猪白细胞介素-2重组蛋白的原核表达及其生物学活性分析

用已构建好的重组表达载体pET30-IL2转化BL-21E.coli,挑取单克隆,利用诱导剂IPTG诱导表达;通过改变诱导剂的浓度、诱导的时间来摸索最佳诱导条件,在最佳诱导条件下大量表达,并利用镍层析柱纯化重组蛋白,用MTS法测定其生物学活性。结果表明,表达产物经SDS-PAGE分析,表达出25ku的融合蛋白,表达产物主要以包涵体的形式存在,最佳的诱导剂浓度为0.1mM,最佳的诱导时间为4h;对表达产物的包涵体处理后,用镍琼脂糖凝胶FF纯化,所得蛋白的纯度约在90%以上。通过透析除去部分尿素,复性后在体外利用MTS法检测其生物学特性,结果表明其仍具有较好的生物学活性,这为进一步大量制备和研究猪IL-2重组蛋白奠定了基础。     

5-烯醇式丙酮酰-莽草酸-3-磷酸合成酶(EPSPS)基因AM79 aroA的活性位点分析

AM79 aro A(WO/2009/059485)基因是从草甘膦高度污染的土壤中克隆的、具有我国自主知识产权的新型草甘膦抗性基因,具有重要应用价值。为进一步解析AM79 EPSPS蛋白的作用机制,本研究对此蛋白的活性位点进行了研究。进化树分析显示AM79 EPSPS属于Ⅰ型EPSPS。序列比对结果表明AM79 EPSPS中第107位的丙氨酸(Ala),第114位的苯丙氨酸(Phe),第355位的Ala和第356位的组氨酸(His)是特异的。采用重叠延伸PCR介导的核苷酸定点突变技术,对这些保守的氨基酸位点进行定点突变。将AM79 aro A及其突变基因转入大肠杆菌(Escherichia coli)aro A缺陷型菌株ER2799中,并进行草甘膦抗性鉴定。结果显示,Phe114、Ala355和His356等氨基酸的突变,使AM79 EPSPS蛋白的草甘膦抗性降低,表明这些氨基酸位点对于维持AM79 EPSPS高抗草甘膦的能力是必需的。同源建模结果表明,这些保守氨基酸位点的突变,使AM79 EPSPS蛋白的结构发生变化,这可能是导致突变蛋白草甘膦抗性能力降低的原因。两个Ⅰ型EPSPS(荧光假单杆菌(Pseudomonas fluorescens)G2EPSPS和拟南芥(Arabidopsis thaliana)EPSPS)对应氨基酸突变后,其草甘膦抗性没有明显变化,表明AM79 EPSPS中几个特异的氨基酸位点的功能在Ⅰ型EPSPS中并不是保守的。本研究结果为解析AM79 EPSPS高抗草甘膦的作用机理及对AM79 EPSPS进行定向进化提供了理论依据。     

CO_2加富对不同砧木嫁接黄瓜农艺性状及净光合速率的影响

为明确北方高寒地区普通日光温室内增施CO_2对温室嫁接黄瓜生长及光合特性的影响,以白籽南瓜和黑籽南瓜嫁接的黄瓜为材料,设CO_2(600±50)μL/L(B1)、(800±50)μL/L(B2)、(1 000±50)μL/L(B3)、(350±50)μL/L(CK)4个浓度。试验结果表明,同一生育期内,随着CO_2浓度增加,白籽南瓜和黑籽南瓜嫁接的黄瓜株高、茎粗、叶面积、叶片叶绿素SPAD值和净光合速率均呈先增加后降低趋势,总体表现为B2处理B3处理B1处理CK,即(800±50)μL/L为最适宜CO_2施用量;CO_2加富可以促进白籽南瓜和黑籽南瓜嫁接黄瓜苗生长,但2种嫁接黄瓜对CO_2敏感性不同,黑籽南瓜嫁接的黄瓜形态指标、叶片叶绿素SPAD值和净光合速率明显优于白籽南瓜嫁接的。     

农村户用沼气服务体系评价建模及应用——基于2010年壳牌中国能源调查河南省偃师市调研项目

作为新能源的沼气具有巨大的应用前景.近年来,在我国农村沼气事业的发展过程中出现了以服务体系不完善为主的诸多问题,如何科学、合理地评价农村沼气服务体系水平,发现原因及时解决,对我国农村能源战略的发展具有重要的现实意义.本文首先根据实地调研情况并使用专家咨询法构建了服务体系评价的指标体系；其次,建立了基于三角白化权函数的灰色评价模型；最后根据调研数据,运用评价模型分析了偃师市农村沼气服务体系的现状.     

离子阱液质联用仪应用于植物叶片游离氨基酸快速分析方法的建立

建立一种液相色谱-离子阱串联质谱(LC-MS-MS)同时分析植物组织中23种游离氨基酸的方法。植物样品经盐酸-乙醇法一步提取后直接进样,无需进行衍生和固相萃取等其他前处理步骤。液相色谱采用Intertsil OSD-4C18(250mm×3.0mm)色谱柱,采用甲醇-甲酸体系进行洗脱,对23种氨基酸获得比较理想的分离效果。结果表明,该方法通用性良好、样品制备简单(一步提取,无需衍生)、灵敏度高、检出范围宽、高效快速,可以在30min内完成整个分析过程。     

栓皮栎软木研究进展

文章从软木的解剖结构、化学组成、主要特性以及复合材料等方面,阐述了国内栓皮栎软木的研究进展。建议今后应加强栓皮栎软木资源培育和基础特性研究,加大技术创新,提高软木行业竞争力,建立符合国情的软木标准体系。     

光质对番茄营养与风味品质的影响

以番茄为试验材料,在田间大棚设施条件下,选用白、蓝、黑、红、绿5种不同颜色的遮阳网,探讨不同光质对番茄营养与风味品质的影响。结果表明,在青熟期,黑色光质促进了总氮、蛋白氮以及非蛋白氮的积累。青熟期到转色期,白色光质的番茄有机酸总量较青熟期增加了4.57倍,蓝色和绿色光质提高了番茄的总糖和还原糖含量。从转色期到成熟期,番茄氨基酸含量大小表现为蓝色>绿色>黑色>红色>白色;黑色光质的番茄有机酸总量较转色期增加了27.8%;红色光质提高了番茄红素含量和Vc含量,降低了硝酸盐含量;白色、红色和绿色光质增加了番茄的总糖和还原糖含量。番茄主要风味物质(>30 μg/kg)为水杨酸甲酯、6-甲基-庚烯-2-酮、柠檬烯、反-2-己烯醛。红光使番茄水杨酸甲酯、6-甲基-庚烯-2-酮和己烯醛含量较白光增加了11.6%、20.2%和17.2%。在大田设施条件下,转色期到成熟期可以采用红色光质提高番茄果实营养品质和风味。     

拮抗链霉菌F1O的药敏性与生理生化特征研究

链霉菌F10对多种油茶病害有较好拮抗效果.为了开发利用菌株F10,研究了不同温度、不同NaC1含量和不同药剂对菌株F10的影响,并对其生化特征进行了研究.结果表明,菌株F10对新万生、扑菌特、速克净、退菌特、百菌清、多菌灵及链霉素较敏感,对可杀得、敌克松、青霉素和利福平不敏感；该菌在10 -40℃能生长,以30℃生长最...     

中国图书馆电子资源联盟采购的实践与思考

[目的/意义]梳理国内图书馆电子资源联盟采购现状,剖析存在问题,提出改进建议。[方法/过程]结合不同类图书馆采购联盟的发展背景、用户需求及客观现实条件,阐述不同类图书馆联盟采购的发展概况,深入分析组织管理架构、采购流程及经费分摊方式等,总结特色亮点,剖析存在的短板或问题。借鉴国内外图书馆联盟采购典型案例和相关研究成果,结合国内图书馆在经费及平台方面的客观实际,分别从6方面提出对策与建议。[结果/结论]建立并完善相关运作机制;优化价格模式、拓展筹资渠道;综合内容、使用和服务等多维数据建立电子资源评价指标体系;深度整合联盟内部资源,构建统一信息交流平台建设;提高法律意识,捍卫长期保存与永久使用权;重视多方合作、灵活组建不同类型联盟、增强竞争实力等,是有效提升图书馆联盟采购效益的良策。