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AIM: To express osteopontin 13 peptide (OPN 13) in E.coli, and to test the biological activity of the purified products. METHODS: cDNA fragments containing RGD sequences were cloned into prokaryotic expression vector pET-32c(+) including His coding sequence to construct pET-32c-OPN 13 plasmid. E.coli DH5α transformed by pET-32c-OPN 13 plasmid was induced by IPTG at different concentrations for different times to identify the optimal induction condition. Expressed His-OPN 13 fusion protein was purified via Ni-NTA His Bind Resin metal chelation chromatography, and detected by VSMCs adhesion and migration analysis. RESULTS: His-OPN 13 fusion protein was expressed in soluble manner. The fusion proteins were purified via Ni-NTA His Bind Resin affinity chromatography. His-OPN 13 fusion protein specifically inhibited adhesion and migration of VSMCs stimulated by osteopontin in dose-dependent manner. CONCLUSION: The OPN 13 peptide is successfully expressed in E.coli DH5α. The purified His-OPN 13 fusion protein could inhibit the adhesion and migration of VSMCs stimulated by osteopontin. 相似文献
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WEI Chun-ying WANG Meng-hong WEI Yun-feng ZHENG Ze-qi PENG Jing-tian HUANG Jun WEN Yuan WU Zhi-yong 《园艺学报》2009,25(11):2122-2125
AIM: To investigate the effect and the mechanism of apolipoprotein (a) [apo (a)] on proliferation of vascular smooth muscle cells (VSMCs). METHODS: All VSMCs used in experiments were serial subcultured from primary cells and were identified by immunohistochemistry staining of α-actin. Cell growth assay was observed as cell counting and MTT assay. Western blotting was also employed to detect the related mechanism. RESULTS: All cells used in experiments were confirmed as VSMCs. Although apo (a) enhanced VSMCs proliferation, this effect was attenuated by anti-integrin αⅤβ3, LM609. Use these reagents alone had no effect on VSMCs growth. The results of Western blotting demonstrated that focal adhesion kinase (FAK) was activated by apo (a) and the expression of total or phosphorylated transforming growth factor β1 (TGF-β1) was also decreased. However, these effects described above were all blocked by LM609. CONCLUSION: Apolipoprotein (a) enhances VSMCs proliferation and this effect is mediated by integrin αⅤβ3, which activates FAK and attenuates TGF-β1 and phospho-TGF-β1 expression. 相似文献
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不同种植密度对豆薯块根产量的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
豆薯又名地瓜、沙葛、凉薯、土瓜、地萝卜等,食用部分为块根,其块根营养丰富,既可作水果生食,也可作蔬菜炒食.贵州余庆县常年种植面积在300 hm2左右.为了提高豆薯产量,增加农民种植豆薯的经济效益,对豆薯不同种植密度进行试验,探讨不同种植密度下豆薯产量效应,为指导农民种植豆薯提供科学依据. 相似文献
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基于最小二乘支持向量机的人民胜利渠灌区灌溉用水量预测 总被引:3,自引:0,他引:3
基于最小二乘支持向量机(LSSVM)良好的泛化能力和特点,以人民胜利渠灌区需水量为研究对象,选用径向基函数(RBF)作为核函数,建立了最小二乘支持向量机预测模型,对灌区需水量进行了模拟计算,用检验样本与灰色预测和基于RBF的神经网络模型的预测结果进行了比较,LSSVM预测的最大误差8.78%,平均误差4.90%。结果表明最小二乘支持向量机模型有较高的预测精度和较强的泛化能力,可为灌区水资源规划提供科学依据。 相似文献
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本文从红鳍笛鲷的生态习性、病害防治及市场风险三方面提出其在福建省东南部、广东东北部海域进行网箱养殖的风险防范对策:准确把握市场供求信息,在红鳍笛鲷的适宜生长温度范围18.0~33.0℃投放一定数量体长5.0cm以上鱼苗,每日投喂2~3次,日投喂量为鱼体重的5.0~7.0%,养殖过程中严格日常管理,及时发现及防治病害.作者于2004~2006年在厦门浏五店海域开展试验,经170天养殖可达商品??(450g以上),成活率85.3~91.5%,利润率18.8~72.1%. 相似文献