猪瘟病毒C株检测用国家核酸标准物质的研制

为研制均匀、稳定的猪瘟病毒（CSFV）核酸标准物质,选择CSFV C株接种于PK-15细胞并收获病毒液,然后经过病毒灭活、分装、冻干,最终形成核酸标准物质。用微滴式数字PCR对制备的CSFV标准物质进行均匀性和稳定性评估、标准物质合作定值,在评定不确定度后计算得出最终量值结果,并开展临床试用。结果显示,该标准物质均匀,4 ℃条件下可稳定存放4周,25 ℃可稳定存放1周,-20 ℃可稳定存放11个月,量值结果为（5.1±0.7）×105 copies/mg;临床试用显示,所制备的标准物质与临床样本的互通性良好。本研究制备的CSFV C株国家核酸标准物质均一性良好、稳定、量值准确度高,并通过了全国标准物质管理委员会评定,可用于动物及动物产品质量安全检测,从而有效保障猪瘟防治工作的开展。     

产蛋下降综合征（EDS－76）病毒DNA探针的制备及应用研究

用纯化的产蛋下降综合征（ＥＤＳ－７６）病毒（Ｈ９１毒株）悬液提取的核酸，经琼脂糖凝胶电泳只出现１条分子量较大、背景清晰的核酸带。用ＢａｍＨＩ酶消化产生４个片段，大小分别为１７ｋｂ、１０ｋｂ、４．０ｋｂ和２．０ｋｂ。将其中的２．０ｋｂ片段克隆进ｐＵＣ１８ＤＮＡ载体中，重组质粒ＤＮＡ用ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记作为ＤＮＡ探针，在ｄｏｔｂｌｏｔ中该探针不与鹅胚尿囊液核酸抽提物、马立克氏病病毒（ＭＤＶ）ＤＮＡ、鸡传染性贫血病毒（ＣＡＶ）ＤＮＡ、ＳＰＦ鸡基因组ＤＮＡ等核酸反应，只与３株ＥＤＳ病毒（ＥＤＳ标准毒株ＡＶ－１２７、ＥＤＳＨ９１毒株和从健康鹅体中分离的ＥＤＳＹ８１毒株）ＤＮＡ呈阳性反应。人工感染产蛋母鸡和雏鸡后２４ｈ即可用该探针从泄殖腔棉拭子样品中检测出ＥＤＳ病毒ＤＮＡ，在感染后３５ｈ仍能从部分感染鸡样品中检出。对部分探针检测阳性鸡的泄殖腔棉拭子样品用ＳＰＦ鸡胚分离病毒，并用ＨＡ和ＨＩ试验检测分离病毒的特异性；在感染过程中，同时检测了血清中ＨＩ抗体的消长情况。结果表明，人工感染鸡排毒至少可以维持２个月左右，而且血清中ＨＩ抗体即使很高，也不能阻止感染鸡的排毒。     

用大肠杆菌K99和F41菌毛抗原检测牛血清抗体的琼脂扩散试验的研究

用含２ｍｏｌ／Ｌ尿素的磷酸盐缓冲液以热处理方法提取的Ｋ９９和Ｆ４１菌毛作为抗原,对琼脂扩散试验方法进行研究。结果表明本试验方法简便,特异性强,敏感性高,可用于血清抗体检测;所制备的抗原稳定、重复性好。     

正安县山羊主要疫病血清抗体检测报告

为了解正安县山羊主要疫病的发展趋势,通过虎红平板凝集试验、正向间接血凝试验、酶联免疫吸附试验等方法对正安县引进山羊进行布鲁氏杆菌病、O型口蹄疫、AsiaI型口蹄疫、山羊传染性胸膜肺炎、山羊痘等主要疫病血清抗体的检测。结果表明,O型口蹄疫、AsiaI型口蹄疫和山羊痘免疫抗体阳性率分别为79．42％、81．18％和99．58％,未免疫的布鲁氏杆菌病、羊传染性胸膜肺炎的丝状支原体山羊亚种和绵羊肺炎支原体未免疫抗体阳性率分别为0％、0％和3．81％。监测结果为山羊健康的引进、培育和扩繁提供了一些基础数据,对指导养羊生产有一定的意义。     

实验性雏鸡佝偻病的病理学研究——Ⅱ.形态学观察

4日龄 Aiboi Acies肉鸡健雏80只随机分为4组,分别喂给钙-磷缺乏(Ca 0.02％,P0.30％)、缺钙(Ca 0.02％,PO.71％)、缺磷(Ca 0.95％,PO.30％)和正常对照(Ca 0.95％PO.71％)日粮三周,进行了系统的病理形态学观察。缺磷组病变表现为肋骨头肿大,长骨骨骺生长板之肥大带明显增宽,骨小梁减少;缺钙组和钙-磷缺乏组病变表现为肋骨增粗弯曲,长骨骨骺生长板之增生带显著增宽,海绵骨类骨组织和结缔组织大量增生,成骨细胞和破骨细胞丰富。结果表明,钙缺乏和磷缺乏所致病变显著不同,为鉴别诊断提供了科学依据。     

仔猪肠道微生物代谢产物及益生菌的调控作用

近年来,肠道微生物组成及其代谢产物与宿主生理之间的互作关系成为当前动物营养研究的热点。研究表明,肠道微生物的代谢产物是影响宿主生理的关键执行者,肠道微生物具有调节宿主代谢、免疫、生长发育等作用。本文系统地综述了仔猪肠道微生物组成、代谢产物种类和功能,以及益生菌对仔猪肠道微生物的影响,以期为仔猪营养调控和肠道微生物的研究提供科学依据。     

浅析我国犬业发展面临的问题及对策

在人类文明的发展史中,犬伴随人类的生产、生活己有着悠久的历史。近年来,随着我国社会经济的发展,犬业的规模化、体系化和产业化迅速发展。农村养犬已从过去以看家护院为目的向养殖业的方向发展：中小型玩赏犬则是许多城市居民心爱的伴侣宠物;工作犬在各个领域发挥着极其重要的作用;实验犬在生命科学的研究中也作出了特殊的贡献。     

桑蚕摘除部分感觉器对人工饲料摄食性的影响

桑蚕摘除了触角,下颚须或下颚瘤状体后,对人工饲料的摄食性均显著提高,摄食性个体差异减小,对桑叶或人工饲料正趋性强的个体,其摄食性较高,人工饲料中不仅存在蚕的味觉有明显抑制作用的物质,也存在对嗅觉有忌避作用的成分,嗅觉在决定对人工饲料摄食性方面具有重要作用。     

刈割扰动下半干旱区豆科牧草种间关系的反应

以苜蓿和沙打旺根据生物替代设计组成的简单混播种群为对象,通过调查2种牧草在刈割扰动下的生长反应,比较了单混播处理条件下3种播种密度刈割处理的种间关系和补偿性反应特点,探讨了种群稳定与演替的可能机制。结果表明苜蓿和沙打旺在刈割条件下,土壤水分利用竞争空间上移 20 cm,并且水分利用呈增加趋势,土壤平均水分为15%。刈割诱导低密度混播处理和高密度苜蓿单播处理土壤水分最高,分别达15.6%和15.8%。单播下,刈割可诱导中高密度单播沙打旺处理产量分别增加33%和29%,而混播方式下,刈割均导致沙打旺和苜蓿株高、分枝数和地上部生物量小于对照。在刈割干扰下,相比对照,苜蓿与沙打旺两者仍然为资源共享关系,但互利共生程度下降了21%,而混播种群中苜蓿对沙打旺的相对竞争力增加了17%。不论单播还是混播,刈割均可引发2种牧草显著的补偿机制。同时发现刈割干扰可激发更强的自疏作用。2种牧草的生长指标呈下降趋势可能是干旱、刈割和种间竞争或化感协同胁迫作用的结果,但共存与补偿机制有利于减缓这种负面效应。沙打旺和苜蓿的更新补偿时间上的异质性,实现资源利用生态位的分离,从而调控着2种牧草组成的种群稳定性,这对理解生物多样性维持机制具有重要的参考意义。     

Mitochondrial dysfunction influences apoptosis and autophagy in porcine parthenotes developing in vitro

Mitochondria are important regulators of both apoptosis and autophagy. One of the triggers for mitochondrial-mediated apoptosis is the production of reactive oxygen species (ROS), which include hydrogen peroxide, superoxide, hydroxyl radical, nitric oxide and peroxynitrite. Recently, several studies have indicated that ROS may also be involved in the induction of autophagy. In the present study, we used H(2)O(2) to induce mitochondrial stress, examined apoptotic- and autophagic-related gene expression and observed LC3 protein (autophagosome presence marker) expression in porcine parthenotes developing in vitro. In porcine four-cell parthenotes cultured for 5 days in NCSU37 medium containing 0.4% BSA, the developmental rate and mitochondrial distribution did not differ from that of the group supplemented with 100 μM H(2)O(2) but was significantly decreased in the group supplemented with 500 μM H(2)O(2) (P<0.05). Transmission electron microscopy (TEM) indicated that whereas normal shaped mitochondria were observed in blastocysts from the control group, abnormal mitochondria (mitophagy) and autophagic vacuoles were observed in blastocysts from the group that received 500 μM H(2)O(2). Furthermore, addition of H(2)O(2) (100 μM and 500 μM) decreased cell numbers (P<0.05) and increased both apoptosis (P<0.05) and LC3 protein expression in the blastocysts. Real-time RT-PCR showed that H(2)O(2) significantly decreased mRNA expression of anti-apoptotic gene Bcl-xL but increased pro-apoptotic genes, Caspase 3 (Casp3) and Bak, and autophagy-related genes, microtubule-associated protein 1 light chain 3 (Map1lc3b) and lysosomal-associated membrane protein 2 (Lamp2). However, the addition of H(2)O(2) had no effect on mRNA expression levels in nuclear DNA-encoded mitochondrial-related genes, cytochrome oxidase (Cox) 5a, Cox5b and Cox6b1, in blastocysts. These results suggest that H(2)O(2) leads to mitochondrial dysfunction that results in apoptosis and autophagy, which is possibly related to porcine early embryo development.