稳定表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的CHO-K1细胞系的建立及免疫原性分析

建立高表达PCV2-Cap蛋白的CHO-K1悬浮稳转细胞系,鉴定蛋白的免疫原性,为开发新型且有效防治猪圆环病毒的亚单位疫苗奠定基础。构建重组质粒pEE12.4-PCV2-Cap,转染CHO-K1细胞,通过加压筛选,有限稀释,细胞悬浮驯化及Western blot检测得到高表达Cap蛋白的悬浮稳转单克隆细胞株,并对该细胞株进行发酵,纯化得到的目的蛋白,通过小鼠免疫验证其免疫原性。结果表明PCV2-Cap蛋白能够在CHO-K1细胞中正确表达;发酵过程中活细胞密度高达6×10~6个·mL^-1,细胞活力在80%以上,PCV2-Cap蛋白表达量约为370 mg·L^-1;利用间接ELISA检测小鼠免疫后血清中的抗体水平,证明了利用CHO-K1细胞生产的Cap蛋白具备良好的免疫原性。本研究成功构建了表达PCV2-Cap蛋白的CHO-K1悬浮稳转细胞系,并进一步对目的蛋白进行免疫原性分析,为猪圆环病毒亚单位疫苗的开发打下扎实的基础。     

动物源大肠杆菌超广谱β-内酰胺酶与头孢菌素酶基因型分析

为了解重庆地区动物源大肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)及头孢菌素酶(AmpC)基因型的分布,利用初筛及表型确认方法,从临床分离的192株仔猪白痢大肠杆菌、65株奶牛乳腺炎大肠杆菌、69株鸡大肠杆菌中筛选出19株产ESBLs、6株产ArnpC酶大肠杆菌,并应用PCR扩增及PCR产物测序方法进行ESBLs及AmpC基因型分析.结果显示,重庆地区动物源大肠杆菌携带TEM型、CTX-M型、DHA-1型和CMY-2型基因的阳性率分别为2.15%、5.21%、0.61%和0.61%.其中,有5株同时携带2种基因.而DHA-1型基因为国内兽医临床首次检出,获得GenBank登录号为FJ386455.结果提示,重庆地区以TEM型和CTX-M型β-内酰胺酶为主,且产ESBLs与AmpC酶大肠杆菌为多重耐药菌株,需引起兽医临床的高度重视.     

蝴蝶兰幼嫩花梗组织培养和快速繁殖

以蝴蝶兰(Phalaenopsis amabilis)幼嫩花梗获得的无菌苗的茎尖为外植体,通过在MS和1/2 MS培养基中加入不同质量浓度的6-BA、NAA、TDZ和2,4-D来筛选最佳培养基配方,从而初步建立蝴蝶兰的组织培养再生体系.结果表明,花梗用0.1%升汞消毒15 min效果最好.花梗腋芽启动培养基为1/2 M...     

鸡脑脊髓炎高免卵黄抗体的制备及治疗试验

鸡脑脊髓炎是由鸡脑脊髓炎病毒引起的主要侵害雏鸡的一种传染病 ,其主要特征是共济失调 ,头颈部震颤和非化脓性脑炎 ,近年来河南许多鸡场有本病的发生 ,为找到本病的有效治疗措施 ,我们开展了此项研究 ,报告如下。1　材料与方法1 .1　试验鸡　选择健康蛋用鸡 50只 ,经检查没有白痢等垂直传播的疾病 ,由郑州牧专微生物教研室饲养。1 .2　疫苗　鸡 AE弱毒苗 ,购自河南兽医防治站 ,鸡AE油乳剂灭活苗 ,由郑州牧专微生物教研室自制。1 .3　鸡 AE琼扩抗原及阳性血清　由郑州市畜牧工作总站提供。1 .4　试验鸡免疫　一免 ,每只鸡分别肌注 AE弱…     

脂肪细胞膜免疫技术研究进展

脂肪细胞膜免疫技术是从以动物脂肪细胞膜分离得到的膜蛋白作为抗原,通过被动免疫或主动免疫来破坏脂肪细胞,使脂肪组织中的细胞数量减少,限制其贮存脂肪的能力,从而达到调控动物生长和降低动物脂肪的目的。本文将对脂肪细胞膜蛋白抗体的制备、作用机制及在动物上的使用效果进行阐述,并对此技术尚需解决的问题和发展方向进行综述。     

乙酸镁对氟烷基因杂合子育肥猪肌肉加工品质的影响

育肥猪屠宰前饲粮中短期添加乙酸镁,研究其对氟烷基因杂合子育肥猪肌肉加工品质的影响。选用体重相近的氟烷基因杂合子(HalNHaln)大长猪(大白猪×长白猪)36头随机分为2组,即对照组、乙酸镁组,每组18头。乙酸镁组在屠宰前5 d,基础日粮中添加镁1 500mg/kg(以乙酸镁形式),对照组饲喂基础日粮。试验表明:在猪屠宰前饲粮中短期添加1 500 mg/kg水平的镁对试验猪的平均日采食量没有明显影响(P>0.05);可以显著降低肌肉的滴水损失(P<0.05),提高猪肉的熟肉率,从而提高猪肉的加工品质。     

植物生长延缓剂在草坪上的应用

综述了植物生长延缓剂的分类以及对草坪草生长发育、抗逆性及草坪杂草的影响.总结得出,植物生长延缓剂可有效降低草坪草的植株高度,促进分蘖,增加绿度,提高草坪草的抗逆性,但对根系生长的影响和杂草的控制尚存在争议.     

本土草种子生产技术

按照种子生产的基本流程,分析了本土草种子生产各个环节容易出现的问题,提出了本土草种子生产的基本原则和注意事项,为研究草种子生产的当前状况及未来市场发展趋势提供参考,同时对本土草种子生产、管理、经营提供相关的技术指导.     

肥育后期添加维生素E、吡啶羧酸铬对肥育猪肉品品质的影响

主要研究了维生素E、吡啶羧酸铬对于肥育猪肉品品质的影响效果.试验将45头体重80 kg左右二元杂交猪（杜长）,随机分配到对照组和试验组,共分为3组,每组设3个重复,每个重复5头猪.结果表明,维生素E对于肉色、滴水损失、肌乳酸、肌糖原、挥发性盐基氮具有明显的改善作用,而对于大理石花纹评分、pH值、肌内脂肪的作用效果不明显.吡啶羧酸铬对于肉色、肌乳酸、挥发性盐基氮具有明显的改善作用,而对于大理石花纹评分、pH值、肌内脂肪、肌糖原的作用效果不明显,对于滴水损失还有不利的影响.     

水分管理方式对香根草生长发育的影响

对四种不同的水分管理条件下香根草生长研究发现：香根草最适宜在土壤水分饱和的湿润环境中生长,这时它的成活率最高,分蘖速度最快,植株高度生长也最快,定植后3个月,其对应的根体积、根干生物量、茎叶干生物量和根茎比也最高。