新农村建设中软质景观的空间形态与构建研究——以东阳花园村为例

基于浙江东阳各乡村的发展情况,通过实地调查12个村落,分析所存在的问题,以花园村为例,探讨浙江乡村软质景观园林应如何创造出具有自身特色的现代乡村景观.     

P2X2阳性感觉神经末梢在小鼠食管的分布

本文采用免疫荧光组织化学双标方法结合激光共聚焦显微镜技术研究了伤害性受体P2X2阳性感觉纤维末梢在小鼠食管内的分布及与降钙素基因相关肽（CGRP）阳性纤维的关系。结果表明：在食管各水平均可见到P2X2阳性感觉纤维末梢。P2X2阳性纤维集中分布于食管的内、外肌层之间，部分或全部的覆盖在肌间神经节的表面。一些串珠样的纤维深入到肌间神经节内，相互缠绕在一起形成许多结构复杂、形状各异的神经节内板状末稍（IGLEs）。荧光双标显示许多CGRP阳性纤维围绕在P2X2阳性IGLEs周围，没有见到P2X2和CGRP在同一纤维的共存。结状神经节内可见许多中小型神经元表达P2X2，P2X2/CGRP双标神经元稀少，而背根神经节内可见较多的P2X2阳性细胞含有CGRP。由此可见，小鼠食管内部分感觉神经末梢表达伤害性受体P2X2，并形成IGLEs样末梢结构。     

大豆基因组中TOC1同源基因的生物信息学分析

利用Phytome、TAIR、NCBI网站及其数据库和MEGA 4.0、Clustal X软件,对大豆(Gly-cine max)基因组中TOC1同源基因进行了生物信息学分析,确定了GmTOC1基因及其在染色体上的物理分布、内含子-外显子结构,进行了氨基酸序列比对,并研究了其系统发育学地位。结果表明,GmTOC1与AtTOC1亲缘关系较近,都具有保守的调节区域,而且可能具有相似的生物钟调控功能。此外发现,大豆基因组中含有4个拷贝的TOC1同源基因,它们在生物进化过程中保留了与拟南芥同源的结构和功能。     

奶山羊IL-6与TGF-β1融合蛋白的制备及其活性检测

【目的】制备具有免疫活性的奶山羊白细胞介素6（Interleukin-6,IL-6）与转移生长因子-β1(Transfer growth factor-β1,TGF-β1)融合蛋白。【方法】采集奶山羊外周血，分离外周血单个核细胞（Peripheral blood mononuclear cell，PBMCs），将PBMCs用刀豆蛋白A（ConA）刺激后提取其总RNA，RT-PCR扩增IL-6与TGF-β1基因，构建其克隆载体及原核表达载体pET-32a TGF-β1和pET-32a-IL-6，然后进行PCR和测序鉴定。将原核表达载体pET-32a-TGF-β1和pET-32a-IL-6转化至大肠杆菌 BL21(DE3) 中，用 IPTG诱导表达，以镍柱纯化试剂盒纯化IL-6与TGF-β1重组蛋白，对表达产物和纯化后的蛋白进行SDS-PAGE。用纯化的IL-6、TGF-β1蛋白刺激PBMCs，以甘油醛-3-磷酸脱氢酶GAPDH基因为内参，采用qRT-PCR法检测PBMCs -IL-17 mRNA的表达量。【结果】RT-PCR扩增获得了627 bp的IL-6基因片段和1 137 bp的TGF-β1基因片段，成功构建了IL-6和TGF-β1基因的克隆载体及pET-32a-TGF-β1和pET-32a-IL-6原核表达载体，并在大肠杆菌BL21(DE3)中得到成功表达；获得了纯化的奶山羊IL-6与TGF-β1融合蛋白，该融合蛋白联合刺激能使PBMCs的IL-17 mRNA表达水平显著升高。【结论】获得了具有免疫活性的奶山羊IL-6与TGF-β1重组蛋白。     

陆地棉离层基因GhBOP1的克隆及其功能的初步分析

为防止棉铃脱落提高结铃性,进而提高棉花产量,从陆地棉中分离出一个参与离层分化调控的相关基因GhBOP1。通过生物信息学分析,表明GhBOP1蛋白序列含有保守性强的BTB和ANK结构域;进化树分析显示该蛋白氨基酸序列与许多植物的同源蛋白相似程度很高,说明该类蛋白进化较慢。利用qRT-PCR进行组织特异性表达分析的结果表明,GhBOP1基因在根、茎、叶和花等组织器官中均有少量表达,但在离层中为优势表达,表达量为叶片表达水平的20倍。利用病毒诱导基因沉默(VIGS)技术干涉棉花GhBOP1基因的表达,同时进行低盐胁迫处理分析,对照植株叶片出现大量地脱落,而GhBOP1基因沉默植株叶片生长正常。总之GhBOP1基因在离层中优势表达,并对离层的形成可能具有调控功能。     

高繁殖力黄淮山羊大卵泡颗粒细胞上调表达基因的研究

旨在对山羊卵巢有腔卵泡发育中基因表达特点进行研究。本研究应用抑制消减杂交技术(SSH)对黄淮山羊卵泡期卵巢非闭锁大卵泡(6 mm)和小卵泡(4 mm)颗粒细胞内差异表达基因进行了研究,建立了消减cDNA文库,通过斑点杂交分析,从正向文库中随机挑取96个克隆进行差异表达的筛选,结果发现,其中有8个与已知功能基因高度相似,12个全新的表达序列标签(EST)。结果显示,这些基因可能影响着山羊卵泡的发育成熟和排卵。     

Effects of dietary graded levels of cinnamon essential oil and its combination with bamboo leaf flavonoid on immune function,antioxidative ability and intestinal microbiota of broilers

Cinnamon essential oil(CEO) and its combination with bamboo leaf flavonoid(BLF) have been shown to exhibit an additive antibacterial effect in vitro, but their functions in broilers were not clear. An experiment was conducted to investigate the effects of dietary graded levels of CEO and its combination with BLF on the growth performance, immune responses, antioxidative ability, and intestinal morphology and microbiota of broilers fed a corn-soybean meal basal diet. A total of 576 1-d-old Arbor Acres commercial male broilers were randomly allotted to 9 treatments with 8 replicates of 8 birds each in a completely randomized design. Birds were fed on a basal corn-soybean meal diet(control, without plant extracts and antibiotics), or the basal diet supplemented with 50 mg of aureomycin kg~(-1), 50, 100, 200, 400, or 800 mg of CEO kg~(-1), a combination of 100 mg of CEO and 16.7 mg of BLF kg~(-1), or a combination of 200 mg of CEO kg~(-1) and 33.3 mg of BLF kg~(-1) for 42 d. Dietary treatment affected(P0.05) the serum immune globulin M(IgM) contents on d 42, liver malondialdehyde(MDA) contents on d 21, duodenal crypt depth on d 42, relative abundance of Lactobacillus in the cecal contents on d 21, and relative abundances of Escherichia coli and Bifidobacterium in the cecal contents on d 42, but had no effect(P0.16) on all other measured indices. The addition of 400 mg of CEO kg~(-1) or a combination of 200 mg CEO kg~(-1) and 33.3 mg BLF kg~(-1) increased(P0.02) serum IgM contents on d 42. Dietary supplementation with 100 or 200 mg CEO kg~(-1), or 50 mg aureomycin kg~(-1) decreased(P0.003) liver MDA contents on d 21. In addition, the supplement of 100 mg CEO kg~(-1) increased(P0.002) the Lactobacillus relative abundance in caecum on d 21 and Bifidobacterium relative abundance in caecum on d 42, and decreased(P0.0001) E. coli relative abundance in caecum on d 42. The results indicated that dietary supplementation with CEO, an alternative to aureomycin, improved the immune status, antioxidantative ability and cecal microbiota of broilers, and dietary supplementation with the combinations of CEO and BLF did not exhibit further effects. Dietary supplementation with 100 mg CEO kg~(-1) is beneficial for broilers fed a corn-soybean meal basal diet.     

芸薹根肿菌SSR标记的开发及遗传多样性研究

芸薹根肿菌（Plasmodiophora brassicae）专性寄生于十字花科作物根部引起根肿病，且变异迅速。本研究利用Williams鉴别寄主系统鉴定出32株根肿菌，根据根肿菌基因组序列分析了根肿菌基因组中的简单重复序列（Simple sequence repeats，SSR）的分布特性，并结合SSR标记的开发研究了根肿菌遗传多样性。主要结果如下：从收集自8个省市31个地区的32株根肿菌中，鉴定出2、4、7和11号生理小种；根肿菌基因组存在3 164个SSR，即每7.6 kb存在1个SSR。核苷酸重复类型以2和3为主，分布频率分别为45.92％和53.04％。从62对SSR引物中，筛选出31个多态性标记，多态率50％，平均PIC值为0.407；聚类分析表明，同一地区的根肿菌大多聚类到一起，但同时存在变异。     

长期施肥下我国水稻土基础地力变化趋势

【目的】水田具有较好的水热稳定性,且基础地力对水稻产量的贡献大,所以水稻土基础地力高低是保证水稻高产稳产的重要指标。研究长期不同施肥下我国不同区域水稻土基础地力的变化态势及其特征不仅为水稻土的农业可持续生产提供理论依据,还为评价和建立长期合理的施肥模式提供数据支持。【方法】以不施肥处理(CK)的水稻产量表征其基础地力,以不施肥产量与常规施肥(施氮、磷、钾肥,NPK)产量的比值作为基础地力贡献率,分析了我国7个水稻连作或稻麦轮作农田生态系统下长期施肥稻田的基础地力和基础地力贡献率随时间的变化趋势和特征,比较了不同地点及不同轮作方式的差异探讨了基础地力贡献率与水稻产量及其相关指标的关系。【结果】长期不施肥水稻产量随时间的变化总体上较稳定,平均变化速率仅为-0.3 kg/(hm~2·a)。不同水稻土类型间差异大红壤水稻土基础地力易呈下降趋势而紫色水稻土较稳定。不同轮作方式上,晚稻和单季稻的不施肥产量随时间呈上升趋势,分别增加1.6和29.2 kg/(hm~2·a),而早稻不施肥产量呈逐年下降趋势,平均下降20.0kg/(hm~2·a)。同一区域的试验点,白沙(BS)和望城(WangC)不施肥的水稻产量逐年下降速率最大,下降值达47~82kg/(hm~2·a);而南昌(NC)的早晚稻、武昌(WuC)和遂宁(SN)的单季稻均呈逐年上升的趋势,上升速率达44~81 kg/(hm~2·a)。水稻多年(20年)平均基础地力贡献率较高(各地变化幅度42%~68%,平均值为59.7%)其中早稻、晚稻和单季稻分别为55.1%、67.1%和54.9%。基础地力贡献率与不施肥的产量可持续性指数(SYI)间呈显著的正相关关系(r=0.655,n=13)。7个试验点的多年施肥处理水稻平均产量为5100 kg/hm~2,显著高于不施肥产量(2911 kg/hm~2),多年施肥措施对水稻产量的贡献率为40.3%。【结论】长期不施肥晚稻和单季稻产量稳定或有上升趋势而早稻产量不稳定,部分呈显著下降趋势,其变幅大小与水稻土类型有关,其中红壤水稻土的早稻产量易呈下降趋势而紫色水稻土的最稳定;施肥条件下各试验点水稻产量随时间变化较稳定。从长期角度而言,提高南方水稻土基础地力是提升其产量可持续性的有效途径之一。     

河流型水牛种公牛染色体罗伯逊易位筛查

为了筛查河流型水牛种公牛染色体罗伯逊易位,试验采用常规微量全血培养和空气干燥制片法对摩拉水牛、尼里/拉菲水牛、地中海水牛及其杂交后代共49头河流型水牛种公牛进行染色体的遗传检测和分析。结果表明:河流型水牛种公牛染色体数目均为2n=48+XY,包含5对双臂(中部、亚中部或亚端部)常染色体、19对端部着丝粒常染色体和1对性染色体,未发现染色体罗伯逊易位现象。