牛、羊包虫病及其实验室诊断技术

包虫病(echinococcosis)是由寄生于终末宿主(犬、狼、狐狸等)小肠的棘球蚴感染中间宿主(牛、羊、猪、骆驼、人类等)而引起的一种严重的人兽共患寄生虫病。该病在临床表现上缺乏特异性,且多为隐性感染,病原体不易检出,严重危害牧区人民健康和畜牧业发展。对包虫病的病原学特点、流行病学特点、实验室检测和诊断技术作一介绍,以期为该病的预防控制和进一步研究提供参考。     

多头带绦虫Tm16与Tm18抗原基因的克隆及原核表达

为原核表达Tml6和Tm18重组蛋白,本研究以自然感染羊源脑多头坳原头节基因组DNA为模板分别扩增Tml6和Tm 18杭原基因全基因片段,测序鉴定后合成其开放阅读框架DNA片段,将基因组序列中的内含子去除并对其稀有密码子进行改造优化,构建重组表达质粒pGEX-Tm 16和pGEX-Tml8.转化大肠杆菌BL21后以IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达产物并进行纯化.结果显示:在大肠杆菌中表达出带有GST标签的大小约为39.6 ku和39.4 ku的重组蛋白,经谷胱甘肤琼脂糖树脂纯化得到高纯度的可溶性的GST-Tm 16及GST-Tml8重组蛋白,western blot分析表明重组蛋白均能够被兔抗GST单克隆杭体特异性识别.     

低氮胁迫对不同耐低氮性玉米品种苗期生长和生理特性的影响

以4个不同耐低氮性玉米品种为材料,采用盆栽试验研究低氮胁迫对玉米苗期生长和生理特性的影响。结果表明,低氮胁迫下玉米苗期株高、叶面积、地上部干重、单株干重、氮积累量、地上部氮分配比例及叶绿素、可溶性蛋白等指标均显著下降;根冠比、根系氮分配比例、氮素生理效率、可溶性糖、MDA、脯氨酸和POD等均显著升高,根系干重在各氮水平下差异不明显。低氮胁迫下,耐低氮品种株高、叶面积、单株干重、地上部干重、根冠比、氮积累量、地上部氮分配比例、根系氮分配比例和叶绿素、可溶性蛋白、MDA变化幅度低于不耐低氮品种,而氮素生理效率、可溶性糖、脯氨酸和POD变化幅度则大于不耐低氮品种。与不耐低氮品种相比,耐低氮品种通过保持地上部氮分配比例,较高的叶绿素含量和较大叶面积来维持较强的光合生产能力;通过保持较高的可溶性蛋白、可溶性糖和脯氨酸等有机渗透物质含量和较强的POD活性来降低膜脂过氧化伤害,延缓叶片衰老,从而提高了其对低氮环境的适应性。     

犬IFN-α优化基因的真核表达及抗病毒活性的研究

本研究根据酵母系统密码子的偏嗜性,对成熟蛋白基因核苷酸序列进行密码子偏嗜性改造,利用毕赤酵母分泌型表达载体pPICZαC来表达犬IFN-α成熟蛋白基因。并采用非洲绿猴肾细胞(Vero) -水疱性口炎病毒(VSV)系统以细胞病变抑制法为基础来测定重组犬α干扰素的效价,同样方法测定了表达产物对PRV和CDV的抑制作用。本试验实现了犬α干扰素在酵母中的高表达,表达量高达58 mg/L,SDS-PAGE检测大小约为24 ku,比预测分子质量大,推测发生了糖基化。表达产物具有较强的种属特异性,在Vero细胞上对PRV具有较高的抗病毒活性,达到了3.6×10⁷ U/L,对CDV也有很好的抑制作用。本研究为犬IFN-α以后的临床应用研究奠定基础。     

桉树无性系的单板出材率与价值研究

为了系统深入地对单板出材率和价值的影响因素进行研究,以11个6年生桉树无性系为材料,使用无损检测仪器Pilodyn和Fakopp测定立木的外部密度和应力波传输速度,用轴向生长应变仪器CIRAD-ForestMethod测定立木生长应力,结合对原木外观形质的检测和单板质量等级的划分,运用差异性分析、相关分析及多元逐步回归分析。结果表明,无性系间立木的材性性状,原木形质中的小头最小直径、弯曲度和端裂指数存在显著差异。节疤,尤其死节(孔洞)、裂缝是降低单板等级的主要因素。无性系间单板出材率和价值存在显著差异,其中出材率(%)从大到小排序为:GL₉(48.27),EC₃₄(47.17),LH₁(44.00),DH_32-22(42.00),GL₄(37.56),SH₇(34.88),UC_184-1(34.38),LH₅(31.06),M₁(29.74),DH_201-2(25.41),SG₁(16.28),最大是最小的2.97倍;单段原木价值(RMB/log)从高到低排序为:EC₃₄(13.37),GL₉(13.12),GL₄(12.36),LH₁(12.02),DH_32-22(11.55),LH₅(10.72),SH₇(9.22),UC_184-1(7.95),M₁(7.55),DH_201-2(5.97),SG₁(4.88),最高是最低的2.74倍;单位材积价值(RMB/m³)从高到低排序为:EC₃₄(856.49),LH₁(794.55),GL₉(788.68),DH_32-22(763.02),GL₄(681.44),SH₇(629.35),UC_184-1(597.66),LH₅(559.08),M₁(538.39),DH_201-2(450.49),SG₁(294.53),最高是最低的2.91倍。5个品种的无性系作为胶合板用材,尾巨桉无性系价值最高。原木弯曲度是影响单板出材率和价值的主要因素,木材密度、小头直径、应力波传输速度及端裂指数等对其也有显著影响。无损检测仪器Pilodyn和Fakopp可对单板出材率和单位材积价值进行粗略预测。     

3株鸡传染性贫血病毒的全基因组序列分析

通过对3株鸡传染性贫血病毒(CIAV)的全基因组序列比较分析,部分表明广西南宁鸡群CIAV毒株的遗传变异特征。将阳性CIAV的组织样品进行DNA抽提后,运用PCR方法分段扩增CIAV的全基因组,将获得的PCR产物进行基因克隆并进行阳性克隆菌鉴定后送测序。将所获得的基因序列进行拼接成CIAV基因组全长后,应用LaserGene7.1和MEGA4.1软件对CIAV全基因、Viral protein 3(VP3)、Viral protein 1(VP1)和Viral protein 2(VP2)基因序列进行核苷酸、氨基酸同源性分析和遗传进化分析;并对VP1、VP2和VP3蛋白上与毒力、蛋白磷酸酶活性和细胞凋亡相关的氨基酸位点进行分析。结果获得3株CIAV的全基因序列,分别命名为GX1801、GX1804和GX1810;CIAV全基因遗传进化分析表明GX1801、GX1804和GX1810均同属于Group A群,与国内强毒株GD-103和GD-104毒株的亲缘关系较近;基于VP1基因构建的遗传进化树与全基因构建的进化树最相似;GX1801、GX1804和GX1810 VP1蛋白上与毒力相关位点的第75、89、125、141、144、394位氨基酸位点与日本强毒株C368株、国内强毒株GD-103和GD-104株在同一位点保持一致;GX1801、GX1804和GX1810 VP2蛋白上与磷酸酶活性相关的基序(I^94CNCGQFRKH^103)均未发生变异;GX1801、GX1804和GX1810 VP3蛋白与诱导细胞凋亡相关的重要区域(VP3蛋白N端结构域的第1~69位氨基酸)均高度保守。本研究对3株CIAV全基因组进行测定并进行基因分析,获得了其基因组特征,为进一步研究广西CIAV的分子流行和致病性提供参考。     

贵州省某猪场体表脓肿病原菌的分离鉴定及药敏分析

为探明贵州省某猪场引起猪体表脓肿的原因,本研究对该猪场脓肿部位的脓汁进行细菌分离培养,并对分离所得的细菌进行革兰氏染色镜检、生化试验、药敏试验、16S rDNA序列分子分析及动物感染试验。结果显示,从脓汁中成功分离到了3株菌落形态不一的菌株,分别为金黄色葡萄球菌、化脓隐秘杆菌、停乳链球菌类马亚种,根据分离地点和时间将其分别命名为GZGP2018-1、GZGP2018-2和GZGP2018-3;GZGP2018-1菌株与NCBI上金黄色葡萄球菌的同源性高达99.9%,GZGP2018-2菌株与NCBI上化脓隐秘杆菌的同源性高达99.9%,GZGP2018-3菌株与NCBI上停乳链球菌类马亚种的同源性高达100%;3株分离菌株对头孢拉定、环丙沙星、磺胺间甲氧嘧啶和氟苯尼考较敏感,对青霉素类药物和红霉素耐药;3株分离菌株对试验小鼠均具有致死性。本研究为该猪场猪体表脓肿的发病原因、实验室诊断方法及日常防控提供了理论参考。     

微小RNA病毒的研究进展

微小RNA (miRNA)是小分子RNA家族中的一员,内源性非编码基因构成的21～23 nt单链小RNA分子,在生物进化过程中保持了高度的保守性,通常由Dicer酶从具有发夹二级结构的RNA前体加工而来,miRNA虽然微小,但它在真核生物发育和基因表达中通过与靶mRNA形成完全或不完全互补配对从而扮演着重要角色。2004年,发现了编码和表达miRNA的第一个病毒——埃博拉病毒（epstein barr virus,EBV）,最近,miRNA又从肉瘤相关疱疹病毒(kaposi’s sarcoma associated herpesvirus,KSHV) 和人巨细胞病毒（human cytomegalovirus,HCMV）中克隆到,此外,SV40 miRNA被认为负调控T抗原(large T antigen, T Ag)表达,作者对病毒编码的miRNA及miRNA在最近研究中的预测、表达和功能作一综述。     

利用血液维生素A的相对剂量反应评价肉仔鸡维生素A营养状况的研究

试验1采用完全随机试验设计 ,将360只1日龄健康艾维茵肉仔鸡称重后随机分为12组 ,每组30只。其中 ,锌设0、5、40和80mg/kg4个添加水平 ;VA设0、3000和6000IU/kg3个添加水平 ,共构成12组。试验2也采用完全随机试验设计 ,将450只1日龄健康艾维茵肉仔鸡称重后随机分为15组 ,每组30只。其中 ,锌设25、65、145、305和625mg/kg5个添加水平 ,VA设3000、6000和12000IU/kg3个添加水平 ,共组成15组。通过研究日粮锌与VA水平对肉仔鸡生产性能、VA代谢和血清VA浓度的相对剂量反应(RDR)的影响 ,初探利用RDR评价肉仔鸡VA营养状况的可能性。结果表明 :在本试验条件下 ,应用血清VA的RDR值可监测肉仔鸡的VA营养状况 ,结合血清VA浓度可以判断引起血清VA浓度低下的原因 ,是由于日粮VA本身供给不足所致 ,还是由于其它原因引起的。但当日粮VA增加至一定水平时 ,RDR对机体的VA营养状况反映不敏感