牦牛StAR基因克隆及其生物信息学与组织表达特性的研究

旨在克隆获得牦牛StAR基因编码序列（CDS）并进行生物信息学分析,探究其mRNA组织表达特性。本研究以屠宰场采集的成年母牦牛心、肝、脾、肺、肾、卵巢、输卵管、子宫组织（n=5）,不同年龄（胎牛、1岁、2岁）牦牛的卵巢（n=3）,不同发情周期（卵泡期、黄体期）的牦牛卵巢（n=3）,黄体期黄牛的卵巢（n=3）及实验室冻存的牦牛颗粒细胞为研究材料。以牦牛黄体期卵巢cDNA为模板,用逆转录PCR克隆StAR基因,并使用MEGA7.0和ExPASy-ProtParam等软件分析其生物信息学特性;采用实时荧光定量PCR技术分析牦牛StAR基因组织表达特性。结果发现,StAR基因CDS区长858 bp,编码285个氨基酸,StAR蛋白总体带正电荷,属于碱性亲水稳定蛋白,无跨膜结构及信号肽,主要存在于细胞质和线粒体; StAR基因具有较高的保守性,符合物种进化规律。牦牛StAR基因在卵巢表达水平最高（P<0.01）,且2岁时卵巢表达水平极显著高于胎牛和1岁龄（P<0.01）,黄体期卵巢表达水平极显著高于卵泡期（P<0.01）;黄体期黄牛卵巢中StAR基因的表达量极显著高于牦牛（P<0.01）;在颗粒细胞的体外培养过程中StAR基因表达量逐渐上升,在培养24 h时达到高峰（P<0.01）,随后显著降低。综上所述,StAR基因序列较为保守,在牦牛卵巢组织中表达最高,且表达水平随年龄与卵巢周期而变化,提示StAR基因可能参与牦牛卵巢及黄体功能相关的繁殖调控。     

规模化羊场冬季羊舍外围护内表面温度的分布规律

旨在研究河北省规模化羊场冬季羊舍外围护内表面温度的分布规律.选择规模化羊场的6栋羊舍,采用定点定时的检测方法,分别于早、午、晚对各舍外围护内表面(屋顶2个坡、墙4个侧面和地面料道两侧)温度及舍内温湿度进行检测.结果表明,外围护结构内表面温度与舍内环境温度呈显著的线性正相关关系(P＜0.01,r=0.94),回归方程为y...     

单端孢霉烯族毒素生物脱毒技术研究进展

单端孢霉烯族毒素在粮食和饲料中污染严重,主要是T-2毒素和脱氧雪腐镰刀烯醇(DON)等,其毒性作用强,对人和动物产生严重危害.因此,单端孢霉烯族毒素的脱毒方式逐渐成为研究热点,尤其是生物脱毒.很多微生物被证实能够降解霉菌毒素,包括细菌、真菌和酵母菌,可将毒素降解成低毒或无毒的产物.论文以生物脱毒为出发点,从细菌、真菌和...     

添加尿素和糖蜜对甘蔗尾打捆青贮品质的影响

试验采用单因子设计研究不同水平的尿素、糖蜜及糖蜜与尿素混合处理对甘蔗尾打捆青贮品质的影响。试验共分5组,其中1组为对照组,甘蔗尾经揉搓后直接青贮,2~5组为试验组分别添加0.6%尿素、1.0%的尿素、5%糖蜜和0.6%尿素+5%糖蜜,每个处理3个重复,青贮期90 d。试验结果表明,添加0.6%、1%的尿素及0.6%尿素+5%糖蜜均能显著提高青贮饲料的粗蛋白质含量（P<0.05）,但3个组间差异不显著（P>0.05）;单独加尿素的两组青贮料pH较对照组和其它试验组高,外观品质有所下降;添加5%的糖蜜和0.6%尿素+5%糖蜜均能显著降低青贮料的粗纤维含量,增加可溶性糖的含量,青贮料的pH及外观品质较好;综合营养成分和外观品质, 甘蔗尾用尿素与糖蜜混合处理其青贮料的品质最好。     

鸡IL-1β、IL-2、IFN-γ和MGF对表达新城疫病毒HN基因的重组鸡痘病毒免疫效力的影响

将10日龄的SPF鸡和15、28日龄的商品鸡分别随机分组,同时免疫不同剂量的rFPV-HN（表达NDV HN基因重组鸡痘病毒）和表达不同细胞因子（IL-1β、IL-2、IFN-γ、MGF）的重组鸡痘病毒（rFPVs）。在免疫后不同时间,通过检测血液中抗NDV的HN蛋白抗体、脾脏中CD4＋和CD8＋T细胞的变化及攻毒保护率等指标。结果表明：IL-1β或IFN-γ在免疫后期能促进抗HN间接ELISA抗体的滴度上升,而且产生抗体的整齐度好;IL-1β或IL-2可以显著增加脾脏中CD4＋和CD8＋T细胞含量;IL-1β、IL-2或IFN-γ同样可以提高商品鸡攻毒后的存活率。IL-2和IFN-γ在增加脾脏中CD4＋和CD8＋T细胞的数量及攻毒保护方面表现出一定的协同增强作用。     

东亚和南亚固有绵羊群体X-蛋白等位基因特有频率分布的研究

本研究利用单向水平板淀粉凝胶电泳以我国5个固有地方绵羊品种包括湖羊（Hu）、同羊（Tong）、滩羊（Tan）、小尾寒羊（Han）、洼地羊（WD）为研究对象对X-蛋白遗传多样性进行了检测,并引用我国周边国家、地区绵羊品种为分析背景。结果表明以喜马拉雅山脉为界的亚洲东部和南部的北部群体和南部群体在编码的X（＋）型的显性等位基因X频率上存在极显著差异（P〈0．01）。北部检测的群体中X等位基因频率范围为0～0．18,平均值为0．0878,包括属于藏羊和蒙古羊系统的小尾寒羊（Han）、不丹羊（Bhutan）、同羊（Tong）、湖羊（Hu）、滩羊（Tan）、洼地绵羊（WD）、Bhyanglung绵羊（Bhy）、Baruwal绵羊（Bar）、云南绵羊（Yunnan）、哈拉和林绵羊（Kh）和乌兰巴托绵羊（Ub）。南部检测的群体中X等位基因频率范围为0．2037～0．4655,平均值为0．3082,包括属于印度绵羊系统的孟加拉国绵羊（Ban）、Kagi绵羊（Kagi）、Lampuchhre绵羊（Lamp）、越南占部落绵羊（Cham）和缅甸绵羊（Mya）。本研究揭示X等位基因可作印度绵羊的标记,在绵羊群体尤其是亚洲东部和南部绵羊系统形成的研究中具有潜在的重要作用。     

结缕草3个品种抗寒性的综合评价

跟踪测定了田间自然降温过程中,结缕草3个品种叶片、茎、根茎的电解质渗透率、可溶性糖含量、游离脯氨酸含量、丙二醛含量、可溶性蛋白质含量和叶绿素含量6个抗寒指标的变化。根据指标测定值的变化趋势,采用加权法对结缕草3个品种的抗寒能力进行综合评价。结果表明,兰引3号抗寒力最强,交大1号次之,青岛最差。通过试验测定,选出了能够较好地反映结缕草抗寒性的指标,包括电解质渗透率、可溶性糖含量、游离脯氨酸含量、丙二醛含量、可溶性蛋白质含量和叶绿素含量。     

四种动物凝血三项值初探

为了探索正常生理状态下4种动物的凝血3项值,分别用凝血酶原时间测定试剂盒、自制兔脑粉浸出液、自制鸡脑粉浸出液测定了鸡、鲤鱼、犬和羊4种动物的血浆凝血酶原时间(PT),用试剂盒测定了4种动物的凝血酶时间(TT)和活化部分凝血酶原时间(APTT).结果表明:3种方法测定的4种动物的PT值在相同动物间无显著差异(P>0.05),说明有颌类脊椎动物体内的组织因子在启动血液凝固的作用上具有进化的保守性;4种动物的凝血3项值分别为鸡PT 43.42 s ,TT 16.85 s ,APTT 91.33 s;鲤鱼PT 73.39 s ,TT 20.75 s ,APTT 12.80 s;犬PT 10.70 s ,TT 13.32 s ,APTT 25.89 s;羊PT 23.29 s ,TT 8.04 s ,APTT 25.92 s.     

猪链球菌2型人源分离株EF单克隆抗体的制备与鉴定

为了解猪链球菌2型（SS2）菌株毒力相关因子的致病机理,建立高效的免疫学检测方法,将SS2胞外因子（EF）抗原性强的区域通过基因克隆、原核表达,经亲和层析纯化的EF蛋白免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴细胞杂交瘤技术将免疫细鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,建立了4株分泌抗EF蛋白单克隆抗体（McAb）的杂交瘤细胞系2G1、5H7、3H4和1F2。间接ELISA测定杂交瘤细胞培养上清的效价为1∶128～1∶512,诱生腹水的抗体效价为1∶104～1∶105。4株McAb腹水的Western blot鉴定表明McAb能特异性的识别EF。以2G1单抗腹水与和EF多克隆抗血清建立的夹心ELISA可特异地检测EF。     

桑椹素对老龄小鼠肾阳虚症状的疗效试验

为进一步开发桑椹的药用保健功能,研究了桑椹素对老龄肾阳虚小鼠肾损伤的保护作用,并对其机制进行了探讨。将雄性老龄小鼠随机分为正常组和模型组,桑椹素低、中、高剂量组(0.1、0.2、0.4 g/kg)和补肾填精丸组(0.35 g/kg),测定小鼠血清、肾脏一氧化氮(NO)含量变化,观察小鼠肾脏组织结构病理变化。结果表明,模型小鼠以0.2、0.4 g/kg剂量桑椹素灌胃可明显改善肾阳虚症状,显著提高血清、肾脏NO含量,减轻氢化可的松引起的肾脏损害。其作用机制之一可能是通过提高肾脏NO的合成,增加肾血流量和肾小球滤过率,从而减轻对肾脏的损害。