鸡软骨细胞体外分离培养鉴定以及过表达miR-15a对软骨细胞的影响

为分析miR-15a在肉鸡不同组织中的表达情况,并探究过表达miR-15a对体外培养鸡软骨细胞的影响。本研究首先通过倒置显微镜观察、PCR、凝胶电泳和甲苯胺蓝染色对体外分离培养的软骨细胞进行鉴定。通过实时荧光定量PCR检测miR-15a在肢体内外翻畸形(valgus-varus deformity, VVD)组和健康组肉鸡中(各3只)各组织的表达量。之后通过CCK8和EDU方法分析软骨细胞过表达miR-15a后细胞增殖情况。软骨细胞转染miR-15a mimics后,通过qPCR检测软骨细胞的标志基因Collagen-2、Aggrecan、Collagen-10,成熟分化基因Runx2、Sox9、VEGF、MMP9,炎性因子IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α、TGF-β3以及凋亡基因Fas、FasL、Bcl-2的表达量。并构建FKBP5 3'UTR的野生型载体和突变型载体,通过双荧光素酶检测报告检测miR-15a与FKBP5的靶向关系。结果表明,本研究所用的胰蛋白酶、Ⅱ型胶原酶和透明质酸酶联合消化法成功分离得到状态良好的软骨细胞。荧光定量结果显示,miR-15a在各组织中均有表达,与健康组相比,miR-15a在VVD组的肝(P < 0.01)、脾(P < 0.05)、胸腺(P < 0.01)中的表达量显著升高,在心和胸肌组织中的表达量显著降低(P < 0.01)。CCK8与EDU分析结果显示,与NC组相比,过表达miR-15a组软骨细胞增殖速度显著降低(P < 0.01),增殖细胞数量显著减少(P < 0.01)。qPCR结果显示,与mimics NC组相比,miR-15a mimics组的软骨细胞标志基因Aggrecan、成熟分化基因Sox9、Runx2表达量显著降低(P < 0.05),Fas基因表达量极显著上升(P < 0.01),FasL基因和抗凋亡基因Bcl-2极显著下降(P < 0.01)。成功构建了FKBP5 3'UTR野生型和突变型载体,双荧光素酶检测报告结果显示预测的靶基因FKBP5与miR-15a没有靶向关系。本研究成功分离并鉴定了鸡软骨细胞,过表达miR-15a抑制鸡软骨细胞增殖、成熟和分化并促进细胞凋亡。     

帕拉英达芒果叶片养分变化规律及营养诊断

[目的]分析帕拉英达芒果叶片养分含量的变化规律,为确定芒果营养诊断指标及指导其科学施肥提供参考依据.[方法]选择云南保山地区管理规范且高产芒果园中长势正常的帕拉英达芒果树进行随机采样,分析第1蓬叶中氮、磷、钾、钙、镁和硫6种养分含量,根据各养分含量的年离均差、变异系数和年份间稳定性,确定进行叶片养分诊断的适宜采样时期和诊断指标.[结果]帕拉英达芒果叶片中氮、钙、镁和硫含量在2013~2015年的1月变异系数最小,分别为9.46%、22.76%、1.84%和3.58%,1月适宜作为帕拉英达芒果叶片营养诊断的采样时间,其营养诊断指标为:氮含量12.68~15.34 g/kg,磷含量1.05~1.19 g/kg,钾含量4.88~8.92 g/kg,钙含量14.10~22.40 g/kg,镁含量2.13~2.21 g/kg,硫含量1.24~1.34 g/kg.[结论]在云南保山地区,宜在每年1月采集第1蓬叶进行帕拉英达芒果叶片营养诊断.     

四种甘蓝雄性不育类型差异基因表达分析

通过cDNA-AFLP分析了4种甘蓝(Brassicaoleracea)雄性不育类型的花粉败育特异中断基因表达特点,并对不同特异表达类型分别选取代表性TDFs克隆测序。结果表明,表达差异在转录片段多态性上能反应出不同雄性不育类型在细胞学水平上的败育时期和特征差异,4种不育类型中萝卜胞质不育(OguCMS)与可育类型遗传距离最近。实验未检出萝卜胞质不育特异中断的TDFs,说明其特异中断基因数目较少,因此检测到这一类基因较为困难。三种代表黑芥胞质不育(NiCMS),隐性核不育(Ms-cr1)和显性核不育(Ms-cd1)特异中断表达的TDFs共计46条。序列分析结果表明,黑芥胞质不育,隐性核不育和显性核不育类型分别与烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶,具RNA识别结构域(RRM)的蛋白,质膜类钙转运ATP酶基因表达受阻有关。     

不同施氮量对花后高温春小麦叶绿素含量及荧光特性的影响

[目的]研究不同施氮量对花后高温下春小麦叶绿素荧光特性的影响,为分析氮素营养调控春小麦高温危害的内在机理提供理论依据.[方法]以宁春4号和宁春47号为材料,设施纯氮120 kg/ha(N1)、240 kg/ha(N2)和300 kg/ha(N3)3个施氮量处理,以不施氮为对照(CK),于花后18~22 d进行(35±2)℃高温处理,测定花后7、14、23、28和33 d不同处理的叶绿素含量及荧光参数.[结果]高温胁迫后(花后23~33 d),与CK相比,3个氮肥处理整体上可增加宁春4号和宁春47号的叶片SPAD值、最大荧光(Fm)和可变荧光(Fv),降低初始荧光(Fo),使Fv/Fo、Fv/Fm上升、Fo/Fm下降,其中N1和N2处理较CK增加或降低的幅度较明显.同时,花后23~28 d,N1和N2处理的单位反应中心吸收的光能(ABS/RC)、单位反应中心捕获的用于还原QA的能量(TR0/RC)和单位反应中心耗散的能量(DI0/RC)显著高于CK(P<0.05,下同),花后33 d时显著低于CK;单位反应中心捕获的用于电子传递的能量(ET0/RC)在花后23~33 d均表现为N2>N1>N3>CK.[结论]适量施用氮肥可缓解高温对春小麦光合器官结构和功能的伤害,有助于提高其光合性能.     

莱茵鹅15项血清生化指标的测定及分析

为了更有效地保护和利用莱茵鹅的优良基因,对北方种鹅场和双鸭山种鹅场的莱茵鹅血清进行了15项生化指标的测定及分析。结果表明:北方种鹅场和双鸭山种鹅场莱茵鹅血清三酰甘油、肌酐、直接胆红素、氯、镁、尿素氮、白蛋白和钙等血清生化指标之间的差异达到了极显著水平(P<0.01);血清总蛋白和总胆红素之间的差异达到了显著水平(P<0.05);而葡萄糖、高密度脂蛋白胆固醇、总胆固醇、无机磷和尿酸含量之间差异不显著(P>0.05)。研究还初步建立了莱茵鹅15项血清生化指标的参考值及参考范围。     

有棱丝瓜新品种皇冠3号的选育

【目的】为获得适合我国华南地区气候特点的有棱丝瓜新品种。【方法】以桂林八棱瓜、夏棠丝瓜多代定向选择获得的稳定自交系进行配组杂交,并对其杂交后代分离群体进行系统选育。【结果】选育出有棱丝瓜新品种皇冠3号,其植株生长势旺,第1雌花节位春植6～9节,秋植18～20节,主侧蔓均可结瓜。商品瓜长50~60cm,头尾均匀,棱沟浅,皮绿色,单瓜重350～450g,瓜身柔软,纤维少,瓜肉白色,味清甜。中熟品种,春播采收期50～60d,秋播45d左右。生产示范平均产量34509.0～38577.0kg/ha,比对照品种桂林八棱瓜增产22.3%～31.0%。耐热,较抗角斑病和霜霉病。【结论】皇冠3号丝瓜具有丰产稳产、商品性好、抗病性强、耐热等特点,适宜在广西、海南及广东等有棱丝瓜主产区推广种植。     

“4.24”民勤特强沙尘暴过程初步分析

特强沙尘暴是干旱区一种破坏性极大的灾害性天气现象,文中分析了2010年4月24日民勤特强沙尘暴过程中地面气象要素和近地面沙尘浓度的变化,同时对大气动力、热力学参数进行了计算和分析。结果表明:在强沙尘暴过境时地面水平风风向经历了从稳定到多次调整,再到稳定,最后崩溃的演变。风向调整时,风速减弱,而调整之后,风速加大,同时伴有很强的上升气流。强沙尘暴使地表发生非常严重的风蚀起沙现象,近地面沙尘浓度迅速升高200多倍。沙尘暴天气来临前,地面空气呈干热状态处于低气压控制之下,而在沙尘暴过境时和过境后,地面空气显得相对湿冷,地面气压急剧上升,并处于高压控制之下。沙尘暴的强度与相对风暴螺旋度有很好的对应关系。     

吉林省不同类型土壤玉米施用钾肥效应研究

通过田间试验,研究了不同类型土壤上不同钾肥用量的效应以及土壤速效钾含量与玉米最佳施肥量的关系。结果表明:在不同类型土壤上,钾肥用量与玉米产量之间存在函数相关;土壤养分测定值与施钾量之间存在着密切的直线负相关,可将其作为玉米最佳施肥量的重要科学依据。     

樱桃番茄嫁接砧木筛选研究

以格格樱桃番茄作接穗,农优野茄、托鲁巴姆、金钻砧木和砧木1号作砧木,进行嫁接和嫁接苗栽培试验.试验结果表明.4种砧木与樱桃番茄嫁接亲和性由强到弱依次为:砧木1号、金钻砧木、农优野茄和托鲁巴姆;嫁接苗青枯病发病率与自根苗差异均达到极显著水平,嫁接苗产量比自根苗增产15.9%～48.7%,在抗青枯病和产量方面表现都比较好的砧木为农优野茄和砧木1号.     

土壤基质势调控对温室滴灌番茄土壤水分分布和产量的影响

【目的】指导设施蔬菜生产中科学合理地利用滴灌技术进行灌溉。【方法】采用小区试验的方法,以冬春茬番茄为研究对象,布置了7个不同土壤基质势阈值的试验,在番茄开花坐果期和结果期分别控制滴头正下方20 cm深度土壤基质势在-15和-15 kPa(S1)、-15和-30 kPa(S2)、-15和-45 kPa(S3)、-25和-25 kPa(S4)、-30和-15 kPa(S5)、-30和-30 kPa(S6)以及-30和-45 kPa(S7),研究了日光温室滴灌土壤基质势调控下土壤水分随时间变化及空间分布的规律,以及番茄产量、畸形果率和灌溉水利用效率等。【结果】①控制滴头正下方20 cm深度土壤基质势可以明显影响0～100 cm深度土壤水分状况。②在番茄开花坐果期,当土壤基质势阈值控制在-30 kPa或更高时,番茄根系主要吸收利用0～60 cm深度以上范围的土壤水分,70 cm深度以下土壤水分基本不变,0～60 cm深度土壤体积含水率平均为28.6%,为田间持水率的84%,60～100 cm土壤体积含水率平均为36.2%,为田间持水率的90%。③番茄进入结果期后,当土壤基质势阈值控制在-25～-15 kPa时,整个土体土壤含水率基本保持在田间持水率的77%～91%,根系主要吸收利用0～60 cm深度以上范围的土壤水分,70 cm深度以下土壤水分消耗缓慢;当土壤基质势阈值降低到-45～-30 kPa时,根系吸收利用到80～100 cm深度的土壤水分,整个土体土壤含水率不断降低,降低到田间持水率的60%～66%。④不同处理番茄产量、畸形果率和灌溉水利用效率有明显差异,其中S3和S7处理番茄产量高,S5处理产量低;S1、S3和S4处理的畸形果率大,S6和S7处理的畸形果率低;S1处理的灌溉水利用效率最低,S7处理的灌溉水利用效率最高。【结论】日光温室少量高频滴灌条件下,当滴头正下方20 cm深度土壤基质势阈值开花坐果期控制在-30 kPa、结果期控制在-45 kPa时,整个土体土壤水分状况基本良好,番茄的产量高,畸形果率低,灌溉水利用效率高。