细胞表面糖链类型鉴定及其与副粘病毒结合的特异性

通过糖链检测试剂盒对Vero细胞进行细胞凝集素组织化学染色鉴定,结果显示,Vero细胞与凝集素MAA和SNA呈强阳性反应,而与凝集素GNA和PNA呈阴性反应,表明Vero细胞表面具有唾液酸α2-3连接的半乳糖和唾液酸α2-6连接的半乳糖。Vero细胞神经节苷脂提取及纯化结果显示,GD1a是主要神经节苷脂组分,同时还存在GM1、GM2和GM3。为进一步确定神经节苷脂在病毒入侵中的作用和意义,使用神经节苷脂标准品及Vero细胞神经节苷脂提取物对新城疫病毒和鹅副粘病毒分别进行红细胞吸附抑制试验,结果表明,2种病毒与不同类型神经节苷脂结合特异性上存在差异。     

CHD9:一个新的与流感病毒PA蛋白相互作用的宿主因子

PA蛋白是禽流感病毒(AⅣ)聚合酶的组成部分,对AIV的复制具有重要作用.为鉴定家鸭体内与AIV PA蛋白相互作用的宿主蛋白,本研究利用酵母双杂交系统,以表达A/goose/Hubei/65/05(H5N1)AIV PA蛋白的重组质粒为诱饵,筛选家鸭脑组织cDNA文库,鉴定得到一个cDNA片段,经测序分析表明,该cDNA片段编码蛋白为色素域解旋酶DNA结合蛋白9(CHD9).将重组诱饵质粒pDEST32-PA与捕获的鸭cDNA重组质粒共转化MaV203受体菌,进行X-gal显色反应检测,分析结果显示,菌落可以迅速变蓝,并且菌落在SC-Leu-TrpHis+3AT 3种营养缺陷培养基平板上生长良好.证明CHD9与PA蛋白在酵母双杂交系统中具有较强的相互作用.CHD9的初步鉴定为研究AIV在机体中的复制过程奠定了基础.     

玉米不同加工方式对肉牛育肥性能的影响

本试验旨在探讨玉米加工利用的适宜方法,以提高玉米的利用效率。选用120头利木赞杂交阉牛(590 kg±10 kg),随机分为4组,分别饲喂蒸汽压片(A)、粉碎后过七目筛(B)、十目筛(C)和十四目筛(D)的玉米型日粮,研究日粮玉米不同加工方法对阉牛育肥性能的影响。结果表明,玉米不同加工方式对肉牛的生产性能和大多数胴体指标都没有显著影响(P＞0.05)。蒸汽压片玉米组的胴体产肉率高于十目筛组,骨重低于十目筛组(P<0.05)。十四目筛组的高档肉块比例和上脑重显著高于其它3个处理组,牛柳重显著低于其它处理组,七目筛组西冷重高于十目筛组(P<0.05)。养殖效益则以十目筛组阉牛最高。     

中药“救必应”水提取物对产ESBLs大肠杆菌耐药性的影响

“救必应”为冬青科植物铁冬青的树皮或根皮水浸出物制备,具有广谱的抗菌作用.为研究中药“救必应”对产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠杆菌耐药性的影响,本研究将产ESBLs的E.coli在亚抑菌浓度的中药“救必应”中传代,采用微量稀释法测定抗生素对产ESBLs的E.coli最小抑菌浓度(MIC),并通过透射电镜观察中药作用后细菌形态学变化.结果显示,中药“救必应”可以显著降低产ESBLs的E.coli对阿莫西林、加替沙星、诺氟沙星、盐酸左旋氧氟沙星、乙酰甲喹、磺胺间甲氧嘧啶钠、克林沙星、氟苯尼考的MIC值,并且MIC均降低4倍;此外,中药作用后可以引起细菌细胞壁的皱裂、干瘪、折叠、缩短等形态变化.     

不同酸碱条件下内生真菌对三种禾草种子萌发的影响

内生真菌可以通过提高禾草种子在干旱、盐胁迫等逆境条件下的萌发和促进植株生长而提高宿主的竞争力。本试验在pH为4~11的8个酸碱梯度下,对带菌(E+)与不带菌(E-) Neotyphodium属内生真菌的醉马草、中华羊茅和野大麦的萌发进行了研究,旨在探讨不同酸碱条件下内生真菌对禾草种子萌发的影响。结果表明,弱酸至强碱胁迫(pH为6~11)下,内生真菌显著提高醉马草种子发芽势;酸胁迫(pH为4~5)下,显著提高种子发芽率(P<0.05);中性至强碱胁迫(pH为7~11)下,显著提高种子的胚芽长及胚根长(P<0.05);酸性至中性条件(pH为4~7)下,显著提高幼苗干重;强酸(pH=4)及强碱(pH=11)胁迫下,E+异状发芽率显著低于E- (P<0.05)。弱酸至碱胁迫(pH为6~10)下,内生真菌显著提高中华羊茅种子发芽势(P<0.05);强酸(pH=4)及碱胁迫(pH为8~11)下,显著提高种子发芽率(P<0.05);pH为4~11,显著促进中华羊茅胚芽生长(P<0.05); pH=10时对胚根的增益作用显著(P<0.05);酸胁迫(pH为4~6)下,显著提高幼苗干重;强碱胁迫(pH=11)下,异状发芽率显著增加(P<0.05)。pH为4~11,内生真菌显著提高野大麦种子发芽势(P<0.05);碱胁迫(pH为9~11)下,显著促进种子胚芽生长(P<0.05);碱胁迫(pH为8~11)下,显著提高胚根长(P<0.05);pH为4~11,显著提高野大麦幼苗干重(P<0.05);强酸胁迫(pH=4)下,E+异状发芽率显著低于E- (P<0.05)。相对于胚芽,胚根对酸碱条件变化更敏感。综合考虑,最适萌发pH条件分别为:醉马草pH为6~9;中华羊茅pH为6~7;野大麦pH为7~9。     

脂质体介导抗猪瘟病毒基因转染小鼠胚胎成纤维细胞的研究

本研究旨在探索脂质体介导抗猪瘟病毒基因重组质粒PGPUG/GFP/Neo转染小鼠胚胎成纤维细胞的条件,为构建疾病模型动物及抗猪瘟病毒转基因猪提供技术平台。本研究比较了不同的小鼠胚胎成纤维细胞分离培养方法,将培养至3~5代的胚胎儿成纤维细胞,通过脂质体(LiPofectamine^TM 2000)介导转染抗猪瘟病毒基因重组质粒PGPUG/GFP/Neo。结果显示,在所选用的不同浓度脂质体和重组质粒,以及不同转染时间的组合中,2 μL脂质体介导1.5 μg重组质粒,转染6 h时可获得19%的转染效率,极显著高于其他剂量和时间组合(P＜0.01)。这些结果表明,脂质体、重组质粒及转染时间的优化组合,能有效介导抗猪瘟病毒基因重组质粒PGPUG/GFP/Neo转染小鼠胚胎成纤维细胞。     

葡萄糖酸对肉鸡生产性能及养分表观消化率的影响

选取1日龄罗斯308肉仔鸡540R,随机分为6个处理,每个处理6个重复,每个重复15R.处理Ⅰ为对照组,饲喂基础日粮,处理Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、ⅤV和Ⅵ在基础日粮中分别添加0.08%、0.15%、0.20%、0.30%和0.40%葡萄糖酸(GA).研究葡萄糖酸对肉鸡生产性能及营养物质表观消化率的影响,探讨葡萄糖酸在肉鸡日粮中应用的可行性.结果表明:①与对照组相比,0.15%和0.20%添加组显著提高0～21日龄、22～42日龄鸡的日增重(P<0.05);0.20%添加组降低0～21日龄料重比2.67%(P<0.05),0.15%添加组降低22～42日龄料重比1.72%(P<0.05),0.15%和0.20%添加组分别降低试验0～42日龄料重比1.89%和1.61%,达到显著水平(P<0.05);GA对肉鸡日采食量无显著影响(P>0.05).②21日龄时,0.15%～0.30%添加组显著提高粗蛋白和钙的表观消化率(P<0.05),0.15%和0.20%添加组显著提高磷的表观消化率(P<0.05);42日龄时,0.15%、0.20%和0.40%添加组均显著提高粗蛋白和磷的表观消化率(P<0.05),0.15%～0.30%添加组显著提高钙的表观消化率(P<0.05).     

1株高致病性血凝性脑脊髓炎病毒的分离与鉴定

利用细胞培养方法从临床表现神经症状的死亡仔猪脑组织内分离获得1株病毒,同时对该病毒进行电镜负染观察、昆明种小鼠致病性试验、RT-PCR检测和部分基因测序分析。电镜观察可见细胞培养物中有大量的直径约115 nm的冠状病毒样粒子;接种病毒的小鼠均出现典型的神经症状,死亡率100%;血凝性脑脊髓炎病毒(HEV)特异性引物RT-PCR扩增结果阳性;其S基因序列与GenBank中登录的HEV-67 N相应基因序列的同源性高达99.6%。结果表明,分离的病毒为猪血凝性脑脊髓炎病毒,分离株暂命名为HEV-CC-2007。     

温度与饲粮维生素C水平对后备蛋鸭血清免疫和抗氧化指标的影响

本试验旨在研究温度与饲粮维生素C水平蛋鸭的血清免疫和抗氧化指标的影响.选取12周龄金定鸭216只,温度设低温(2±1)℃和适温(18±1)℃2个水平;饲粮中的维生素C添加水平分别为0、200和800 mg/kg.试验共6个处理,每个处理6个重复,每个重复6只试验鸭.试验期为6周.试验结果表明:1)低温使血清维生素C浓度显著降低了27.78%(P＜0.05),对氧化氢酶(CAT)、总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)、白介素2(IL-2)、免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)、生长激素(GH)、胰岛素(Ins)、胰岛素样生长因子(IGF-I)、瘦素(Lep)、皮质醇(Cort)、三碘甲状腺原氨酸(T3)和甲状腺素(T4)的含量影响显著(P＜0.05);2)饲粮中添加200 mg/kg维生素C时,血清维生素C、IGF-I、Lep水平显著升高(P＜0.05),Cort浓度显著降低(P＜0.05);3)温度和维生素C的交互作用对Cort的含量的影响极显著(P＜0.01),对IGF-I、Lep、IgG和IgA的含量影响显著(P＜0.05),对GH、Ins、维生素C、L3、T4及各个抗氧化指标的影响没达到显著水平(P＞0.05).结果提示,低温影响后备蛋鸭血清维生素C的浓度,但饲粮中添加200 mg/kg维生素C时,可提高在低温条件下的后备蛋鸭血液维生素C的水平、提高血液中Lep和IGF-I的浓度、增强机体抗氧化和抗寒冷应激能力.     

马动脉炎病毒N蛋白基因GST融合表达载体的构建及表达

采用RT-PCR方法扩增出马动脉炎病毒核衣壳蛋白基因0RF7,并将其克隆到pMDl8-T载体,构建成重组质粒pMDl8-N,在上海生物工程公司测序。结果表明,所克隆的核衣壳蛋白基因序列与EAVNC-002532株的同源性为99％。表明0RF7是EAV基因组内的保守序列,将0RF7亚克隆到原核表达载体pGEX-6P-1中,构建成重组质粒pGEX-6P-N,用pGEX-6P-N转化表达菌株BL21（DE3）,诱导表达后SDS-PAGE和Westernblotting分析表明,克隆在谷胱苷肽硫转移酶（GST）下游的核衣壳蛋白基因与GST获得了高效融合表达,表达的融合蛋白GST-N分子质量约为40ku,为马动脉炎病毒病血清学诊断方法的建立奠定了基础。