采用PCR-SSCP技术分析蚯蚓粪便的微生物群落结构

通过SDS/蛋白酶的方法抽提蚯蚓粪便微生物总DNA,以总DNA为模板,采用通用引物分别成功扩增细菌16S rRNA基因的V4-V5可变区,真菌18S rRNA基因的V8-V9可变区,应用单链构象多态性技术（SSCP）分析了蚯蚓粪便中不同空间层次的微生物种群的多样性。结果表明,在粪便的不同空间层次上呈现出明显的空间分布多样性,并且与纯蚯蚓粪微生物种群的多样性有很大的差别。为进一步的蚯蚓粪生态学功能研究提供了有益的指导。     

用聚合酶链反应检测鸭瘟病毒的研究

根据已发表的鸭瘟病毒基因序列 ,设计并合成了一对引物 ,其扩增跨幅为 60 2 bp。用这对引物对 6株鸭瘟病毒 DNA进行扩增 ,均获得了与设计大小相符的明亮条带 ,为阳性 ,而对其它 6株禽病病原体基因扩增不出任何条带 ,为阴性。敏感试验表明可检测到 1 0 0 fg的鸭瘟病毒 DNA模板     

物权法定主义之思考

物权法定主义一直是争论的焦点,否定者有之,提倡者有之。文章就物权法定主义的涵义、代表性发展史,及其合理性与局限性作一剖析,指出物权法定是物权法存在的基础,应该加以遵守;而使物权法朝着有利于经济发展的方向发展,其完善之举为“缓化”。     

琅琊鸡胚MSX2基因克隆及发育性表达变化

【目的】 克隆鸡Msh同源框2(Msh-homeobox 2,MSX2)基因,并对其进行生物信息学和胚胎期表达模式分析,为进一步研究MSX2基因的结构和功能提供支持。【方法】 对80枚琅琊鸡种蛋进行孵化,分别于孵化期第1、2、3、4、5、6、9、12、15、18天采集样品(1~6胚龄采集整胚,9、12、15、18胚龄分别采集心脏和肝脏),提取总RNA,利用RT-PCR方法扩增并克隆MSX2基因,对其进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR技术分析MSX2基因在琅琊鸡鸡胚和组织中的表达水平。【结果】 成功克隆了琅琊鸡胚MSX2基因,序列长度为818 bp,开放阅读框为780 bp,编码259个氨基酸。琅琊鸡MSX2氨基酸序列与日本鹌鹑、秃鹰和仓鸮的相似性最高,均为99.23%,与山羊的相似性最低,为74.54%;系统进化树分析结果显示,琅琊鸡与日本鹌鹑聚为一类。生物信息学分析表明,MSX2蛋白分子质量为28 235.18 u,等电点(pI)为9.71,没有信号肽和跨膜域,为不稳定的亲水性蛋白,主要分布在细胞核(60.9%);存在37个磷酸化位点、8个O-糖基化位点和1个N-糖基化位点;二级结构主要由无规则卷曲(63.32%)和α-螺旋(28.19%)组成。实时荧光定量PCR分析表明,MSX2基因在整胚(1~6胚龄)中的表达水平呈现先上升后下降趋势,且在4胚龄时表达水平最高,极显著高于1、2、3胚龄(P<0.01);MSX2基因在12胚龄鸡心脏中的表达水平极显著低于9胚龄(P<0.01);在9~18胚龄鸡肝脏中的表达量呈逐渐下降趋势,且在9胚龄鸡肝脏中表达水平最高(P<0.05)。【结论】 试验成功克隆了琅琊鸡MSX2基因序列,其表达模式在不同胚龄和同一胚龄不同组织间存在差异,为进一步探索琅琊鸡MSX2基因的结构和功能奠定了基础。     

中国东北松嫩平原丹顶鹤繁殖种群调查(英文)

自2004年至2008年,在白鹤GEF项目的支持下,全国鸟类环志中心于每年5月在东北松嫩平原的4个国家级自然保护区,即黑龙江的扎龙国家级自然保护区、内蒙古的科尔沁国家级自然保护区、吉林的向海和莫莫格国家级自然保护区,开展了繁殖水鸟的地面调查。调查的目的在于了解各个保护区繁殖水鸟的分布和种群动态。丹顶鹤(Grus japonensis)是本调查活动的重要目标物种。通过5年的调查,了解到松嫩平原的扎龙保护区是目前丹顶鹤最为重要的繁殖地,逾90%的繁殖丹顶鹤种群分布在扎龙保护区,但种群数量变动较大,变动幅度介于112–275只之间。良好的芦苇(Phragmites australis)生境是丹顶鹤的繁殖种群保持稳定和增长的首要条件。通过给湿地供水可以缓解丹顶鹤繁殖栖息地的快速退化,但科学合理的供水机制是保证丹顶鹤繁殖成功的前提。     

隐性乳房炎试验(CMT)及防治方案

[目的]为找出陕西地区奶牛隐型乳房炎的临界点。[方法]采用生产上常用的乳房炎诊断方法,通过间接测定乳中体细胞数来诊断乳房炎的发生。[结果]找出体细胞数在47.46万以上时才依次表现出弱阳性、阳性、强阳性的特征。[结论]从而依据以上结果制定出两种方案用于预防和治疗乳房炎的发生。     

丙氨酰谷氨酰胺二肽对早期断奶仔猪抗氧化能力及肠道保护的研究

本试验旨在研究丙氨酰谷氨酰胺二肽(Ala-Gln)对早期断奶仔猪抗氧化能力和肠道保护的影响。采用完全随机化设计,选用体质量、胎次、泌乳量、产仔数相近、健康的云南撒坝母猪所产的48头仔猪(1/2♂,1/2♀),35日龄断奶,随机分成4个处理,每个处理3个重复,每个重复4头。A组为对照组,饲喂基础日粮,B、C和D组分别饲喂添加0.15%、0.30%和0.45%Ala-Gln的试验日粮。试验期为35~60日龄。结果表明,添加0.15%、0.30%和0.45%Ala-Gln可提高断奶仔猪生长性能,随饲粮Ala-Gln添加水平提高,日采食量、体质量呈二次曲线上升(P<0.05),料重比呈二次曲线降低(P<0.05)。第49日龄的仔猪血清T-AOC和T-SOD含量以二次曲线方式升高(P<0.05),血清MDA活性呈二次曲线降低(P<0.01)。小肠形态学观察结果显示,仔猪十二指肠和回肠绒毛长度以二次曲线方式升高(P<0.01),空肠绒毛长度以二次曲线方式升高(P<0.05),十二指肠和空肠隐窝深度以二次曲线方式降低(P<0.05),十二指肠、空肠和回肠绒毛长度和隐窝深度比值(V/C)以二次曲线方式提高(P<0.01)。结...     

大熊猫犬冠状病毒部分S基因的克隆与全S基因序列分析

从重庆某动物园死亡的大熊猫肝脏中分离到一株病毒，经鉴定为犬冠状病毒（命名为CCV DXMV）。本实验根据CCV K378和CCV Insavc-1株基因序列设计合成了普通PCR引物SF1-SR1和SF2-SR2，以及半套式引物SF3-SR3、SR13、SF13、SF4-SR4和SF14，分段扩增了CCVDXMV株部分S基因，得到了368bp、792bp、737bp、1178bp和985bp5个基因片段。将纯化的RCR产物分别克隆到pGEM—T载体中，通过筛选和鉴定，获得了5个阳性重组质粒。将重组质粒送生物公司测序，将测得的基因序列与先前测定的该株病毒部分S基因序列，拼接成全S基因序列，并与其它株CCV及TGEV HN2002和FIPV79—1146株的S基因序列进行分析比较，绘制进化树。结果表明，该株病毒与CCV K378株的同源性最高，达到99．4％；而与CCV 23／03株的同源性最低，为56．9％；与FIPV和TGEV分别有90．4％和82．1％的同源性。     

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌和猪圆环病毒2型二重实时荧光定量PCR检测方法的建立

以胸膜肺炎放线杆菌(App)apx ⅣA基因和猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF2基因为靶基因,分别设计特异性引物和探针,建立App和PCV-2的二重荧光PCR方法。App引物扩增的目的片段大小为132bp,PCV-2为169bp。建立的方法可在同一反应体系中同时对App和PCV-2进行定量检测鉴别,其敏感性分别为1×101拷贝和1×100拷贝,对其他猪病病原核酸的检测为阴性。利用该方法对10份人工感染临床样品进行检测试验,其结果符合率达100%,说明该方法可用于对临床样品中App和PCV-2的检测。     

微量元素锌在动物健康及营养中的研究进展

本文从锌对动物免疫、组织细胞结构完整性、生长繁殖能力等方面论述了锌的生理生化功能，并提出了如何在畜牧业生产中应用锌提高动物生产能力。对进一步研究锌在动物体的作用机理，将锌应用于畜牧业生产实际具有一定的参考价值。