草鱼SGLT1/2基因克隆及葡萄糖处理对其mRNA表达的影响

作为重要的转运载体,SGLTs(钠依赖性葡萄糖协同转运蛋白,sodium-glucose co-transporters)在物质的吸收过程中发挥着关键的作用.SGLT1和SGLT2作为SGLTs家族的重要成员,参与调节体内的葡萄糖吸收,从而维持血糖的稳态.为研究SGLT1和SGLT2在草鱼葡萄糖吸收过程中的作用,本实验...     

无乳链球菌GD201008-001二元调控系统RscSR的鉴定及其对细菌应激适应性和毒力特性的影响

为鉴定鱼源无乳链球菌GD201008-001二元调控系统(two-component system, TCS)RscSR并探究其功能,实验利用生物信息学方法预测到可能的RscSR,对其组成成分RscS和RscR的三维结构和保守结构域进行分析;构建基因缺失株ΔrscSR与互补株CΔrscSR,测定细菌的生长曲线,检测其耐酸应激、耐氧化应激、抗巨噬细胞吞噬和胞内存活能力,同时测定其对巨噬细胞的毒性和对小鼠的毒力。结果显示,RscSR具有典型的TCS结构特点,其中RscS具有组氨酸激酶结构域,RscR具有反应调节子结构;其编码基因缺失后,菌株耐酸、耐氧化、抗巨噬细胞吞噬和胞内存活能力及对巨噬细胞毒性均显著降低,而将该基因回补后各项能力均有所恢复;动物实验结果显示,野生株感染小鼠19 h内全部死亡,而ΔrscSR缺失株感染小鼠全部死亡时间为48 h。研究表明,RscSR在无乳链球菌应激适应性以及毒力方面发挥重要作用。     

全子叶生物活性豆腐凝胶特性的研究

通过因子筛选实验,确定了接种量、微生物转谷氨酰胺酶(MTG)用量和水豆比是影响全子叶生物活性豆腐凝胶特性的关键因子。在此基础上,采用响应曲面法(Response SurfaceMethodology,RSM)分别建立了豆腐硬度和持水率的二次多项数学模型,验证了模型的有效性并探讨了上述3个因子的交互作用。从产品成本和凝胶特性综合考虑,选择出最佳配比,即乳酸菌接种量为105cfu/mL,MTG用量为347 U/L,水豆比为8.5,其硬度和持水率实测值分别为44.8g和89.2%,可生产出富含乳酸菌和几乎全部大豆营养的健康豆腐。     

基于CBR的羊病诊断专家系统分析与研究

鉴于基于规则的专家系统在知识获取上存在的瓶颈问题,分析研究了基于案例推理的羊病诊断专家系统关键问题的设计思想和实现方法。同时,针对羊病症状信息的特点,提出了建立症状索引表描述字符型数据、特征权值反映症状对案例的影响;采用特征向量空间的加权检索算法,提出了症状特征相似性计算方法。采用SQL Server数据库管理和Java语言进行系统实现,并通过实例进行了验证,达到了设计要求,对生产实践具有指导价值。     

C-端嵌合PRRSV T细胞抗原表位对PCV2 VLPs稳定性的影响

【目的】利用大肠杆菌原核表达系统表达猪圆环病毒2型Cap蛋白及在其C-端嵌合PRRSV T细胞抗原表位的Cap嵌合蛋白,对Cap蛋白形成的病毒样颗粒(VLPs)的稳定性、免疫原性以及C-端嵌合PRRSV T细胞抗原表位VLPs的热稳定性进行研究,为猪圆环病毒2型(PCV2)VLPs疫苗的高效制备及基于Cap VLPs纳米骨架展示技术嵌合疫苗的开发奠定基础。【方法】采用分子生物学方法合成PCV2b型强毒株ZJ的cap基因,在其C-端插入PRRSV T细胞抗原表位T1、T2、T3、T4、T5,构建cap-T1～cap-T5基因;将cap及cap-T1～cap-T5基因与pET28a表达载体连接,构建重组表达载体,转染大肠杆菌ClearColi^TMBL21(DE3)进行诱导表达,并对表达产物的热稳定性及免疫效果进行检测。【结果】实现了Cap蛋白及其C-端嵌合PRRSV T细胞抗原表位的Cap-T1、Cap-T2、Cap-T3、Cap-T4和Cap-T5嵌合蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达,并成功观察到了VLPs;表达产物热稳定性分析显示,在60℃处理30 min条件下,Ca...     

混合盐碱胁迫下外源茉莉酸甲酯对黑果枸杞种子萌发特性的影响

为明确外源茉莉酸甲酯（MeJA）对混合盐碱胁迫下黑果枸杞种子萌发特性的影响,以黑果枸杞种子为试验材料,采用纸上萌发法,研究了混合盐碱胁迫下施加外源MeJA后黑果枸杞种子萌发进程、发芽率（GP）、发芽势（GR）、发芽指数（GI）、活力指数（VI）、异状发芽率（HGP）、茎长（LS）、根长（LR）及萌发期幼苗生长表型变化。结果显示：（1）中性混合盐（L）和中度碱性混合盐（M）在适当低、中浓度时能在一定程度上加速黑果枸杞种子萌发,重度碱性混合盐（H）则使黑果枸杞的萌发起始时间延后,萌发总时长缩短;MeJA对混合盐碱胁迫下黑果枸杞种子萌发起止时间和发芽延续时间没有明显影响;（2）GP、GR、GI、VI、LS、LR在中性混合盐（L）、中度（M）和重度（H）碱性混合盐处理时均随盐碱浓度升高呈逐渐降低趋势;外源MeJA对混合盐碱胁迫下黑果枸杞种子的萌发存在“低促高抑”现象,适当低、中浓度起促进作用,过高浓度则抑制;（3）生长表型（长势）随盐碱浓度及碱性盐占比升高明显减弱;适当浓度外源MeJA(MJ-10、MJ-20)能在一定程度上缓解盐碱胁迫对幼苗生长的伤害,过高浓度外源MeJA(MJ-40、MJ-...     

落叶松育苗技术在实践中的应用

落叶松育苗技术在实践中应用广泛,苗圃地的选择、种子处理、播前整地、施肥、土壤消毒,对播种期、播种量、播种方式的选择是落叶松育苗的基础,加强对苗木苗期管理是培养优质高产苗的关键。     

新疆呼图壁河径流时间序列分析

基于呼图壁河石门水文站1956—2011年的年径流数据,采用Morlet小波分析和R/S分析方法,对新疆呼图壁河流域径流周期、变化特征和未来趋势进行分析和预测。研究结果表明:(1)通过对呼图壁河1956—2011年径流量的分析发现,径流时间序列存在5 a、10 a、18 a和28 a左右的震荡周期,18 a尺度震荡周期最强,其次是28a尺度。18 a时间尺度上的震荡在56 a研究时段内均较强,且存在4个丰水期和5个枯水期;28 a震荡周期在56 a尺度时段内相对较强,存在3个丰水期和3个枯水期,目前处于偏丰期;(2)利用R/S分析呼图壁河径流量序列,Hurst指数为0.6442,存在明显的赫斯特现象,这就意味着未来一段时间的径流量与过去具有同样的增加趋势。     

武陵山脉七曜山区大型真菌资源调查

报道了武陵山脉七曜山区大型真菌资源126种,其中食、药用菌105种、毒菌7种,隶属于2亚门9目30科61属.调查发现,该地区大型真菌种类分布于阔叶林中有74种, 针阔混交林中有39种,针叶林中有35种,灌木林中有17种.已调查的大型真菌资源中有外生菌根菌69种,木生菌32种.-     

荒漠刺叶墙藓DNA的提取及PCR扩增反应条件

采用改进CTAB法、NaOH法和直接PCR法(direct PCR amplification)提取藓类生物结皮中刺叶墙藓(Tortula desertorumBroth.)基因组DNA,比较其分离效果以及ISSR扩增效果。结果表明:改进CTAB法提取的基因组DNA质量好、纯度高,ISSR扩增反应效果好。直接PCR法一旦体系建立,则是最简易快速、经济高效的模板制备方法,适于植株矮小、生物量很小的荒漠藓类植物个体模板DNA的制备。利用改进CTAB法获得的基因组DNA作为模板,对ISSR反应组分浓度及反应程序中的一些重要参数进行摸索和优化实验,建立了刺叶墙藓最优ISSR反应体系。反应总体积为20μL,各反应组分终浓度为:2μL10×Buffer,2 mM Mg2 ,0.1 mM dNTPs,0.2μM引物,10~40 ng模板DNA,1U Taq酶。扩增程序为:94℃4 min,1个循环;94℃45 s,退火温度(Tm)45 s,72℃1 min,35个循环;72℃7 min,1个循环;4℃保存。刺叶墙藓是组成古尔班通古特沙漠藓类生物结皮的优势种,研究结果为进一步开展刺叶墙藓遗传多样性的研究奠定了基础。