我国PRRS诊断技术与疫苗研究进展

猪繁殖与呼吸综合征是目前危害世界养猪业最严重传染病之一,并在我国广泛流行,已经造成严重经济损失。近10年来,我国对该病诊断和疫苗进行了大量研究,并取得了重要进展。本文系统概述了我国研究的该病ELISA、RT-PCR、免疫过氧化物酶单层细胞试验、低密度基因芯片、彩色免疫金银染色法和乳胶凝集试验等诊断技术的基本特性,综述了该病灭活疫苗、活疫苗、活载体疫苗和基因疫苗研究的主要进展,并提出我国必须继续加快该病研究,寻求快速、准确、特异的诊断方法和安全高效的疫苗。     

陶赛特羊和小尾寒羊在青海湟源地区的生态适应性分析

为评定引入青海省湟源县良种肉羊繁育基地的陶赛特羊和小尾寒羊两个绵羊品种的生态适应性,对其18个生理生化指标进行了系统测定分析,结果表明：①引入的陶赛特羊和小尾寒羊两个绵羊品种大多数生理生化指标在品种内或不同品种间的不同性别、不同年龄个体间以及同性别、同年龄个体间差异不显著（P〉0.05）。②两绵羊品种所测血浆CO2结合力远超出本地藏绵羊水平;体温（T）、呼吸频率（R）、脉搏（P）和瘤胃蠕动频率以及白细胞数（WBC）、红细胞数（RBC）、血红蛋白含量（HGB）的测定结果均大致在本地藏绵羊的各生理指标测定范围之内。③与已引入青海牧区的小尾寒羊大多数生理生化指标相比,本次引进的小尾寒羊在经过一段时间的适应性饲养后,其大多数生理生化指标已与其基本接近或一致;同时,引入的陶赛特羊和小尾寒羊与原产地相应品种在基础生理指标上相比较接近。     

禽传染性支气管炎DNA疫苗在鸡体内的分布和安全性

采用本实验室构建的3种禽传染性支气管炎病毒基因的真核表达质粒pIBVS1、pIBVM、pIBVN,按各50 mg/L配制成质量浓度为150 mg/L的DNA疫苗,经腿部肌肉分点注射免疫1周龄SPF雏鸡。分别在免疫后24 h,73、0及60d,采集试验鸡的血液、心、肝、脾、肺、肾、胸腺、性腺（卵巢/睾丸）及注射部位肌肉进行组织总DNA抽提,以组织总DNA为模板进行PCR扩增。另外,在对照组DNA模板中加入不同拷贝数的质粒,确定PCR反应的灵敏性。以纯化后的组织总DNA为模板,PCR法检测质粒DNA整合到鸡细胞染色体基因组上的可能性,评价疫苗的安全性。结果表明,该疫苗在24 h内迅速分布于全身,并能在血液及所有检测的组织器官内持续分布60 d;纯化后的组织基因组DNA经PCR扩增均呈阴性,未发现整合现象,证实该DNA疫苗的安全性好。     

磷酸二酯酶在猪卵巢的表达与相关中药对其活性的影响

为了测定猪卵巢组织磷酸二酯酶（PDE）同工酶基因表达类型与活性规律，研究相关中药的作用机理，为繁殖障碍性疾病治疗积累资料。作者提取中国实验用小型猪卵巢组织总RNA，应用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）测定PDE同工酶在其中的表达。选取催情散等复方及单味药，运用高效液相色谱法（HPLC）根据作用前后cAMP/cGMP含量的变化，分析对PDE活性的影响。结果检测的18个PDE亚型中除PDE4C外，PDE 1A、1B、1C、2A、3A、3B、4A、4B、4D、5A、7A、7B、8A、8B、9A、10A、11A mRNA在卵巢组织中均有表达。卵巢组织PDE活性较强，其中cGMP-PDE活性大于cAMP-PDE活性。催情散对卵巢组织cGMP-PDE活性均有较强的抑制作用，其中单味药淫阳藿作用最强。研究结果表明卵巢组织含有丰富的PDE同工酶，在通过环核苷酸水平卵巢机能调节中发挥着重要作用，中药催情散的作用与显著抑制cGMP-PDE活性有关。     

Effects of cinnamyl aldehyde on c-Fos and c-Myc expression in NIH3T3 cells

AIM: Cinnamyl aldehyde (CA) is one alcohol ingredient derived from Cinnamomum cassia,which is widely used in treating chronic skin wound in Chinese medicine with the curative effect of ‘rescuing YANG’.The purpose of the present study was to investigate the expression of c-Fos,c-Myc proteins at different time points in NIH3T3 treated with CA and explore the possible mechanism of promoting cell proliferation by CA.METHODS: MTT assay was used for observing cell proliferation.Expression of c-Fos and c-Myc proteins in NIH3T3 cells were assessed by immunocytochemistry assay.RESULTS: The cell proliferation was promoted obviously when CA concentration was between 8.8×10^-2 μg/L and 8.8×10 μg/L.CA at concentration of 5.5 μg/L significantly induced expression of c-Fos,c-Myc proteins at 2-3 h after the stimulation compared with control group (P<0.01).CONCLUSION: CA increases expression of c-Fos and c-Myc proteins,which may be one of mechanisms for CA to promote NIH3T3 cell proliferation.     

不同果袋类型对紫花杧的套袋效果

以主栽品种紫花杧为试材,探讨不同果袋类型的套袋效果.结果表明:套袋可大幅度降低采收果的果面流胶和雨水污染,极显著地降低果面虫伤率.套袋可改变采收时的果面颜色,但不同果袋类型间存在差异.后熟完成时,果面均为品种固有颜色,不因果袋种类而改变.套袋能促进果实后熟转黄和果色均匀,能显著降低炭疽病的病果率,但不同果袋对蒂腐病的防效存在较大差异.套袋能提高可溶性固形物含量和减轻果实失重.供试品种用外黄内黑复合纸袋套袋效果最为理想.     

Etoposide induces apoptosis via mitochondrial signaling pathway with cytochrome c release in Jurkat leukemia cells

AIM:To investigate the molecular mechanisms of apoptosis and to elucidate the apoptosis signaling pathway triggered by etoposide in Jurkat human leukemia cells. METHODS:Apoptosis was detected using annexin V-FITC and propidium iodide (PI) staining, respectively, and annexin V-FITC positive cells and hypodiploid cells were analyzed by flow cytometry. Mitochondrial membrane potential (△Ψm) was detected using 3, 3-dihexyloxycarbocyanine iodide ［DiOC6(3)］ staining and △Ψm low cells were analyzed by flow cytometry. Preparation of cytosolic extracts and isolation of mitochondria were completed by centrifugation. Western blotting analysis was used to evaluate the level of cytochrome c, caspase-3, and poly (ADP-ribose) polymerase (PARP) expression. RESULTS:Etoposide induced apoptosis showing phosphatidylserine externalization and DNA fragmentation in a time-dependent manner and the apoptosis could be inhibited by a broad caspase inhibitor benzyloxycarbonyl-Val-Ala-Asp-fluoromethylketone (zVAD.fmk). Collapse of △Ψm induced by etoposide preceded DNA fragmentation and phosphatidylserine externalization. In contrast, it was not blocked by zVAD.fmk. Etoposide caused cytochrome c release from mitochondria into cytosol, subsequent activation of caspase-3 (32 kD) presented with an intermediate (20 kD) and its active product (17 kD), and cleavage of full-length PARP (116 kD) into the so-called apoptotic 85 kD fragment. CONCLUSION:Etoposide-induced Jurkat cell apoptosis is initiated through mitochondria signaling pathway with cytochrome c release into cytoplasm and caspase is the ultimate executioner of cell apoptosis.     

中华真地鳖抗菌物质的抑菌活性测定

以研磨法从中华真地鳖五龄若虫体内提取得到抗菌物质,分别采用比浊法和菌碟法测定了其对多种细菌和植物病原真菌的抑菌活性。结果表明,该抗菌物质对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白菜软腐菌和枯草芽孢杆菌等4种细菌生长均有一定的抑制作用,对数期延迟1~4h,菌的浓度、繁殖速度减缓。对7种植物病原真菌的抑菌试验表明,该抗菌物质对玉米茎基腐病菌、小麦根腐病菌、棉花枯萎病菌抑制效果较好,抑制率分别为50.0%、49.2%、45.2%;而对白菜黑斑病菌和玉米大斑病菌活性较差,抑制率仅为28.3%和24.5%。     

抗香蕉枯萎病菌拮抗菌的鉴定及其定殖

通过逐步提高药物浓度方法,获得了抗利福平400μg/ml、对香蕉枯萎病菌拮抗活性稳定的T2WF和W10标记菌株。初步确定两菌株为芽孢杆菌属细菌。采用灌根接种法,在香蕉苗根际土和香蕉苗体内定殖结果表明,拮抗菌液接种浓度为5×104cfu/ml,两菌株均可从香蕉根际土和香蕉体内分离到,并在香蕉体内定殖和传导。在香蕉根际土、根部、球茎和假茎中,T2WF标记菌的菌量高峰分别出现在接种后5、5、11和3d,分别为707、437、273、117cfu/mg;而W10标记菌的菌量高峰分别出现在接种后5、3、5和5d,分别为784、260、253、110cfu/mg。两菌株在香蕉根际土和香蕉体内1~15d的消长动态均有一个共同的“由升到降”趋势。从数量和数量变动幅度上看,香蕉根部的菌量明显高于茎部的菌量。     

使用Reveal试剂盒快速检测单增李斯特氏菌的研究

单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogens,LM,简称为单增李斯特氏菌)是食品卫生上重要的病原菌。它广泛存在于自然界,可导致人和动物脑膜炎、流产、败血症等,病死率高达30%-70%,是目前人类最重要的食物源性病原菌之一。由于该菌生长温度范围较广,在