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试验旨在对猪SUMO特异性蛋白酶1(sentrin-specific protease 1,SENP1)基因CDS区进行克隆和生物信息学分析,并探讨SENP1基因在乙脑病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)感染PK15细胞后的表达情况。根据GenBank中公布的猪SENP1基因预测序列(登录号:XM_013997974.2)设计特异性引物,通过RT-PCR和T/A克隆技术对猪SENP1基因CDS区序列进行克隆测序,并进行生物信息学分析,利用实时荧光定量PCR分析猪SENP1基因在JEV感染PK15细胞不同时间点(0、12、24、36、48 h)的表达情况。结果显示,猪SENP1基因CDS序列全长2 034 bp,共编码677个氨基酸。序列比对和系统进化树分析结果表明,猪SENP1蛋白序列和山羊、犬、人、牛的相似性分别为94.8%、94.2%、93.9%和93.8%,说明在这些物种中SENP1的保守性较强;猪与犬的SENP1分子亲缘关系较近。生物信息学分析结果显示,猪SENP1蛋白相对分子质量为76 825.76,等电点为8.53,体外半衰期为30 h,不稳定系数为53.59,总平均亲水指数为-0.622。SENP1蛋白不含信号肽序列,无跨膜结构域。二级结构分析结果显示,SENP1蛋白中α-螺旋、无规则卷曲、延伸链和β-转角分别占31.31%、46.68%、16.25%和5.76%。三级结构分析结果显示,猪SENP1蛋白中存在8个α-螺旋区和7个β-转角区。实时荧光定量PCR结果显示,猪SENP1基因在JEV感染的PK15细胞中呈现上调表达趋势,其中在感染后48 h SENP1基因表达量显著高于对照组(P<0.05)。本试验结果为后续深入研究SENP1基因功能提供了参考。 相似文献
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PEG引发三倍体无籽西瓜种子萌芽研究初报 总被引:3,自引:3,他引:0
为了探索一条能大批量处理无籽西瓜种子,有效提高种子活力的途径,应用水势0、-0.2、-0.6和-1.2MPa的聚乙二醇(PEG-6000)溶液对三倍体无籽西瓜种子进行3、6、9、12h引发处理,并与常规萌发条件下的种子萌芽情况进行比较分析。结果表明:(1)各种水势的PEG-6000溶液引发对无籽西瓜种子发芽各项指标均没有显著影响。(2)3h引发处理相对于其他引发时间处理,能最大程度地提高无籽西瓜种子发芽能力,在发芽率、发芽势、发芽指数和活力指数的影响上均存在明显差异,这与常规生产上无籽西瓜浸种时间结果一致。 相似文献
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为研究水肥一体化技术中的水肥混合特性,以流体力学中的两相流理论为基础,针对水肥混合过程中混合时间、混合区间长度、流速及管径对其混合效果的影响进行相应的数值模拟研究。结果表明,混合时间及混合区间长度越长有利于提高水肥混合效果及最终水肥混合均匀性;水肥流速比较低时管内水肥混合的均匀性较好,且水肥流速越大则其混合效果及均匀性越好;水肥流速较低时输水管及输肥管的管径比对水肥混合均匀性的影响较大,两者管径比越小则混合效果越好,随着流速的提高两者管径比对其混合效果的影响逐渐减弱。 相似文献
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随着我国社会经济的发展,贫困乡镇农业机械化进程逐年提高,相应地贫困乡镇农机管理服务的地位也就愈加突出,对农机管理服务者的素质要求自然也是越来越高.但是现在贫困乡镇农业机械化生产过程中仍然存在许多问题. 相似文献
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SSR分子标记已经得到普遍应用,初学者如不能很好地掌握实验操作要点,就难以在较短时间内成功地获得试验结果.本文分别介绍了DNA提取、PCR扩增和电泳检测PCR扩增产物等实验过程中容易被忽视的注意事项,以期为普及SSR分子标记实验技术服务. 相似文献
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Yuan Yang Yu KuangYu Liu Wanyi Li Zhonghua JiangLiying Xiao Mingyuan Li 《Comparative immunology, microbiology and infectious diseases》2011,34(1):65-72
In order to develop a promising vaccine candidate utilizing a combined approach to induce both antibody production and T-cell activity, the DNA fragment containing MA of HCV with five conserved epitopes was synthesized. Two types of HCV vaccine candidates (the DNA type and DNA/polymers) were constructed using MA. PLA-PEG-PLA and PLGA-PEG-PLGA were synthesized and used as micelles with encapsulated plasmid pcDNA3.1(+)-MA. The preparation of copolymers, the cloning and analysis of recombinant plasmid DNA, in vitro expression, and immunogenicity in transgenic mice were evaluated in detail. The results indicated that even single immunization and oral immunization with DNA/polymers achieved satisfying immune responses in vivo tests. As biodegradable and nontoxic triblock copolymers, the novel copolymers demonstrated a great advantage, as they made long-term and single-immunizing vaccines possible; in addition, the copolymers showed a better adjuvant effect and scarcely any side effects. 相似文献
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