鸡X期胚盘细胞电转染外源基因条件的探索

以EGFP为报告基因体外电穿孔转染鸡X期胚盘细胞,探讨适宜电转染条件以及影响鸡ES细胞存活率和转染率因素。分离鸡X期胚盘细胞进行培养、传代及鉴定,二代细胞设定不同的电压、脉冲时间、质粒浓度、细胞密度及孵育温度等条件转染。电击后10 min,0.4%台盼蓝染色,血细胞计数板计数,计算存活率。48 h后在荧光显微镜下计绿色荧光细胞数和总细胞数,计算转染率。结果表明:电转染鸡ES细胞的最优化电压为280 v,脉冲时间为75μs,质粒浓度为20μg/mL,转染前4℃、转染后25℃(室温)或4℃各静置10 min,细胞密度调整在1×105个/mL×106个/mL,尽量使细胞处于对数生长期。电穿孔法转染鸡ES细胞是简便有效的方法,利用优化条件转染ES细胞,可以满足进一步实验的要求。     

贵州黑山羊母羊血液生化指标测定分析

试验测定了5月龄、8月龄、1岁、2岁、3岁黑山羊(母羊)血液20项生化指标.结果表明:甘油三酯含量随黑山羊年龄的增长呈下降趋势,球蛋白含量为2岁黑山羊最高,极显著(P<0.01)高于 5月和8月龄的含量,显著(P<0.05) 高于1岁的含量.总胆固醇、高密度脂蛋白、总蛋白、白蛋白、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、γ-谷氨酰转肽酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶、α-羟丁酸脱氢酶和钾等12项指标在各年龄段间不具有统计学意义,各年龄段与总平均值相比没有差异性.贵州黑山羊母羊在各年龄段大部分血液生化指标具有相对稳定性,这一结果能为黑山羊选育、疾病诊断、治疗和饲养管理提供参考.结果也表明贵州黑山羊具有较好的抗病及抗应激能力.     

斯氏艾美耳球虫的致病性及病理学研究

用纯种斯氏艾美耳球虫孢子化卵囊人工感染25只断奶幼兔,进行致病性和病理学研究。试验兔分为1个不感染对照组和4个感染组,各感染组每只幼兔分别口服感染2.0×103、1.0×104、5.0×104、2.5×105个孢子化卵囊。与对照组相比,接种2.0×103个和1.0×104个孢子化卵囊的两个感染组的平均病变记分、肝重指数、血清转氨酶活性有显著差异(P<0.05);接种5.0×104个和2.5×105个孢子化卵囊的两个感染组上述指标有极显著差异(P<0.01)。表明斯氏艾美耳球虫对幼兔具有很强的致病性,能导致严重的肝球虫病。     

胆酸负荷对妊娠后期绵羊母体和胎儿血浆IGF—2及其代谢物水平的影响

以绵羊及其胎儿为试验对象，研究了胆酸负荷对妊娠后期母体和胎儿血浆胰岛素样生长因子－2(in-sulin-like growth factor-2,IGF-2）及其代谢物水平的影响。将7只确知妊娠时间的绵羊分为试验组5只和对照组2只，试验前装置颈静脉瘘，在妊娠90h和104d2闪给试验组静脉灌注胆酸盐1．1mg/kg，给对照组静脉灌注等量生理盐水，妊娠120d时手术安装胎儿后肢胫前动脉血管瘘。每天采胎儿和母体的血样，分离血浆，测定血浆IGF－2和主要代谢物水平。同时测定胎儿出生时生长发育指标。结果表明：（1）试验组母羊IGF－2水平低于对照组，相反其胎儿IGF－2水平却高于对照组（P＜0．05）；（2）试验组母羊的总蛋白和乳酸水平分别比对照组35．64％；（3）试验组胎儿出生重比对照组小29．00％，胎龄短7．50d。因此认为，胆酸重复灌注可引起妊娠绵羊早产和胎儿出生重降低，而这可能与IGF－2和主要代谢物水平变化有关。     

不同复合酶制剂对肥育猪生长性能的影响

试验选用72头100日龄,体重在44kg左右的三元杂交(杜×长×大)商品代瘦肉型肥育猪,完全随机分为3个组(A、B、C),每个组24头,设三个重复。A组中,饲料中加入国产复合A酶;B组中,饲料中加入国产复合B酶;C组中,饲料中加入罗酶宝TM。经过30天的饲养试验,结果表明:①B、C两组肥育猪的日增重比A组分别提高0.81%、5.50%,C组比B组日增重提高4.65%;②C组肥育猪料重比比A组提高3.53%,C组料重比比B组提高2.59%,B组料重比比A组提高0.96%;③经济效益,C组比A、B两组分别提高8.59%、5.99%;④试验全期,三个处理组的腹泻率均极低。     

湟源山坡地梯田退耕还林还草效果研究初报

通过对湟源山坡地梯田退耕还林工程连续9年的定点观测调查,结果表明:在顶坡梯田,所栽植的榆树Ulmus pumila有94%死亡,沙棘Hippophae rhamnoides有19.4%死亡;在中坡梯田,榆树、沙棘的死亡率分别为93%、18.2%;在底坡梯田,榆树、沙棘的死亡率分别为92.7%、18.6%;而柠条Caragana korshinskii在3个坡位梯田中都100%的成活,但长势不旺,而以赖草Leymus secalinus为主的草本植物,通过9年的自然侵入生长,其生物量(干物质)达到850 g/m2以上。同时,对各坡位草本产量增长规律进行了分析论述,建立了3个坡位草本产量与生长年限回归方程,中坡：y=78.033+102.473 3x;底坡:y=67.333+102.253 3x;顶坡:y=54.244 4+101.92x;如实评估了坡地梯田退耕还草后的经济效益。     

1株罗曼粉鸡源申氏不动杆菌的分离鉴定及耐药性分析

为了解贵州省某养殖场罗曼粉鸡发病病原的特征及其耐药性,本试验从病死鸡中分离出一株革兰氏阴性菌,命名为GZ2019,并对其进行纯化培养、生化试验、16S rRNA序列分析、药敏试验及动物回归试验。分离菌在普通琼脂培养基上呈圆形凸起、表面光滑、半透明的灰白色小菌落,鲜血营养琼脂培养基上菌落形态与普通琼脂培养基上的一致,但不溶血;革兰氏染色结果镜检显示,分离菌为成双排列的阴性球杆菌,偶见单个存在或链状排列;生化试验结果显示,分离菌枸橼酸盐利用、过氧化氢酶反应为阳性,硝酸还原、氧化酶、葡萄糖发酵等反应为阴性,无运动性;16S rRNA序列分析结果显示,分离株与不动杆菌的核苷酸同源性在72.6%~99.9%之间,与申氏不动杆菌LUH 4760株（GenBank登录号：AJ275041）、SNSK 752株（GenBank登录号：MG584984）、MCDA01株（GenBank登录号：KY385627）及RP1株（GenBank登录号：MG461636）的核苷酸同源性高达99.9%;药敏试验结果显示,分离菌对头孢曲松和痢特灵敏感,对头孢哌酮、头孢呋辛、头孢他啶等5种药物中度敏感,对新霉素、环丙沙星、羧苄西林等17种药物耐药;动物回归试验结果显示,试验组小鼠隔离饲养1周仅死亡1只,死亡率为20%,表明该分离菌致病性较弱。本试验成功分离出1株低致病性申氏不动杆菌GZ2019,可为鸡源申氏不动杆菌病的预防和治疗提供一定的参考依据。     

犬甲状腺机能减退并发糖尿病的中西医结合诊疗

犬甲状腺机能减退是由于甲状腺功能异常而引起甲状腺激素分泌不足或合成减少导致犬的内分泌紊乱的一类综合性疾病。长期的甲状腺激素分泌不足,可能继发糖尿病的发生。通过对1例患犬临床症状表现为全身被毛稀疏,多饮多尿多食,双眼白内障等,结合实验室检查(血常规、生化、甲状腺功能检查),总甲状腺(T4)<6.5,参考范围15 nmol/L^50nmol/L,血糖(GLU)20.7 mmol/L,参考范围3.9 mmol/L^8.0 mmol/L,确诊为甲状腺机能减退并发糖尿病。经补充左甲状腺素片治疗甲状腺机能减退,同时用胰岛素控制血糖,再结合中药和针灸辅助治疗病情得到缓解,为临床诊疗该类病提供了参考。     

蓝舌病病毒内蒙古分离株的特性研究

蓝舌病病毒内蒙古株是继云南株、四川株之后,从隐性感染的山羊血液中分离获得的目前在中国唯一一株接近于蓝舌病毒血清17型的毒株.将他与云南毒株和美国17型毒株进行比较,发现其血清学反应群特异性完全相同;中和试验表明与云南毒株之间无交叉保护反应,与美国17型毒株有交叉保护反应,但中和不彻底;电镜下其形态与云南、美国毒株完全一致;核酸电泳分析,具有4组10基因片段,带型为3:3:3:1,第7、8、9片段不融合,与云南、美国毒株基本一致,但1、2、3组中迁移率有差异;人工接种绵羊、山羊、鸡胚,其病理变化和临床反应与云南、美国毒株比较有较大差异.     

马梨形虫病诊断技术研究现状

近年来马梨形虫病流行呈上升趋势,对马属动物产业的发展造成了极大的危害.因此,建立一种实时有效的检测方法就显得尤为重要.病原学诊断法、免疫学诊断法、分子生物学诊断方法的相继建立,为马梨形虫病的早期诊断提供了必要的手段.近年来单克隆抗体技术,DNA重组技术的应用,为该病的诊断提供了新的方法.