神经肽Y对犊牛肝细胞PC mRNA丰度及其活性的影响

取单层培养72 h生长良好的犊牛肝细胞,采用单因素重复试验,分别添加0、50、100、200、500、1000 pg/ml的羊体外合成神经肽Y（neuropeptide Y,NPY）,每个处理3个重复（每重复2孔）,再培养12 h后分别提取RNA和制备细胞上清液。应用荧光定量PCR方法检测外源NPY 对肝细胞糖异生关键酶丙酮酸羧化酶（pyruvate carboxylase,PC）基因表达的影响,同时用比色法检测其对肝细胞PC活性的影响。结果表明,一定浓度的NPY显著促进了肝细胞PC mRNA表达,增强了PC活性。     

云南屏边大围山微型鸡肉品质的研究

试验选用14周龄云南屏边大围山微型鸡公母各10只,对其肉品质物理特性指标进行测定分析。结果显示,公鸡、母鸡腿肌的系水率、嫩度、多汁性、红度（a值）、pH及肌纤维密度均显著高于胸肌,而公鸡、母鸡腿肌的剪切力、蒸煮损失和贮藏损失、亮度（L值）、肌纤维直径与胸肌相比显著降低;相同部位不同性别间比较结果显示,公鸡胸肌与腿肌的剪切力、肌纤维直径、胸肌贮藏损失显著高于母鸡,而母鸡胸肌与腿肌的嫩度和肌纤维密度均比公鸡的高。综合对剪切力、蒸煮损失、贮藏损失、系水率、嫩度、多汁性、风味和总体口感等指标分析,公鸡、母鸡腿肌的肉质高于胸肌,母鸡肉质高于公鸡。     

优力安肽对黄羽肉鸡生长性能及血液生化指标的影响

选择1日龄健康北方3号公鸡450羽,随机分成6组,每组设3个重复,试验Ⅰ组为对照组,试验II、III、IV、V、Ⅵ组分别添加20、40、60、80、100 mg/kg的优力安肽,在同一鸡舍中用围栏将各组鸡隔开（温度、湿度、光照均满足正常生产需要）,自动饮水,自由采食。分别于14、28、42、56、63日龄称重、采血,并于63日龄每重复取3只鸡进行屠宰。结果表明,日粮中添加60 mg/kg优力安肽的处理组与对照组相比,日增重提高了13.98%,料重比降低了3.43%（P<0.05）;试验鸡血液神经肽Y含量随日粮中优力安肽添加水平的增加而升高;试验鸡的日增重与血液生长激素含量呈强正相关（r=0.712）,与胰岛素样生长因子-Ⅰ呈正相关（r=0.812）;料重比与胰岛素样生长因子-Ⅰ呈强负相关（r=-0.796）。北方3号公鸡日粮中添加60 mg/kg的优力安肽,生产性能和经济效益最佳。     

不同ω6/ω3多不饱和脂肪酸日粮对AA肉鸡脂多糖免疫应激的影响

选用90只AA肉鸡母雏,饲喂30∶1、20∶1、10∶1、5∶1、2.5∶1 5种不同的不饱和脂肪酸（PUFA）日粮到56日龄,进行大肠杆菌脂多糖（LPS）和生理盐水连续3 d注射应激,研究不同比例ω6/ω3 PUFA对免疫机能的影响。试验结果表明,不同比例ω6/ω3 PUFA对应激前后体增重、应激后第1 d和第7 d血清总蛋白（TP）和IgG含量没有显著影响(P>0.05),但对血清白蛋白（Alb）含量、应激后第1 d新城疫抗体滴度、第7 d血浆皮质酮含量有显著影响(P<0.05)。LPS应激和对照相比,除对体增重的影响达到显著水平（P<0.05）外,对其他性状的影响均未达到显著水平(P>0.05)。与应激后第1 d相比,应激后第7 d的皮质酮水平下降,白蛋白、总蛋白含量和IgG含量上升,表现出机体缓解应激的变化。因此,不同比例的ω6/ω3 PUFA日粮对机体体液免疫功能产生不同程度的影响,其中20∶1日粮的平均血清TP和Alb含量在5种日粮中最高,2.5∶1日粮的平均血清IgG含量和ND抗体水平在5种日粮中最高。但随着5种日粮ω6/ω3 PUFA比值的降低,日粮间缓解应激的作用没有呈现明显的变化趋势。     

两种诱雄剂对黄瓜植株保护酶类活性的影响

通过测定AgNO_3和Ag_2S_2O_3两种诱雄剂对黄瓜雌性系h154,151和普通系h002植株保护酶类活性的影响,结果表明,茎尖中的POD,CAT活性较对照都有所升高,处理48 h时酶活性达到最高,POD活性增幅分别为164-4%,133.5%,241.5%和23.1%,16.5%,57.2%;CAT活性增幅分别为91.3%,95.7%,113.5%和69.6%,64.3%,82.4%。AgNO_3处理黄瓜幼苗后SOD活性先下降,后升高,处理120 h时,SOD活性达到最高,增幅分别为75.3%,65.2%,30.7%和27.2%,36.9%,16.2%。     

Marc145细胞源EDC3基因的克隆及其生物信息学分析

为获得Marc145细胞源EDC3基因序列,分析其序列特征及编码蛋白的结构和功能,本试验采用RT-PCR方法从Marc145细胞中扩增EDC3基因,并进行克隆和序列测定;应用DNAStar软件分析该基因的核苷酸和氨基酸序列,与参考序列经BLAST比对后分析同源性,并构建系统进化树;利用生物信息学方法对其编码区蛋白进行二级结构、三级结构、B细胞表位、跨膜结构域和信号肽预测。结果显示,Marc145细胞源EDC3基因长度为1 527 bp,共编码507个氨基酸;EDC3基因编码区核苷酸序列与绿猴、猕猴、狒狒、人、倭黑猩猩、马、野猪、虎鲸、绵羊、非洲象和大熊猫的同源性在91.5%~99.2%之间,与非哺乳动物原鸡同源性最低,仅为81.2%;EDC3氨基酸序列与上述物种的同源性在95.3%~99.6%之间,与原鸡的同源性仅为88.8%。系统进化树结果显示,Marc145细胞源EDC3基因与绿猴的亲缘关系最近,其次是灵长类。蛋白结构预测结果表明,EDC3蛋白主要由α-螺旋和无规则卷曲组成,分别为23.38%和47.35%,二级结构与三级结构预测结果相符。该蛋白存在多个B细胞优势抗原表位,无跨膜结构域及信号肽区域。本试验结果可为Marc145细胞源EDC3基因功能的进一步研究提供参考。     

牛病毒性腹泻病毒致病机制研究进展

牛病毒性腹泻（bovine viral diarrhea,BVD）和黏膜病（mucosal disease,MD）均是由牛病毒性腹泻病毒（bovine viral diarrhea virus,BVDV）感染引发的传染病,严重威胁世界养牛业的发展。文章概述了BVDV分型及其分子生物学特征,并从急性感染、经胎盘或子宫感染、持续性感染和黏膜病4个方面总结了近期国内外BVDV致病机制的研究进展。根据序列保守性及是否致细胞病变可将BVDV分为两种基因型和两种生物型,其中,新发现的"HoBi"株归类为瘟病毒属。BVDV基因进化很快,基因组编码4种结构蛋白和8种非结构蛋白,编码蛋白在病毒的复制、翻译及在宿主致病过程中发挥重要作用。BVDV致病机制复杂,急性感染会造成病毒血症、繁殖障碍、免疫抑制等,急性感染牛发生腹泻的原因与BVDV感染胃肠道的肌层、黏膜下层并干扰肠道神经的正常功能相关,非致细胞病变型（NCP）BVDV是造成急性感染的病因。胚胎感染BVDV取决于病毒首次侵袭时胎儿在子宫内的生长阶段。NCP型BVDV具有抑制胎儿体内产生Ⅰ型干扰素的能力,致使该病毒在宿主中得以生存并形成持续性感染牛,当持续性感染牛再次感染与NCP型BVDV高度同源的致细胞病变型（CP）毒株时直接诱发黏膜病。两种生物型的产生是发生持续性感染和黏膜病的重要因素,NCP型可向CP型BVDV进行转化。本综述有助于发现控制BVD-MD传播的新途径,为消灭该病和新型疫苗的研制提供参考。     

中国荷斯坦奶牛EEF1D基因的SNPs检测及其与产奶性状的关联分析

试验旨在研究中国荷斯坦奶牛真核生物翻译延伸因子1D（eukaryotic translation elongation factor 1 delta,EEF1D）基因的多态性及其与产奶性状的相关性。利用Sequenom MassARRAY SNP分型技术对宁夏地区1 252头中国荷斯坦奶牛EEF1D基因的多态性进行了检测,并对其多态位点不同基因型和组合基因型与产奶性状进行了关联分析。结果显示,EEF1D基因的5'侧翼区存在2个SNPs位点,即EEF1D-1和EEF1D-3;经检测发现,EEF1D-1存在2种基因型,EEF1D-3存在3种基因型。χ²检验表明,中国荷斯坦奶牛在EEF1D-1位点偏离Hardy-Weinberg平衡状态（P < 0.05）,在EEF1D-3位点未偏离Hardy-Weinberg平衡状态（P > 0.05）;EEF1D-1和EEF1D-3位点多态信息含量（PIC）分别为0.10和0.28,分别呈现低度多态和中度多态。在试验群体中,EEF1D-1位点对乳脂率和乳蛋白率性状的效应均达到极显著水平（P<0.01）,对305 d产奶量性状的效应达到显著水平（P<0.05）;EEF1D-3位点对305 d产奶量、乳脂率和乳蛋白率性状的效应均达到极显著水平（P<0.01）;EEF1D基因的优势基因型组合GG-AG和GG-GG个体乳脂率均显著高于GG-AA组合个体（P<0.05）。说明EEF1D基因可以作为影响中国荷斯坦奶牛产奶性状的候选基因用于标记辅助选择。     

运动马驯养与管理专业实践教学模式的探索

根据内蒙古农业大学职业技术学院运动马驯养与管理专业6年来实践教学模式的总结及经验的积累,客观分析了现阶段我国马术行业发展模式以及国内马术人才培养模式存在的问题,并从教学中总结出适应高职院校马术技能型人才的“全程定岗、两轮实训”的实践教学模式,以期为建立完善的人才培养体系提供参考。     

An improved method to develop cell culture model of intermittent hypoxia

AIM: To establish and validate a novel model of cultured cells for imitating intermittent hypoxia. METHODS: In a chamber with experiment cabin and simulated air control cabin, the frequency and duration of the intermittent hypoxia model according to the time of hypoxia and reoxygenation were evaluated. The A549 cells were randomly divided into 7 groups, named as control (Con) group, 6 h intermittent hypoxia (6IH) group, 9 h intermittent hypoxia (9IH) group, 6 h simulated air control (6AC) group, 9 h simulated air control (9AC) group, 4 h sustained hypoxia (4SH) group, 6 h sustained hypoxia (6SH) group, respectively. When the model was established, the cellular morphology was observed under inverted microscope. The mRNA expression of hypoxia-inducible factor (HIF)-1α was detected by real-time PCR. The protein expression of HIF-1α was analyzed by immunohistochemistry. RESULTS: The intermittent hypoxia cycle (5% O₂ 60 min-20% O₂ 30 min for 6 cycles) was established. The damaged A549 cells were observed in 6IH group, 9IH group and 6SH group. Compared with 6IH group, the expression of HIF-1α at mRNA and protein levels was significantly increased in 9IH group (P<0.05). The expression of HIF-1α at mRNA and protein levels in 6IH group and 9IH group was higher than that in 4SH group and 6SH group, respectively (P<0.05). No significant difference among the control group, 6AC group and 9AC group was found. CONCLUSION: The model (5% O₂ 60 min-20% O₂ 30 min for 6 cycles) can simulate the pathological process of obstructive sleep apnea hypopnea syndrome. This model is suitable for studying intermittent hypoxia in adherent cells.