甘蓝型油菜一个代表性核心种质的遴选

【目的】分析甘蓝型油菜的遗传多样性,遴选核心种质。【方法】将来自欧洲、亚洲、加拿大、澳大利亚和中国几个不同地区的甘蓝型油菜500余份,按照其品质特点、地理位置、生长习性分组并按比例取样,建立由87个品种组成的预选核心种质。采用EST-STS标记和SSR标记对其进行分析,剔除遗传冗余,选出代表该500余份资源的核心种质并进行分子标记多样性评价和表型特征分析。【结果】在相同的选择背景下,EST-STS和SSR 标记的多态性检出率相仿（39%～40%）,每对EST引物与SSR引物产生的多态性条带相近。聚类分析在遗传相似系数0.65处把87个品种分成中国和国外油菜两个类群,进一步在约0.70处类群Ⅰ和类群Ⅱ又分别产生中国“双低”、中国“双高”以及欧洲冬油菜和欧洲春油菜各两个亚组。根据遗传多样性分析,剔除遗传相似系数大于或等于0.85的遗传冗余,获得78个品种的核心种质。【结论】EST-STS是一种经济、有效具有功能信息的分子标记,功效与普通SSR标记相仿;遗传多样性和聚类分析结果为甘蓝型油菜4个组的划分提供了依据;78个品种组成的核心种质保留了预选核心种质的遗传多样性和结构,可作为本研究中500余份品种资源的核心种质加以利用和保存。     

犬α1干扰素在毕赤酵母中的分泌表达及其抗病毒活性研究

亚克隆犬α1干扰素(CaIFN-α1)成熟蛋白编码基因并克隆到表达载体pPICZα-A,构建转移重组载体pPICZα-A-CaIFN-α。pPICZα-A-CaIFN-α经SacⅠ酶切线性化后电转化导入毕赤酵母菌株X-33。转化子经PCR分析鉴定后利用甘油增菌和甲醇诱导,实现了CaIFN-α1在毕赤酵母系统中的分泌表达。SDS-PAGE检测结果表明表达产物相对分子质量约为2.7×104,比其推导结果(约1.9×104)大,推测可能是发生了糖基化。酵母分泌表达的CaIFN-α1具有较高的抗病毒活性,约为1.45×106U·mL-1,蛋白含量约为96mg·L-1,比活性为1.49×107U·mg-1。重组CaIFN-α1的生物学活性具有较强的种属特异性,在犬肾细胞(MDCK)上具有很高的抗病毒活性,在鸡胚成纤维细胞上活性较低,而在猫肾细胞(F81)和牛肾细胞(MDBK)上几乎没有抗病毒活性。进一步研究发现,重组犬α1干扰素对犬瘟热病毒和伪狂犬病毒在犬肾细胞中的增殖具有显著抑制作用。     

全乳添加小麦粉对荷斯坦公犊牛的屠宰性能及肉质的影响

对初生体重相近的20头荷斯坦公犊全乳饲喂至35日龄后,随机分为继续饲喂全乳的对照组和全乳中添加2%、4%和6%小麦粉的试验组,至90日龄进行测定,研究了对荷斯坦公犊的屠宰性能和肉质的影响.结果表明:在全乳中添加小麦粉可显著提高荷斯坦公犊的宰前活重、胴体重、净肉重、胴体产肉率和眼肌面积(P＜0.05),提高了肌肉的嫩度和脂肪含量(P＜0.05),且屠宰性能与肉质的改善效果随着小麦粉添加比例的增加而提高.因此,全乳中添加6%以内的小麦粉,既提高了屠宰性能,又能改善肉质.     

‘中梁22号’小麦抗条锈基因的遗传分析

采用常规杂交方法,以陇南重要小麦生产品种‘中梁22号’作母本,感病品种‘铭贤169’作父本进行杂交,在F2代材料苗期分别接种条锈菌单孢菌系‘条中32号’、‘水14’、‘水7’和‘水4’.抗性遗传结果表明:对‘条中32号’,F2代植株抗感分离比为24∶390,符合理论比1∶15;对‘水14’,F2代植株抗感分离比为46∶341,符合理论比9∶55;对‘水7’,F2代植株抗感分离比为190∶225,符合理论比7∶9;对‘水4’,F2代植株抗感分离比为212∶151,符合理论比9∶7,经卡方测验上述结果均符合理论结果.据此推知‘中梁22号’对‘条中32号’的抗性由2对隐性抗性基因控制,‘水14’由2对显性抗性基因和1对隐性抗性基因控制,‘水7’由2对隐性互补抗性基因控制,‘水4’由2对显性累加抗性基因控制.     

树莓的组织培养快繁研究

为了建立树莓的组织培养快繁体系,研究了不同激素浓度培养基对树莓侧芽分化增值、伸长及生根的影响。结果表明:最适宜的分化培养基配方为MS+KT0.5mg/L+IAA0.5mg/L;伸长效果最好的培养基配方为MS+6-BA0.5mg/L+IAA1.0mg/L;生根效果最好的培养基为1/2MS+NAA0.2mg/L。     

蒺藜苜蓿小G蛋白MtROP9基因的克隆与表达分析

【目的】对蒺藜苜蓿ROP基因进行克隆与表达分析,为深入研究ROP基因在豆科植物与根瘤菌共生互作过程中的功能提供理论依据。【方法】依据拟南芥11个ROP保守序列特征和蒺藜苜蓿数据库信息,同源克隆蒺藜苜蓿的MtROP9基因,采用生物信息学方法对该基因序列进行分析,并采用半定量RT-PCR法,对MtROP9基因在蒺藜苜蓿不同组织及根瘤菌侵染后不同时间根系中的表达水平进行检测。【结果】从蒺藜苜蓿根系中克隆到了MtROP9基因的cDNA序列,全长为947 bp,编码209个氨基酸。序列分析表明,MtROP9具有ROP蛋白典型的结构特征,并与拟南芥AtROP9、水稻OsRac2、葡萄VvROP9、玉米ZmROP6和ZmROP7具有高度的相似性。MtROP9基因具有一定的时空表达特性,在根系和花中表达水平较高,在茎和根瘤中表达水平相对较低,在叶中几乎不表达。在蒺藜苜蓿与根瘤菌共生互作的早期,MtROP9基因能够被根瘤菌侵染诱导表达,在根瘤菌诱导处理不同时间的根系表达水平不同。【结论】克隆了蒺藜苜蓿小G蛋白MtROP9基因。MtROP9基因可能参与了豆科植物与根瘤菌共生互作早期信号的调控。     

药用植物刺山柑茎段组织培养研究

以药用植物刺山柑初秋茎段为外植体,研究了不同灭菌时间对刺山柑无菌外植体建立的影响及不同激素、不同浓度组合对刺山柑丛生芽的诱导、增殖、壮苗和生根的影响.结果表明:外植体灭菌采用0.1;升汞消毒8 min效果最佳,其污染率和死亡率分别为5.6;和6.3;;诱导丛生芽的最适培养基为MS+6-BA 0.6 mg/L,其侧芽萌发率可达90;;增殖的最佳培养基为MS+6-BA 0.6 mg/L+IAA 0.2 mg/L,其增殖倍数可达到4.5倍;壮苗培养基以MS+NAA 0.2 mg/L+GA3 0.2 mg/L效果较好,长势比较旺盛,平均株高、平均芽数均较高;诱导生根的最佳培养基为MS+IBA 0.5 mg/L+0.1;活性炭,生根率达65;,基部几乎无愈伤,且根数较多.     

猪繁殖与呼吸综合征病毒NJ-a株ORF6基因的表达及特异性抗体的制备

根据GenBank公布的猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)VR2332 株的核酸序列设计并合成1对特异性引物,用RT-PCR方法扩增PRRSV NJ-a株ORF6基因,将其连接入pMD18-T载体,经测序后克隆入原核表达载体pET-32a( )上,构建原核表达载体pET-ORF6.阳性质粒转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),经异醛-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,PRRSV ORF6基因获得表达.以纯化的重组蛋白为抗原免疫家兔3次,获得抗PRRSV NJ-a株M蛋白的特异抗体.经Western-blotting证明,该多克隆抗体既能与原核表达的重组M蛋白发生反应,又能与PRRSV发生特异性反应;间接免疫荧光结果表明,获得的多克隆抗体与表达PRRSV M蛋白的293T细胞及感染PRRSV的Marc-145细胞发生反应.兔抗PRRSV NJ-a株M蛋白特异性抗体的获得,为进一步研究PRRSV M蛋白的表达和功能奠定了基础.     

采收机不同振动强度采收对枸杞树光合系统参数的影响

分别于2008年的6月22日、7月11日、8月5日、10月12日（其中6～8月为夏果期,10月为秋果期）,按3个处理（采收机采收,T1、T2、仍振动强度依次增大）和对照（熟练工人工采摘）分别采收枸杞,研究枸杞采收机不同振动强度采收对枸杞树的光合系统参数的影响。结果表明：对照和各处理的净光合速率（砌）变化规律为7月中旬以前逐渐降低,7月中旬达到最低点,此后开始上升,至8月份达到一个新的高度,随后又开始下降,与枸杞树物候期分析结果一致。蒸腾速率（Tr）、气孔导度（Gs）的变化趋势与Pn一致。6～8月胞间CO,浓度（Ci）的变化趋势与Pn一致,但在10月明显升高。方差分析表明,各处理在各测定时期的Pn、Tr、Gs、Ci与对照相比差异不显著,说明采收机采收对枸杞树叶片的光合系统参数没有显著影响。光合系统参数的相关性分析表明,Pn和Cs、Tr具有较强的相关性,同时Gs和Pn、Tr也具有较强的相关性,说明光合速率和蒸腾速率的高低受气孔影响很大。在6～8月,Pn和Gi具有较强的正相关性,与气孔限制值Ls（Ls=1—Ci／Ca,Ca为空气中CO2浓度）有较强的负相关关系。夏果期（7月16日）光合速率的降低伴随着胞间CO2浓度的降低和气孔限制值的增大,光合速率的下降为气孔因素。秋果期（10月14日）光合速率降低,而胞间CO2浓度升高,表明光合速率降低为非气孔因素,是叶片的光合功能下降所致。     

鲁禽B1、B3系麻鸡体尺及屠宰性能的比较分析

本试验以120日龄鲁禽B1系、B3系专门化品系为研究素材,测定其屠宰性能和体尺性状,分析各性状间的相关性,并对部分指标进行产品质量分级。结果表明：除胸肌率外,鲁禽B3系在各项屠体指标和分割性状上都高于鲁禽B1系,其中品系间活重、半净膛重和全净膛重差异显著（P〈0．05）,半净膛率差异极显著（P〈0．01）。产品质量分级结果表明,鲁禽B3系的全净膛率、腿肌率和鲁禽B1系的全净膛率均高于GB／T19676—2005规定的一级标准,两品系的胸肌率和B1系的腿肌率略低于一级标准而远高于二级标准。鲁禽B3系麻鸡的各项体尺指标均高于鲁禽B1系,其中品系间龙骨长差异显著（P〈0．05）,体斜长和胸深差异极显著（P〈0．01）。相关分析结果表明,各屠宰指标和体尺指标间呈中度或高度表型正相关,相关系数在0．354～0．992之间。