猪繁殖与呼吸综合征病毒A06株单克隆抗体的制备及鉴定

用纯化的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)A06株病毒抗原免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合.经间接ELISA方法筛选,有限稀释法克隆,获得4株稳定分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为3D12、4E10、6E2和7G6.其细胞培养上清效价分别为1:256、1:512、1:512和1:256,小鼠腹水效价分别为1:1.024×106、1:2.048×106、1:1.024×106和1:2.048×106.亚型鉴定表明,3D12、4E10、6E2和7G6分别为IgG2b、IgG2b、IgG1和IgG2a.ELISA检测结果显示,4种PRRSV单克隆抗体仅与PRRSV反应,不与其他病毒反应,表明均为抗PRRSV的型特异性单克隆抗体.对单克隆抗体腹水液进行IgG提取纯化,SDS-PAGE电泳验证,仅出现两条清晰条带,无杂带出现,证明纯化效果较好.这4种单克隆抗体的获得,为建立PRRSV检测方法提供了强有力的工具.     

ICP-AES法测定饲料中多种微量元素的方法研究

运用电感耦合等离子体原子发射光谱法（ICP-AES）同时测定饲料中Cu、Fe、Mn、Zn、Ca、Mg、P、Pb、Cr、Cd 10种微量元素的含量。通过选择合适的分析条件和样品处理方法,线性范围达到3个数量级,线性相关系数大于0.999。方法的回收率在85.0%～96.5%,各元素测定结果的相对标准偏差RSD均在7%以下。测定国家标准物质玉米粉的结果与标准值比较一致,均在误差范围以内。该方法对实际样品的测定结果与国家标准的测定结果也比较吻合。该方法简便快速,准确度高、精密度好,适用于不同饲料中微量元素的测定。     

动物园部分动物舍内外环境中常见病原菌的调查

为了解动物园动物及其环境中常见病原菌的分布情况,采用菌落计数、细菌分离培养及动物致病性试验等方法,对南京市红山森林动物园的部分动物生存环境的空气、土壤、水共126份样品进行检测.结果表明,各种动物舍内菌落总数均大于舍外菌落总数.从126份样品中分离到16个菌种127个菌株,其中葡萄球菌有69株,占54.33%(69/127);肠杆菌有51株,占40.16%(51/127);链球菌有7株,占5.51%(7/127).通过动物试验得知,分离得到的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、臭鼻克雷伯氏菌、粘质沙雷氏菌、假结核耶氏菌、福氏志贺氏菌1-5型、聚团肠杆菌和血链球菌等8种致病性较强,松鼠葡萄球菌、表皮葡萄球菌、解糖葡萄球菌和变异链球菌等4种致病性较弱,耳葡萄球菌、头葡萄球菌、施莱福葡萄球菌和唾液链球菌等无致病性.动物舍内外环境中葡萄球菌是主要污染菌.     

鸡源大肠杆菌ESBLs基因型检测及其耐药性分析

采用K-B法检测30株鸡源大肠杆菌对16种抗菌药物的耐药性,根据耐药表型和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的基因型流行情况,指导临床合理用药.结果表明,24株大肠杆菌为产ESBLs株.扩增出了与预期片段大小相符的TEM型、SHV型、CTX-M型、OXA型基因.有5株同时检测出TEM和CTX-M基因.产酶大肠杆菌对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、环丙沙星的耐药率100%.其多重耐药性明显比非产酶大肠杆菌严重.     

乙型脑炎病毒NS1蛋白的可溶性表达与抗原性分析

为获得可溶性表达的乙型脑炎病毒(JEV)NS1蛋白,将编码JEV SA14-14-2株NS1蛋白基因克隆至原核表达载体pMAL-c5X中,构建重组融合表达质粒pc5X-NS1;用重组质粒转化宿主菌ER2523后,经IPTG诱导得到可溶性的融合蛋白MBP-NS1;优化诱导表达条件,于28℃、0.3 mmol/L IPTG诱导4 h;最后融合蛋白经直链淀粉树脂柱纯化。结果表明:重组融合蛋白MBP-NS1具有良好的抗原性和特异性。     

锦珠草颗粒对人工感染鸡大肠杆菌病的防治试验

为探讨锦珠草颗粒对鸡大肠杆菌病的防治效果及作用机理,将350羽12日龄海兰褐鸡随机均分7组:锦珠草颗粒预防组,低、中、高剂量治疗组,药物对照组,模型对照组和健康对照组。除健康对照组外,其余各组均胸肌接种鸡大肠杆菌O78,预防组于攻毒前3 d灌服锦珠草颗粒,各药物治疗组于攻毒后6 h给药,连用5 d。结果表明,锦珠草颗粒预防组保护率极显著高于模型组(P0.01),低、中、高剂量组有效率、治愈率极显著高于模型组(P0.01),与药物对照组相当(P0.05);锦珠草颗粒预防组体增质量极显著高于模型组和药物对照组,中、高剂量组与健康对照组相当(P0.05);中剂量组在试验第11天时血清TNF-α和IL-1β含量显著低于模型组(P0.05);中、高剂量组在第3,7,11天时ALT、AST、ALB和TBIL的水平与模型组比较差异极显著(P0.01),与健康对照组相当(P0.05),其中TBIL水平极显著低于药物对照组(P0.01)。说明锦珠草颗粒能有效抑制促炎因子,调节或控制血清生化指标,有效防治鸡大肠杆菌病。     

苏太仔猪FUT1基因M307位点多态性与F18大肠杆菌抗病相关性的体外鉴定

采用PCR-RFLP方法检测了江苏苏太断奶仔猪FUT1基因M307位点等位基因多态性分布,在所检的49头仔猪中,GG基因型个体16头,AG基因型19头,AA基因型14头。在此基础上,制备上述不同基因型个体仔猪小肠上皮细胞,分别与表达F18ab菌毛的野生型大肠杆菌、表达F18ac菌毛含fed操纵子全基因的重组大肠杆菌和V型系统表面分泌表达F18abFedF亚单位的重组大肠杆菌进行体外黏附试验和黏附抑制试验。研究结果表明:FUT1基因M307位点中GG型和AG型仔猪小肠上皮细胞均能黏附上述3种大肠杆菌,而AA型个体小肠上皮细胞则不能黏附。将上述3种大肠杆菌分别与抗F18ab菌毛高免血清、F18ac菌毛高免血清及抗F18abFedF亚单位单因子血清作用后,则失去黏附仔猪肠上皮细胞能力。上述结果对苏太猪从体外试验上证明了FUT1基因M307位点多态性与断奶仔猪腹泻和水肿病存在着直接的相关性。     

益生菌对肠内营养治疗并发腹泻的调节作用

为研究益生菌对行肠内营养治疗患者肠道适应性的调节作用,采用随机数表将157 例患者分为研究组（n＝101）和对照组（n＝56）,进行双盲、随机对照研究。根据Harris-Benedict公式测算基础能量消耗,氮供给量0.2 g/（kg?d）,研究组给予肠内营养＋益生菌,对照组给予肠内营养,治疗期10 d。统计患者的基础人口学资料及临床信息,于肠内营养治疗前和治疗后第10天观察并记录患者的体质量、体质量指数等指标,评价肠道及肾脏等重要脏器的营养代谢状况。结果表明：肠内营养治疗后第10天,2 组患者的营养不良     

PEG模拟水分胁迫对桑种萌发及抗性生理生化指标的影响

以“桂优62号”桑种为材料,在不同浓度高分子量的聚乙二醇（PEG6000）模拟的水分胁迫条件下,以摇床培养方法对其进行萌发培养。测定不同浓度PEG溶液（30％、25％、20％和双蒸水）中萌发种子的相关抗性生化指标,实验结果经统计分析表明,当PEG浓度为30％时,萌发种子中的脯氨酸、可溶性蛋白、可溶性糖和丙二醛的含量均极显著地高于CK（双蒸水）,说明在高浓度PEG溶液处理下能够萌发的种子具有较强的抗水分胁迫的能力,可以作为桑树抗旱育种的选择依据之一。     

4个青贮玉米品种的青贮发酵品质及瘤胃降解特性的比较

为筛选出适合在苏中地区种植的青贮玉米(Zea mays L.)品种,本试验对4个青贮玉米品种进行全株青贮,比较青贮品质和瘤胃降解特性。试验结果表明：‘雅玉8号’全株玉米青贮的乳酸含量较高(P<0.05),pH值、氨态氮含量和乙酸含量低于‘扬大109’(P<0.05)。全株玉米青贮的瘤胃干物质有效降解率由高到低依次为‘康源01号’(40.98%)、‘扬大109’(39.25%)、‘雅玉8号’(37.69%)和‘牧场06号’(35.29%)。瘤胃中性洗涤纤维有效降解率由高到低依次为‘扬大109’(29.91%)、‘雅玉8号’(28.75%)、‘牧场06号’(27.12%)和‘康源01号’(21.20%)。综上所述,在本试验选取的4个青贮玉米品种中,‘牧场06号’是最适宜在苏中地区推广种植的青贮玉米品种。