奶牛隐性乳房炎病原菌的分离及药敏试验

选择某牛场50头临床健康奶牛,采用CMT法进行隐性乳房炎检测,其中28头奶牛患有隐性乳房炎,发病率为56%;在被检的200个乳样中患有隐性乳房炎的乳区84个,乳区阳性率为42%。对阳性乳样进行细菌分离鉴定,从28头患有隐性乳房炎的奶牛的84个乳样中检出13种共98个菌株,其中葡萄球菌44个,占44.90%;金黄色葡萄球菌32个,占32.65%;链球菌20个,占20.40%;大肠埃希菌11个,占11.22%。由葡萄球菌、链球菌和大肠埃希菌引起的乳房炎占整个比例的75.51%。表明引起奶牛隐性乳房炎的病原菌以葡萄球菌、链球菌和大肠埃希菌为主,而且单纯由某一种病原菌引起的病例较少,多数是由2～3种甚至是3种以上的病原菌引起,混合感染率为83.33%。药敏试验结果表明,临床使用较多的青霉素和链霉素对奶牛乳房炎的主要病原菌有较强的耐药性,而对庆大霉素、丁胺卡那霉素、环丙沙星和林可霉素等药物则较为敏感。     

多种动物血清中生物活性LH/CG的放射受体测定法(RRA)

利用绵羊卵巢黄体细胞膜作为 LH / CG受体来源 ,以放射性12 5 I- h CG作为示踪标记配体 ,以高纯度的h CG为标准品建立标准曲线 ,建立了一种有效的 LH- RRA测定方法。它能够直接检测多种动物血清中与受体结合的具有生物活性的 LH的动态变化。该法测定程序简单 ,在 2 h内完成并获得可重复性结果。测定方法的灵敏度为 0 .3ng/管 ,批内和批间误差分别为 ( 3.4 1± 3.14 ) %和 ( 8.70± 7.93) %。动物 (牛、兔、猪 )垂体液中 LH含量反应曲线和 h CG标准曲线平行良好。牛、羊、猪、兔、鼠和仓鼠血清中 LH的剂量反应曲线和h CG标准曲线的平行性表明 ,该 LH- RRA可以用来检测不同动物血清中的具有生物活性的 LH变化。回收试验表明 ,在该测定方法中加入 3、10、30 ng h CG时的回收率分别为 ( 10 0 .59± 5.55) %、( 99.55± 9.86 ) %、( 10 4 .2 8± 7.4 5) %,说明测定结果的正确性。该 LH - RRA的测定结果反映了动物正常的生理状态。本试验垂体中有活性的 LH水平远远高于外周循环中的水平 ,雌、雄动物循环血液中的 LH含量不一致。     

西咪替丁在体内对地塞米松预处理鸡免疫状态的影响

对地塞米松预处理鸡投以１０－１００ｍｇ／ｋｇ剂量的西咪替丁,进行了后者对前者作用影响的观察。结果表明：地塞米松能抑制伴刀豆球蛋白Ａ（ｃｏｎＡ）引起的鸡外周血淋巴细胞（ＢＰＬ）之ＩＬ－２活性,而西咪替丁对这种抑制作用有显著的拮抗作用;地塞米松能抑制动物对绵工细胞（ＳＲＢＣ）和牛血清白蛋白（ＢＳＡ）等２种胸腺依赖性抗原和非胸腺依赖性抗原流产布鲁氏菌（ＢＡ）的抗体应答,但这种抑制作用会因西咪替丁逆转;西     

口蹄疫病毒受体猪源整联蛋白αvβ6的细胞定位及组织分布

利用pcDNA3.1（＋）-β6p真核表达载体稳定转染CHOK1细胞,间接免疫荧光法（IFA）检测整联蛋白αvβ6在转染细胞中的表达分布。以间接免疫组化法（IHA）检测整联蛋白αvβ6在健康猪舌、唇、气管等组织的表达分布。采用抗猪源整联蛋白β6亚基的单克隆抗体作为一抗,FITC标记山羊抗小鼠IgG、辣根过氧化物酶标记山羊抗小鼠IgG分别作为二抗。结果表明,pcDNA3.1（＋）-β6p真核表达载体稳定转染的CHOK1细胞的细胞膜及细胞质内可见致密的绿色荧光（IFA）,猪舌、唇、气管等组织细胞的细胞膜及细胞质内均出现了棕黄色的特异阳性反应物,表明整联蛋白αvβ6受体广泛分布于猪体的器官组织细胞中,为深入研究整联蛋白αvβ6在口蹄疫病毒感染过程中的作用奠定了基础。     

印度南瓜与中国南瓜有性杂交亲和性研究

为提供用中国南瓜改良印度南瓜的理论依据，选用印度南瓜的3个栽培品种与中国南瓜的4个栽培品种进行人工杂交，观察其杂交亲和性表现。结果表明：印度南瓜P6，P7等品种与中国南瓜P2，P3，P4，P5等品种间存在杂交不亲和性，印度南瓜P1与中国南瓜P4，P5间存在杂交不亲和性，而与P2，P3间不存在杂交不亲和性。     

番茄酱中好氧细菌分离方法的研究

新疆番茄制品出口量占全国的90;,近年来外商对其安全卫生提出了许多技术要求,国内番茄制品生产企业也陷入番茄制品胖听、平听的技术障碍,至今国内尚无相应的微生物检测技术和标准.采用锰营养、甘露醇卵黄多粘菌素、嗜热耐酸杆菌、脂耐热嗜酸杆菌、溴甲酚紫葡萄糖肉汤、平酸菌增菌和液体硫乙醇酸盐7种液体培养基对供试番茄酱在37和55℃下培养.通过不同培养时间培养液的O.D值、pH值、菌体形态和菌落特征的研究,确定出锰营养和平酸菌增菌培养基为该类菌的最适液体培养基,嗜热耐酸杆菌和平酸菌增菌琼脂培养基为最佳固体培养基.分离出的菌株经VITEK-32生化鉴定,主要细菌分别为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)和矮小芽孢杆菌(Bacillus pumilus),均为产酸不产气可导致平酸腐败的好氧芽孢菌.     

白藜芦醇和褪黑素对绵羊胎儿成纤维细胞转染及卵母细胞体外成熟的影响

试验旨在利用白藜芦醇(Re)和褪黑素(MT)提高绵羊胎儿成纤维细胞电穿孔转染(电转)效率、优化卵母细胞体外成熟体系,以提高转基因动物生产效率。将绵羊胎儿成纤维细胞分为6组:对照组、添加白藜芦醇高、中、低(R^-5、R^-6、R^-7)3种浓度组及白藜芦醇和褪黑素联合添加组(R^-5M^-5、R^-6M^-7),通过电转效率和细胞凋亡情况确定电转体系优化方案;通过对细胞周期、线粒体膜电位及活性氧(ROS)的检测研究其作用机制。将绵羊卵母细胞分为对照组及白藜芦醇和褪黑素(R^-5M^-5、R^-6M^-7)联合添加组,通过绵羊卵母细胞体外成熟后卵丘细胞扩展、第一极体排出及体外受精胚胎的卵裂率检测其对卵母细胞体外成熟的作用。研究结果显示,分离的绵羊胎儿成纤维细胞P3代增殖旺盛,细胞生长曲线呈典型的S型;与对照组相比,所有试验组胎儿成纤维细胞的电转效率均显著提高(P<0.05),R^-5M^-5组电转效率最高;R^-6M^-7组显著降低细胞凋亡率(P<0.05),R^-5、R^-6、R^-5M^-5和R^-6M^-7组均显著促进细胞增殖(P<0.05);R^-6、R^-7、R^-5M^-5和R^-6M^-7组G1期细胞增加,S期细胞相对减少,但差异均不显著(P>0.05);R^-6、R^-7、R^-5M^-5和R^-6M^-7组成纤维细胞内ROS水平均显著降低(P<0.05),R^-6、R^-5M^-5和R^-6M^-7组线粒体膜电位均显著增加(P<0.05);R^-6M^-7组显著促进绵羊卵丘细胞扩展、提高卵母细胞第一极体排出率和体外受精胚胎发育能力(P<0.05)。综上,白藜芦醇和褪黑素可以优化绵羊胎儿成纤维细胞电转体系,提高卵母细胞体外成熟效率,为白藜芦醇和褪黑素在转基因动物生产中的应用提供参考依据。     

IPTG诱导浓度、时间对AsiaⅠ型口蹄疫病毒VP1蛋白表达的影响

将口蹄疫病毒VP1基因插入原核表达载体pET-28a中,转化至大肠杆菌BL21.用不同的IPTG浓度与不同诱导时间诱导菌株表达VP1蛋向,分析不同IPTG浓度及不同诱导时间对蛋白表达量的影响,以确定最佳表达条件.结果表明,在一定范围内,随IPTG浓度的增高,表达量并不会随之增大;而在菌体对数生长期内,随诱导时间的延长,表达量会随之增大.最后确定当IPTG浓度为3 mmol/L,诱导表达到最长时间9 h时,VP1蛋白表达量最大.     

黄土丘陵沟壑区坡面尺度上微生物的空间分布规律

通过对黄土丘陵沟壑区典型侵蚀环境下人工种植刺槐林的坡面上坡顶、坡肩、坡背、坡脚和坡趾5个不同地形部位上的微生物生物量碳、氮及微生物的代谢活性和功能多样性进行测定和分析,探讨侵蚀环境下坡面尺度上微生物的空间分布规律.研究结果发现,在侵蚀比较容易发生的坡肩位置,微生物的含量总体比较低.微生物生物量碳在坡顶、坡背和坡脚位置含量比较高,微生物生物量氮在坡顶和坡背位置含量比较高.微生物的代谢活性与微生物量没有表现出完全的一致性,0-10 cm土层表现为坡肩和坡背的微生物代谢活性最高,和这两个位置的微生物功能多样性较高比较一致,10-20 cm土样微生物功能多样性较为一致,微生物的代谢活性与微生物生物量的大小关系相对较为密切,表现为坡脚和坡背位置的代谢活性比较高.对于6种不同类型的碳源的利用,0-10 cm土壤的微生物对糖类物质的利用率最高,而10-20 cm土壤的微生物对氨基酸类物质的利用率最高.     

“大配方、小调整”施肥模式对不同地力小麦产量及经济效益的影响

为验证“大配方、小调整”施肥模式在河南省的应用效果,于 2017～ 2018年在河南省扶沟县选择 8个典型地块,分为高、中、低 3种基础地力类型。结果表明,相比不施肥处理,农民习惯处理平均增产 30.0%,但高的施肥成本,使高肥力水平下的经济效益反而低于不施肥处理。与农户习惯施肥相比,配方肥处理减少了氮素投入同时提高了磷、钾用量,不同基础地力水平下,配方肥处理与农户习惯处理在产量上没有显著性差异;但低的施肥投入使经济效益提升了 16.6%。依据土壤速效磷、钾含量的差异,在大配方的基础上对肥料配方进行小调整,小调整处理的经济效益随基础肥力的上升不断增加,较农户习惯处理增收 31.3%。不同基础地力水平下,肥料贡献率、肥料农学利用率始终表现为农户习惯 <大配方 <小调整。由此可知,“大配方、小调整”可推动区域施肥技术的进步,促进肥料产品的优化,帮助农民节本增收。