奥利亚罗非鱼促性腺激素释放激素cDNA的克隆及原核表达

促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)是下丘脑分泌产生的神经激素,对脊椎动物生殖的调控起重要作用。本研究通过RT-PCR方法从奥利亚罗非鱼丘脑中扩增出长约400 bp的目的序列GnRH,并将其克隆到T载体中,经酶切鉴定、序列测定分析后表明其与尼罗罗非鱼和乌颊海鲷具有较高的同源性,处于同一个进化分支上;而与日本青、金鱼、拟鲤、壁虎等的同源性较低。将此cDNA片段定向克隆到表达载体pMAL-c2x中构建重组表达质粒pMAL-GnRH,转化到大肠杆菌TB1中,0.3M IPTG诱导4 h后成功表达出与预期大小相符的约56 kD的融合蛋白。表明大肠杆菌表达系统可以成功地体外表达奥利亚罗非鱼GnRH,为进一步制备抗体了解其免疫调节作用奠定基础。     

心肌型脂肪酸结合蛋白的纯化及亲和配体的研究

利用盐析、G-75凝胶过滤层析和DEAE-葡聚糖纤维素离子交换层析技术,从牛心中分离出心肌型脂肪酸结合蛋白,经SDS-PAGE鉴定与免疫印迹(Western blot)分析,获得了纯品H-FABP。采用噬菌体随机展示七肽库,以H-FABP为靶标,对其亲和配体进行筛选,结果获得了与H-FABP有特异性亲和作用的配体序列,为其临床检测急性心肌梗塞新方法的建立奠定了基础。     

新疆土地退化评价指标体系的建立

采用广义归纳法和软系统归纳集成法,按照土地退化评价的有关概念和相关领域,收集已有的观测资料、国内外有关土地退化研究和土地退化评价研究相关文献资料,通过认真分析搜集土地退化评价指标。聘请新疆从事土地退化研究的专家及新疆省林业厅有关官员11人组成专家咨询组,对已收集到的指标加以整理,使之系统化,确定土地退化评价预选指标集。采用德尔菲法对预选指标集进行3轮咨询、改进,最终确定适合新疆土地退化评价的指标体系由2个A级指标、4／bB级指标和22个C级指标构成。     

百合远缘杂交的胚囊和胚胎发育及胚拯救

采用石蜡切片和子房切片培养方法,对百合杂交组合‘多安娜’ב西伯利亚’和‘普瑞头’ב雪皇后’授粉前后胚囊(胚胎)发育以及胚拯救效果进行了研究。结果表明:‘多安娜’子房内成熟胚囊高峰期滞后于‘普瑞头’3 d左右,而开花后8、10 d时其保持成熟胚囊的比例高于后者。两杂交组合的双受精作用开始于授粉后10 d左右,较亚洲百合自交亲和组合晚,且均存在不同程度的受精后障碍。子房切片培养和胚珠培养仅使‘多安娜’ב西伯利亚’组合获得幼苗。授粉70 d后,两杂交组合都收获少量成熟种子,并经MS培养基培养30 d后萌发成苗。     

福建白水栀鲜花香气的GC/MS分析

采用活体植株动态顶空套袋采集法和TCT-GC/MS联用分析技术,采集分析了白水栀鲜花的香气成分,共鉴定出21种化合物,香气成分主要为(Z)-3,7-二甲基-1,3,6-十八烷三烯(占67.02%)、苯甲酸甲酯(占14.20%)、3,7-二甲基-1,6-辛二烯-3-醇(占10.49%)。     

不同营养源对人工湿地基质生物膜培养液pH值的影响

采用恒温摇床培养方法,研究了不同营养源(处理1:尿素+乙酸钠;处理2:亚硝酸钠+乙酸钠;处理3:硝酸钾+乙酸钠;处理4:碳酸氢铵;处理5:硫酸铵+碳酸氢钠;处理6:磷酸二氢钾+碳酸氢钠)对复合垂直流人工湿地基质生物膜培养液pH值的影响,探讨了pH值变化过程中生物膜脱氢酶活性和多糖含量的变化规律.结果表明,处理1、4以及5中培养液pH值先下降然后再上升,但下降和上升的幅度不同.处理2、3以及6中培养液pH值添加碳源前在7.30～7.40之间缓慢变化,添加碳源后均上升至9.00左右.在培养液pH值变化的过程中,生物膜脱氢酶活性和多糖含量也发生改变.处理1、2、3中生物膜脱氢酶活性均在pH值上升的过程中达到最高值,而处理4、5、6中脱氢酶活性随pH值的变化呈下降趋势.对于所设6个处理,除处理4中多糖含量在整个试验过程中基本不变外,其余5个处理中多糖含量均在pH值上升过程中一直增加.     

枯草芽孢杆菌紫外诱变异甘露聚糖酶基因突变的研究

异甘露聚糖酶是制备益生元甘露寡糖的关键酶。对分泌异甘露聚糖酶枯草芽孢杆菌K-6(Bacillus subtilisK-6)的紫外诱变正突变株K-6-9(Bacillus subtilis K-6-9)的诱变机理进行了研究。通过对出发菌株和正突变株的异甘露聚糖酶基因进行克隆和表达,以生物信息学的方法对异甘露聚糖酶基因序列和蛋白序列进行分析,得到突变株的突变碱基以及突变氨基酸。基因序列研究结果显示,突变体的总碱基突变频率为1.02,碱基突变类型包括碱基的颠换、转换。在检测到的11个碱基突变中,转换的频率(54.5%)是颠换频率(45.5%)的1.2倍,其中,C/T之间的转换所占比例最大,A-G和A-T也具有较高的替换频率,说明胸腺嘧啶(T)具有较高的辐射敏感。通过蛋白序列的比较分析,有2个氨基酸发生突变,由第21位保守氨基酸脯氨酸变异为非保守氨基酸丝氨酸,第23位非保守氨基酸丝氨酸变异为保守氨基酸谷氨酸。综合分析表明:保守区氨基酸与非保守区氨基酸的相互突变可能对其蛋白的正确组装及功能的发挥起重要作用。     

打造"焦点时刻"教育品牌探索提高大学生思想道德修养课教学实效性的有效途径

大学生思想政治理论课的实效性一直是人们普遍关注的焦点。从创新大学生思想道德修养课课外教学形式入手,以“三贴近”为出发点,以直接面对大学生现实思想问题和困惑为切入点;以“主体—主体”间的双向交流互动为手段,通过举办“焦点时刻”教育栏目,正确引导学生关注热点问题,取得了明显的实效。     

马铃薯杂交实生种子发芽特性的研究

为探讨马铃薯杂交实生种子的萌发特性,以昆明市农业科学研究所提供的2003年收获的马铃薯杂交实生种子B9,B12,B16,B18,B20为材料,对其发芽势、发芽率、生活力和活力等指标进行了研究,从中选出了最适发芽条件,确定了初次和末次记数时间。结果表明:马铃薯杂交实生种子最适的发芽条件为恒温20℃,发芽床为纸上或沙中;在第10天进行初次计数,在第21天进行末次计数;生活力>68.0%;在田间生长有68%以上的幼苗高达1 cm以上。     

不同土壤类型对膏桐幼苗耐高温性的影响研究

以膏桐实生盆栽幼苗为试验材料,研究其在不同土壤类型营养配方处理条件下水分饱和亏缺、质膜相对透性、丙二醛含量等的变化.结果表明:不同营养配方在25℃和35℃条件下,膏桐幼苗生长正常;在45℃高温处理下,随着高温时间的延长,燥红壤配方与赤红壤配方和砖红壤配方相比,叶片相对含水量下降幅度和质膜相对透性、丙二醛含量增高幅度较小,变化趋势较平缓.方差分析表明,燥红壤配方与赤红壤配方及砖红壤配方在高温期间的生理指标差异极显著,而赤红壤配方与砖红壤配方差异不显著.综合3种配方在高温期间的生理指标变化情况,其耐高温能力由强到弱依次为:燥红壤、赤红壤、砖红壤.