贝类奥尔森派琴虫可视化LAMP检测技术的建立与应用

根据环介导等温扩增(LAMP)技术原理,针对奥尔森派琴虫(Perkinsus olseni)的5.8 S核糖体RNA与内转录2间隔区序列,设计了6条特异性LAMP扩增引物,分别为两条外引物F3和B3、两条内引物FIP和BIP、两条环引物LF和LB。通过对反应条件的优化,建立了一种适用于贝类奥尔森派琴虫的可视化LAMP检测技术。该技术只对奥尔森派琴虫发生扩增反应,产生黄绿色荧光扩增产物,对其他对照DNA样品无扩增反应,不产生黄绿色荧光。对F3和B3外引物扩增产物进行测序分析,其序列与Gen-Bank中奥尔森派琴虫序列一致,检测结果具有高度特异性。对奥尔森派琴虫质粒DNA的最低检测量为100 fg。用该项LAMP技术与OIE公布的派琴虫PCR检测技术分别对50份分别来自华东及华南沿海地区的牡蛎样品进行检测,同时对PCR阳性样品进行测序分析。结果 LAMP检测到2份奥尔森派琴虫,PCR方法检测到9份派琴虫。测序分析结果表明,PCR方法检测到的9份派琴虫阳性样品中有2份为奥尔森派琴虫,其结果与LAMP检测结果相符,说明该技术适用于贝类样品奥尔森派琴虫的检测。     

重组禽呼肠孤病毒S1133 σ3基因表达及其免疫原性研究

[目的]构建禽呼肠孤病毒(ARV)S1133 σ3基因的真核重组质粒,研究其表达蛋白的免疫原性,为研发ARV基因疫苗奠定基础.[方法]采用RT-PCR对ARV S1133毒株的σ3基因进行RT-PCR扩增,扩增产物与真核表达载体pcDNA3.1(+)连接后,转化大肠杆菌DH5α,然后提取重组质粒的DNA,经双酶切、PCR扩增鉴定和纯化.以阳性重组质粒pcDNA3.1-σ3免疫7日龄SPF雏鸡,同时设灭活S1133、表达σ3蛋白及生理盐水对照,二次加强免疫两周后,采用Western blotting检测鸡群血清抗体;并用S1133毒株进行攻毒,4 d后进行ARV检测.[结果]重组质粒pcDNA3.1-σ3的双酶切和RT-PCR扩增鉴定结果一致,均能扩增出约999 bp目的条带;免疫攻毒试验结果表明,pcDNA3.1-σ3处理、灭活S1133处理、表达σ3蛋白处理和生理盐水处理的病毒检出率分别为7.4%、3.7%、11.1%和29.6%,pcDNA-σ3处理与生理盐水处理的差异显著(P<0.05),但与灭活S1133处理、表达σ3蛋白处理的差异不显著(P>0.05);病毒检出部位最高是关节,其次是胸腺和肾脏,胸腺检出率为零.[结论]真核表达ARV S1133 σ3蛋白具有较好的免疫保护,可作为免疫抗原进行下一步的疫苗中和试验.     

热处理对冬枣冷藏期间品质的影响

以冬枣为试材,研究了不同温度(45,50,55℃)热处理对冬枣冷藏期间品质的影响。结果表明,热处理保持了冬枣的硬度和Vc含量,抑制了果实腐烂率的增加,增大了果实的失质量率,对果实的呼吸强度和可溶性固形物含量影响不大。     

城市湿地公园植物群落构建分析

本文以上海滨江森林公园为例,以城市湿地公园为研究对象,以生物多样性的营建为目标,结合国内外湿地公园设计进展,对城市湿地公园景观设计与生态意义的结合做了一次尝试性的分析,对滨江森林公园生物多样性景观建设中的成败之处进行了探讨.     

内蒙古呼伦贝尔东部地区春季鸿雁巢址选择研究

[目的]研究内蒙古呼伦贝尔东部地区鸿雁的巢址选择。[方法]通过野外调查获取巢址样方和非巢样点的数据,通过主成分分析确认鸿雁巢址选择的主要影响因子。[结果]数据的Z检验表明,只有巢周芦苇密度呈正态分布,距明水面距离、明水面面积、巢周芦苇面积、巢周芦苇高度、巢周芦苇密度、距人为干扰距离有显著差异。主成分分析表明,前4个主成分的特征值都大于1,并且其累计贡献率达到64.700%。第1主成分中岛的大小、巢周芦苇面积、巢周芦苇密度的贡献率达22.184%;第2主成分中巢周芦苇高度、距明水面距离的贡献率为16.546%;第3主成分中距人为干扰距离、巢下水深的贡献率为14.076%;第4主成分中距人为干扰距离、巢周芦苇盖度的贡献率是11.868%。在4个主成分中反映鸿雁繁殖期隐蔽与逃逸的因子占主要地位。[结论]该研究为鸿雁繁殖生境的保护提供了理论依据。     

15种地被植物在太原地区的引种、栽培、观察及应用

对玉簪、鸢尾等15种地被植物进行了2～3年的适应性栽培、观察,认为它们在太原地区具有较好的适应性,观赏价值高且能够安全越冬,值得推广。     

嗜水气单胞菌、爱德华氏菌灭活菌苗免疫保护及药物治疗试验

嗜水气单胞菌、爱德华氏菌培养物经甲醛灭活后,制成灭活油乳剂苗、灭活菌苗、饵料吸附型疫苗,免疫罗非鱼2周后,分别以嗜水气单胞菌、爱德华氏菌活菌液攻毒,结果显示,注射型疫苗均优于口服型,其中嗜水气单胞菌以腹腔注射0．1mL嗜水气单胞菌灭活菌苗＋0．3mL生理盐水的效果最佳,免疫保护率为85．0％;而爱德华氏菌以腹腔注射0．4mL灭活油乳剂苗效果最佳,免疫保护率为90．0％。两者的药物治疗试验结果显示,以氟苯尼考、恩诺沙星、环丙沙星、氟哌酸治疗罗非鱼嗜水气单胞菌病、爱德华氏菌病均有一定效果,对减少发病率及死亡率、控制病情具有较好作用,其中以氟苯尼考的疗效最佳,其用量为20mg／kgH2O。     

激素和外植体类型对新疆雪莲愈伤组织诱导的影响

以新疆雪莲叶片、叶柄和根为试验材料,研究了MS基本培养基附加不同质量浓度的植物激素对新疆雪莲愈伤组织诱导的影响。结果表明:单因素诱导中,NAA的诱导效果显著优于其它激素;以NAA为诱导激素,叶片与根,叶柄与根之间的诱导率存在极显著性差异,诱导效果:根>叶柄>叶片,最高诱导率分别为100%、98%、44%;NAA与6-BA激素组合对3种外植体愈伤组织的诱导中,叶片与叶柄诱导率之间存在极显著性差异,叶片、叶柄与根的诱导率之间存在显著性差异,诱导效果:叶片>叶柄>根,最高诱导率分别为98%、64%、23%。     

网络教学与课堂理论教学相结合——无土栽培学课程教学模式的试验研究

网络辅助教学是普通多媒体教学的重要补充,利用Bb网络教学平台,在构建＂无土栽培学＂网络课程的基础上,在不同班级开展了网络辅助教学试验,通过对网络辅助教学与普通多媒体教学效果的比较,表明＂无土栽培学＂课程采用网络教学与多媒体教学相结合的方法具有较强的优势。     

广西无公害养殖产品产地环境监测与评价

依据无公害食品产地环境评价准则(NY/T 5295-2004),采用单因子评价方法,对2007-2009年申请的广西无公害养殖产品产地认定的589个环境水质样品进行了分析与评价.结果表明:广西无公害养殖产品产地水质总体上较好,符合无公害产地认定的标准要求,但仍有少数不符合要求;水产养殖用水水质的污染物主要为石油类,畜禽饮用水水质的污染物主要为硝酸盐.