犬冠状病毒基因疫苗表达载体的构建及其免疫原性研究

以pVAX1为载体首次构建了犬冠状病毒病基因的3种真核表达质粒。首先将犬冠状病毒大熊猫株（CCVDXMV）纤突蛋白（S）、膜蛋白（M）和核蛋白（N）基因进行了克隆和序列测定。将测序后的质粒pTS、pTM和pTN分别双酶切，回收目的基因片段并将其定向克隆到真核表达质粒pVAX1中得到重组质粒pVAXS、pVAXM和pVAXN。将这3种真核表达质粒通过脂质体介导法转染MDCK细胞，通过RT—PCR法进行转录水平的检测，并用间接ELISA法检测目的蛋白的表达情况。结果在pVAXS、pVAXM、pVAXN转染MDCK细胞36h后就可检测到目的基因的转录；在转染72h后可检测到3种目的蛋白的表达。动物免疫试验表明，3种真核表达载体能有效地诱导机体产生细胞免疫与体液免疫应答，这为CCV基因疫苗的研究奠定了良好的基础。     

Age‐related changes in semen quality characteristics and expectations of reproductive longevity in Duroc boars

Quadratic fitting was used to regress semen characteristics of 1441 samples consisting of 12‐month collection from 58 Duroc boars against animal age varied from 10 to 80 months. Data was divided into two groups of cool (14.0–22.7°C, RH 81.5%) and hot season (22.9–29.9°C, RH 86.6%), to test effects of age, season and their interactions. Results revealed that young boars of around 1 year old could endure the hot season. The endurance gradually diminished as animals grew. In the hot season animals exhibited peak performance at age around 33 month and it remained for 1 month, while cool‐season kept boars could last for 48 months from 16 months old onward. The reproductive longevity should be 51 month in a subtropical environment and it may extend to 70 month if heat stress can be avoided. The estimated total sperm contribution of a Duroc boar would be 1.8 times more when kept below 22°C than in a natural subtropical environment. It is concluded that to maintain Duroc boars as semen donor to at least 4 years of age is feasible in a subtropical environment and boar longevity could reach 6 years old if well kept in a temperate region.     

从长春地区牛肉和猪肉中检出产vero毒素大肠杆菌O157:H7

用分离培养法、生化反应鉴定、胶乳凝集试验和聚合酶链式反应（ＰＣＲ）对长春地区市售的４０份牛肉和３０份猪肉样品进行了调查,结果从２份牛肉（５％）和１份猪肉（３．３％）样品中检出了产ｖｅｒｏ毒素大肠杆菌Ｏ１５７：Ｈ７。     

改造鼠荒地,改善草原生态环境

鼠荒地是害鼠破坏草原植被以后形成的次生裸地。在鼠荒地上 ,原生植被破坏率达80 %～ 90 % ,并滋生一、二年生杂草 ,植被稀疏 ,群落结构简化 ,植被盖度不及 10 % ,地上植物量为37.5～ 152 .5kg/hm2 。土壤侵蚀严重 ,地表形态支离破碎 ,并出现沙化特证 ,对周边草场构成沙尘暴和扬沙威胁。进一步对鼠荒地的发生与发展、鼠荒地的生态环境特征等问题作了深入论述 ,并针对鼠荒地提出了几项有效的改造措施。     

新型秸秆微贮饲料的加工利用方法

在宁夏南部山区,一方面由于干旱少雨,加之气候寒冷,饲草的生育期短,随着广大回汉人民生活水平的提高和养殖业的不断发展,饲草的缺乏问题严重制约着当地畜牧业的进一步发展,另一方面,由于广大农户缺乏饲草调制方面的技术而用收获籽实后的农作物秸秆直接饲喂家畜,不但适口性差,养分含量低,而且对饲草资源的浪费相当严重.     

Effects of Nano-Ceria on Activity and Gene Expression of Pancreatic Lipase in Hens

本文旨在建立胰脂肪酶实时荧光定量PCR检测方法的基础上研究纳米氧化铈对蛋鸡胰脂肪酶活性及基因表达的影响.试验选择26周龄健康商品蛋鸡384只,随机分为4组,每组8个重复,每个重复12只鸡.以玉米-豆粕型饲粮为基础饲粮,在基础饲粮中分别添加0(Ⅰ组)、30(Ⅱ组)、60(Ⅲ组)和90 mg/kg(Ⅳ组)的纳米氧化铈,试验期7周.结果表明:1)本试验建立的胰脂肪酶实时荧光定量PCR检测方法具有线性关系好,特异性、敏感性、重复性高等特点,可用于检测胰脂肪酶mRNA表达水平;2)Ⅲ组胰脂肪酶活性显著或极显著高于Ⅰ组和Ⅳ组(P ＜0.05或P＜0.01),胰脂肪酶mRNA表达水平显著高于其他各组(P＜0.05).由此得出,饲粮中添加60 mg/kg纳米氧化铈可显著提高蛋鸡胰脂肪酶活性,上调胰脂肪酶mRNA表达水平.     

顶复门原虫电子转移链代谢及Ⅱ型NADH脱氢酶研究进展

顶复门原虫是包括刚地弓形虫、疟原虫及球虫等在内的一大类寄生性原虫的总称,可引起重要的人畜寄生虫病.抗顶复门原虫药物的长期使用,甚至是滥用,使得这类寄生虫对现有药物产生了明显的抗药性,急需开发新型药物.Ⅱ型NAD(P)H脱氢酶是电子转移链途径中的关键酶,由于其仅存在于某些植物、细菌、真菌和寄生原虫等一些低等生物体内,而在高等动物体内缺失,是研发新型抗感染性药物的重要靶标.笔者主要针对顶复门原虫线粒体电子转移链代谢途径以及Ⅱ型NAD(P)H脱氢酶的研究概况进行综述.     

家蚕乳糖酶-根皮苷水解酶基因BmLPH014192的表达和序列选择性剪接分析

乳糖酶-根皮苷水解酶(lactase-phlorizin hydrolase,LPH)是肠组织上皮细胞微绒膜上的一种糖蛋白,对乳糖和根皮苷有水解活性。鉴定了家蚕基因组中的一个LPH基因,命名为BmLPH014192。该基因CDS长1 305 bp,编码434个氨基酸,预测蛋白质分子质量为50.8 kD,等电点(pI)为5.35。将该基因的cDNA与家蚕基因组序列比对,显示其具有7个外显子,外显子/内含子边界处均符合GT-AG规则。将BmLPH014192与哺乳动物人、褐鼠、家兔和昆虫黑腹果蝇、冈比亚按蚊、二化螟、佛罗里达弓背蚁、大红斑蝶等的LPH进行氨基酸序列比对,相似度都在60%左右;聚类分析中BmLPH014192与昆虫类LPH聚在一起。芯片数据分析结果表明BmLPH014192在家蚕5龄第3天幼虫的9个组织中,只在中肠中有表达,并且表达量很高。在绿茧品种大造和白茧品种19-710幼虫的中肠中扩增到的特异性条带其长度分别为1 000 bp和750 bp,存在序列选择性剪接;在其它白茧品种的中肠中没有扩增出特异性条带。推测BmLPH014192的特殊表达方式可能与其在不同家蚕品种中肠组织中的特异性功能有关。     

饲料脂肪水平对白甲鱼幼鱼生长性能、体组成和血清生化指标的影响

本试验旨在研究饲料脂肪水平对白甲鱼幼鱼生长性能、体组成及血清生化指标的影响。选用初始体质量为(0.78±0.05)g的白甲鱼幼鱼900尾,随机分成6组(每组3个重复,每个重复50尾),分别饲喂豆油添加水平为0(对照组)、2%、4%、6%、8%和10%(实测脂肪水平为2.83%、4.52%、6.68%、9.14%、11.35%和14.07%)的试验饲料,养殖期为60 d。结果表明:随饲料脂肪水平的升高,白甲鱼幼鱼的增重率(WGR)、特定生长率(SGR)、蛋白质效率(PER)均呈现先上升后下降的趋势,饲料系数(FCR)呈现先下降后上升的趋势。饲料脂肪水平为11.35%时WGR、SGR达到最大(分别为362.98%和3.06%/d),显著高于除6.68%和9.14%组之外的其他各组(P<0.05);饲料脂肪水平为9.14%时PER达到最大(3.70%),而FCR达到最小(1.34),显著高于/低于除11.35%组之外的其他各组(P<0.05)。白甲鱼幼鱼的肝体比则随饲料脂肪水平的升高而上升,6.68%、9.14%、11.35%和14.07%组均显著高于对照组(P<0.05)。各组白甲鱼幼鱼的脏体比无显著差异(P>0.05)。通过二次回归分析可知,白甲鱼幼鱼WGR、SGR、FCR及PER最优时,饲料脂肪水平分别为10.12%、9.56%、9.42%和10.18%。随着饲料脂肪水平的升高,白甲鱼幼鱼全鱼及肌肉粗脂肪含量逐渐升高,而全鱼及肌肉粗蛋白质含量则呈先升后降的变化趋势。饲料脂肪水平对白甲鱼幼鱼全鱼及肌肉水分和粗灰分含量无显著影响(P>0.05)。随着饲料脂肪水平的升高,白甲鱼幼鱼的血清胆固醇(CHO)和甘油三酯(TG)含量先升高后降低,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和胆汁酸(TBA)含量以及谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)活性逐渐升高,而低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量则逐渐降低。饲料脂肪水平为9.14%时,血清CHO含量达到最高,且与其他各组差异显著(P<0.05);饲料脂肪水平为11.35%时,血清TG含量达到最高,且与其他各组差异显著(P<0.05)。由此得出,适宜的饲料脂肪水平可促进白甲鱼幼鱼的生长,提高其饲料转化率和免疫能力;饲料脂肪水平过高则可引起其肝损伤或组织病变。在本试验条件下,综合考虑生长性能、体组成及血清生化指标,白甲鱼幼鱼饲料中适宜的脂肪水平为9.42%～10.18%。     

鸭疫里默氏杆菌病的研究进展

鸭疫里默氏杆菌 (Ｒｉｅｍｅｒｅｌｌａａｎａｔｉｐｅｓｔｉｆｅｒ,简称ＲＡ)病原称为鸭疫巴氏杆菌 (Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａａｎａｔｉｐｅｓｔｉｆｅｒ,简称ＰＡ)病、传染性浆膜炎(Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｓｅｒｏｓｉｔｉｓ)、新鸭病 (Ｎｅｗｄｕｃｋｓｙｎ ｄｒｏｍｅ)、鸭败血症 (Ｄｕｃｋｓｅｐｔｉｃｅｍｉａ)、鸭疫综合征 (Ａｎａｔｉｐｅｓｔｉｆｅｒｓｙｎｄｒｏｍｅ) ,Ｓｅｇｅｒｓ于 1 993年通过对其分子生物学分析而改称为ＲＡ。它是侵害雏鸭的一种急性或慢性败血性传染病。1 932年由美国学者Ｈｅｎｄｒｉｃｋｓｏｎ和Ｈｉｂｅ…