的温度、光照强度等指标基本符合国家标准,冬季低于标准;相对湿度高于国家标准;风速低于国家标准。环境中的细菌总数夏、秋季节超出国家标准,冬、春季节在国家标准范围内。鸽舍环境中温度与细菌总数呈显著的正相关（P＜0．01）;相对湿度、光照与细菌总数呈不显著的正相关（P＞0．05）;风速与细菌总数呈显著性的负相关（P＜0．01）。     

温度、无血清培养对山羊卵母细胞体外成熟的影响

在38℃和39℃不同温度条件下培养山羊卵母细胞,成熟率分别为63．6％和57．3％,差异不显著,说明只要培养温度在山羊正常体温的变动范围内,对其卵母细胞的成熟率没有影响。10 mg/mL BSA代替10％FCS培养山羊卵母细胞成熟率为58．7％,对照组为62．5％,差异不显著,说明无血清培养可以代替血清培养。     

不同放牧制度对荒漠草原短花针茅空间异质性的影响

在不同放牧制度下,以荒漠草原短花针茅植物种群为研究对象,采用GS＋软件和地统计学分析方法对其空间异质性分布进行了研究。结果显示：对照区和划区轮牧区或自由放牧区都表现出很强的空间自相关性,且结构是导致短花针茅空间变异的主要因素。对照区、划区轮牧区和自由放牧区,短花针茅空间格局的分形维数相近,都接近于2。不同放牧制度下短花...     

春兰菌根的显微结构观察

应用石蜡切片法,借助于光学显微镜观察春兰无菌组培苗、接菌组培苗的根及野生状态下的新生营养根、老根,结果表明:接菌组培苗的根及野生状态下的新生营养根、老根,其皮层组织细胞内有大量的菌丝结等兰科菌根的典型结构,而无菌组培苗的根则无菌丝、菌丝结等结构。菌根真菌自外皮层薄壁通道细胞侵入根的皮层细胞,春兰菌根是典型的地生兰菌根。     

延黄牛ALDH1A1基因CDS序列克隆及其在各组织中的表达差异研究

为探索乙醛脱氢酶1A1(acetaldehyde dehydrogenase 1A1,ALDH1A1)基因功能,本试验以16月龄延黄牛母牛为研究对象,屠宰后采集心脏、肝脏、肺脏、肾脏、胃、十二指肠、皮下脂肪和背最长肌,提取总RNA。根据GenBank上公布的牛ALDH1A1基因mRNA序列(登录号:NM_174239.2),利用Oligo 7.0软件设计引物,应用RTPCR扩增ALDH1A1基因,将扩增产物连接pMD18-T载体进行克隆测序,获得延黄牛ALDH1A1基因完整CDS序列,应用生物信息学软件分析核苷酸序列及其蛋白结构。以延黄牛不同组织总RNA为模板,通过实时荧光定量PCR技术检测ALDH1A1基因在延黄牛各组织间的表达差异。结果显示,ALDH1A1基因CDS序列全长1 506bp,编码501个氨基酸;延黄牛ALDH1A1基因序列与野牛、牛的同源性最高(≥99.7%),与猫和豹的同源性分别为89.4%和89.6%,符合物种进化规律。ALDH1A1蛋白分子质量为54.805ku,理论等电点为7.16,亲水性较强,占86.4%,酸性氨基酸和碱性氨基酸分别占11.4%和12.2%,属于可溶性蛋白,但不是分泌性蛋白,无典型信号肽切割位点;存在31个氨基酸磷酸化位点(分值>0.5)。延黄牛ALDH1A1蛋白二级结构含有α-螺旋、延伸链、β-转角和无规则卷曲,分别占42.12%、16.17%、8.18%和33.53%,与该蛋白三级结构预测结果相同。实时荧光定量PCR结果表明,ALDH1A1基因在延黄牛肝脏、胃、皮下脂肪、十二指肠和肾脏组织中极显著表达(P<0.01);在背最长肌中显著表达(P<0.05)。本试验结果为进一步开展延黄牛ALDH1A1基因功能及肉质基因筛选研究提供了参考依据。