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21.
以卵泡期小尾寒羊和萨福克羊为研究对象,采用免疫组织化学技术,对促凋亡基因(Bad)在生殖器官卵巢、输卵管和子宫中的表达与定位进行初步研究。结果表明,在卵巢组织中Bad基因在原始卵泡、初级卵泡和次级卵泡中呈中度着染,在三级卵泡中呈轻度着染,阳性细胞在卵泡上皮细胞和颗粒细胞中分散分布,呈轻度着染;输卵管上皮分泌细胞和部分纤毛细胞胞质中见Bad基因中等强度表达,输卵管壶腹部上皮中,Bad基因多表达于分泌细胞,纤毛细胞中有部分呈阳性且强度弱,宫管结合部、峡部和壶腹部Bad基因阳性细胞染色强度弱,均呈中度着染;子宫内膜子叶和基质中的阳性细胞数量极少,阳性细胞呈轻度着色。利用计算机图像分析技术测量小尾寒羊和萨福克羊生殖器官各组织细胞中Bad基因表达的阳性细胞率和平均光密度,结果Bad基因在这2品种绵羊组织中的表达规律大体相似,但也存在一些明显的差异:萨福克羊三级卵泡颗粒细胞Bad基因阳性细胞率显著高于小尾寒羊(P0.01);萨福克羊三级卵泡和成熟卵泡膜细胞Bad基因阳性细胞率和平均光密度均显著高于小尾寒羊(P0.01);萨福克羊子宫内膜腺体卵泡期Bad基因阳性细胞平均光密度显著高于小尾寒羊(P0.01);由此表明,小尾寒羊和萨福克羊卵泡期生殖器官中细胞凋亡的差异与Bad基因表达的差异,可能是造成两者繁殖力高低差异的基础。 相似文献
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23.
为了探索玉米胚芽粕对鹅的营养价值和不同方法、不同鹅品种对其真代谢能、常规养分利用率的差异,分别选取150日龄健康五龙鹅和青农灰鹅公鹅各24只,各设4个处理组,每个处理组6只,试验鹅单笼饲养,每天强饲120 g,采用全收粪法进行测定.结果表明,五龙鹅、青农灰鹅种内4个处理组之间真代谢能(THE)、粗蛋白(CP)、粗脂肪(EE),A基酸(AA),中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)、粗纤维(CF),it,(Ca),磷 (P)利用率差异均不显著(P>0.05).两品种之间,第2,4处理组青农灰鹅THE、CP真利用率显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于五龙鹅;第3,4处理组青农灰鹅EE利用率显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于五龙鹅.第1,3或4处理组五龙鹅NDF,CF利用率显著(P<0.05)高于青农灰鹅相应各处理组.由此可知,鹅对玉米胚芽粕的养分有较高的利用率;同品种不同处理下鹅对玉米胚芽粕的THE,常规养分利用率差异均不显著;不同品种鹅对玉米胚芽粕的养分利用率存在一定差异. 相似文献
24.
鸭瘟病毒dUTPase基因克隆、原核表达及在病毒感染宿主亚细胞中的定位分析 总被引:2,自引:0,他引:2
根据笔者实验室新发现的鸭瘟病毒(DPV)dUTPase基因(GenBank登录号DQ486149)序列设计1对引物,PCR扩增后将产物亚克隆至pET32a(+)原核表达载体,获得表达质粒pET32a-DU。然后将其转化至E.coliBL21(DE3)进行IPTG诱导表达。SDS-PAGE检测显示诱导表达蛋白约66.8ku,与预期表达蛋白大小一致。薄层扫描分析表明重组蛋白占菌体总蛋白的36.2%,主要以包涵体的形式存在。重组蛋白纯化后制备兔抗血清,间接EUSA效价为1:409600。通过免疫荧光技术进行DPVdUTPase亚细胞定位检测,结果显示最早可在感染后4h的胞质中检测到特异性荧光,12h大量点状绿色荧光聚集于胞核;24h后胞核内点状荧光减弱,而胞质点状荧光增强;48h胞核和胞质荧光均显著减弱。本研究为DPVdUTPase基因功能和DPV致病机理的研究提供了重要数据。 相似文献
25.
26.
为建立一种快速检测猪圆环病毒2型(PCV2)抗体的方法,本研究通过基因合成PCV2的Rep编码序列,将其克隆至pET-28a(+)并在E.coli中表达,表达的重组Rep蛋白经Ni2+亲和纯化.采用纯化的目的蛋白作为包被抗原,建立检测PCV2 Rep蛋白抗体的间接ELISA方法.结果表明最佳抗原包被浓度为200 ng/孔,血清和二抗最佳反应时间分别为1h和30 min.该方法具有良好的特异性和敏感性,与韩国金诺公司试剂盒的符合率为81.4%,表明建立的ELISA方法可以用于PCV2的流行病学检测. 相似文献
27.
本试验将流式细胞术应用于猪精子分析,同时检测精子功能的多个特性,以保证精子具备多种特性且功能完整,顺利完成授精过程。分别采用SYBR-14/PI(Propidium Iodide)、YO-PRO-1/PI、PNA/PI及Mito Tracker/YO-PRO-1 4种染色方法对荣昌猪精子的质膜完整性、细胞凋亡、顶体完整性及线粒体功能进行了检测和分析;以SYBR-14+/PI-表示质膜完整的活精子,YO-PRO-1-/PI-表示活精子,PNA-/PI-表示未发生顶体反应的活精子,Mito Tracker+/YO-PRO-1-表示线粒体活性高的活精子,以上述检测指标的综合结果判定精子功能的完整性。本试验通过流式细胞术对荣昌猪精子进行质量检测和分析,结果表明,该方法可为临床诊断种猪不孕症提供理论依据,对有效治疗不孕症有重要意义。 相似文献
28.
目前很多女性受到不孕不育、自然流产和出生缺陷等诸多生殖相关疾病的困扰,其主要原因为生殖细胞减数分裂异常和卵母细胞质量下降。雌激素不仅参与调控哺乳动物的发情和性行为,也参与调控卵母细胞的生长发育。雌激素受体作为类固醇激素受体的一种,在介导雌激素发挥基因组效应和非基因组效应中有着重要的作用。目前关于雌激素受体调控卵母细胞成熟的报道多集中于硬骨鱼类,特别是新型膜受体GPR30,而在哺乳动物方面的研究鲜有报道。因此作者介绍了雌激素核受体ERα、ERβ与新型膜受体GPR30的结构与分布,简述了膜受体GPR30的不同类型配体的研究进展,综述了雌激素受体在调控卵母细胞发育中的相互作用,发现雌激素的核受体与膜受体在卵母细胞成熟的过程中可能发挥不同的调控作用,并进一步阐述了雌激素及其受体在卵母细胞成熟过程中的潜在调控机制。 相似文献
29.
30.
从20世纪90年中期开始,南通地区桑园面积、蚕种发放、蚕茧产量逐年下降,南通蚕桑业的衰退已经是不争的事实。对南通桑蚕业衰退的分析众说纷纭,各执一词。要研究南通桑蚕业,首先要考察中国茧丝绸产业运行的外因,即广大发展中国家纷纷把桑蚕丝绸业作为农村的支柱产业加以扶植加剧了国际生丝价格的竞争,成为南通桑蚕业衰退的诱因;其次,比较优势衰弱和竞争优势不强,这两大内因成为南通桑蚕业衰退的主要致命点。 相似文献