水貂犬瘟热病毒核衣壳基因TaqMan荧光定量PCR方法的建立

为了建立快速检测水貂犬瘟热病毒的TaqMan荧光定量PCR方法,试验根据犬瘟热病毒核衣壳蛋白基因的保守区域设计一对特异引物和探针,优化体系反应条件,并进行敏感性试验、特异性试验、重复性试验和水貂外周血淋巴细胞感染犬瘟热病毒后的检测。结果表明:建立的TaqMan荧光定量PCR检测方法最低检出量为3.96个拷贝;与水貂细小病毒、水貂阿留申病毒均无交叉反应;批内重复和批间重复循环阈值(Ct)变异系数均小于1%;应用该方法可成功检出水貂外周血淋巴细胞中的犬瘟热病毒。说明建立的检测方法敏感性、特异性、重复性好,可以用于水貂犬瘟热病毒的临床检测。     

茶文化内涵与在高校英语教学中的具体运用研究

在高校英语课堂教学中加入中华丰富多彩的茶文化,不仅丰富了物质和精神方面的基本内涵,也进一步创新了教学方面更加多样化的理念以及表达形式,同时又增强了今后学生在进行跨文化交流时的交际能力,因此为了进一步实现英语教学与茶文化两者间的深入融合,就需要从教学体系、理念以及实践活动这三个方面来进一步完善茶文化在英语课堂教学中的运用...     

铁皮石斛复合饮料的研制

以铁皮石斛鲜条为主料,枳椇、葛根、枸杞等为辅料,通过单因素和正交试验筛选铁皮石斛复合饮料的配方,并对复合饮料的多糖、氨基酸及矿质元素含量进行测定。结果表明,铁皮石斛复合饮料的最佳配方为:每400 m L铁皮石斛提取液,添加枳椇提取液20 m L、葛根提取液20 m L、枸杞提取液30 m L、白砂糖70 g·L-1、柠檬酸0.3 g·L-1、黄原胶0.02 g·L-1,在25 MPa压力条件下先后均质2次,8 min/次,蒸汽杀菌20 min。制得的复合饮料多糖含量达3 770 mg·L-1,氨基酸总含量达384.39 mg·L-1,矿质元素总含量达184.93 mg·L-1,色泽呈青绿色,具有铁皮石斛和枳椇的清香,口感顺滑细腻,是一款风味独特、成分丰富的新型复合饮料。     

植物FtsZ基因家族生物信息学分析

FtsZ (Filamentous temperature-sensitive protein Z)蛋白是一种高度保守的细菌和真核生物微管蛋白的同系物,在许多植物和藻类物种中存在,是质体分裂复合体的基本组成部分,在植物生长发育中发挥重要作用。本研究在一种藻类植物(红藻)、一种苔藓植物(小立碗藓)、两种单子叶植物(水稻和高粱)、四种双子叶植物(木薯,拟南芥,蓖麻和毛果杨)中共鉴定出21个Fts Zs成员,分析了其蛋白理化性质、二级结构、三级结构,预测了保守碱基、FtsZs成员的亚细胞定位、蛋白磷酸化位点并且构建了系统发育进化树。结果显示,FtsZs的脂肪系数、不稳定系数和总平均亲水性等理化性质存在很大的差异。FtsZ蛋白家族均不具跨膜结构域,也不含有信号肽;蛋白的二级结构主要是无规则卷曲和延伸链;保守基序分析发现,植物FtsZ家族基因在进化上是相对保守的;FtsZs成员的亚细胞定位分析发现,Fts Zs分布在叶绿体和细胞质中。本研究可为FtsZ基因家族成员的生物学功能研究提供理论基础。     

浙江省重点地区猪粪中重金属含量及安全施用评估

【目的】 浙江的规模养殖集中度高,畜禽排泄物资源化利用率达96%以上,通过堆肥和制作有机肥还田是主要的消纳途径,因此粪便中的重金属含量影响土壤安全及作物的生长。饲料是猪粪重金属最主要的来源,因此,本研究检测了浙江省猪饲料和排泄物中的重金属,为作物施用的安全性评价提供基础数据。 【方法】 采集35家不同规模养殖场的仔猪、生长猪和育肥猪3个阶段饲喂的饲料和粪便样本共566个,采用干灰化法、高压消解法消解,用AAS、AFS、ICP-MS法分析了铁、铜、锰、锌、砷、铅、铬、镉和汞9种重金属含量。 【结果】 1) 粪便中8种重金属平均含量趋势为Zn > Cu > Mn > As > Cr > Pb > Cd > Hg,主要残留元素为Zn、Cu、Mn和As,按干物质计其平均值分别为2405、1288、528和28.2 mg/kg,变异系数 ( CV) 分别为83%、34%、6%和15%。猪粪中Cr、Pb、Cd元素含量较低,在0.29～3.52 mg/kg之间,Hg含量仅3.97 μg/kg。猪粪中重金属含量仔猪阶段趋高,育肥猪阶段趋低,各个阶段变异都较大,变异系数CV值介于21%～112%之间,显示各地的生猪饲养中微量元素添加还比较混乱。2) 饲料有机砷的使用存在明显区域差异,萧山地区占72.7%的饲料样本在各阶段猪饲料中均添加有机砷,衢州地区的占33.3%,两个地区各有1家养殖场未使用有机砷。猪粪中54.9%样本砷含量 > 15 mg/kg,16.9%样本砷含量 > 50 mg/kg,2.8%的粪便砷超过70 mg/kg。3) 按畜禽粪便安全使用准则进行判定,69.9%猪粪铜超标,16.9%猪粪砷超标。按有机肥料标准进行判定,猪粪中54.9%样本砷含量超标。按照饲料中金属元素在粪便中的浓缩率:Fe、Zn、Cu为7～10倍,锰约为3倍,当前饲养水平下,Fe、Zn、Cu元素存在过量添加。4) 以浙江全省旱地单位面积承载量估算,当前能消纳猪粪中Zn、Cu的排放,但当每公顷猪粪施用量超过2.27 t (干计) 时,局部地区重金属就有累积风险。 【结论】 应降低猪饲料中微量元素的添加量,禁止饲用有机砷制剂,才能有效降低猪粪施用所导致的重金属污染;按照目前监测猪粪肥重金属元素含量水平,有机肥的施用量用应控制在2.27 t/hm2 (干基) 以内,以防止对土壤造成污染。      

基于PARMS技术的抗稻瘟病基因Pigm分子标记的开发

【目的】建立抗稻瘟病基因Pigm的荧光分子标记,为抗稻瘟病水稻品种分子育种提供简便、可靠的基因分型检测方法。【方法】利用抗稻瘟病基因Pigm基因序列与其等位基因Pi2、Pi9及感病品种日本晴中等位基因序列差异,结合PARMS技术(Penta-primer amplification refractory mutation system),建立Pigm基因的荧光分子标记。【结果】利用荧光分子标记PM-Pigm对48份水稻亲本材料进行检测,仅在谷梅4号中检测到Pigm荧光信号,并采用广西收集到的两个稻瘟病菌株ZB1和ZB13对48份水稻亲本进行了苗瘟抗性鉴定,验证分子标记有较强可靠性。【结论】Pigm荧光分子标记PM-Pigm能快速检测水稻是否包含Pigm抗性基因,为抗稻瘟病水稻分子标记辅助育种提供简便、可靠的基因筛选技术。     

二斑叶螨的生物防治研究进展

二斑叶螨是一种重要的世界性害螨,常年造成多种经济作物的减产和品质降低。近些年,虽然合成杀螨剂广泛地使用于二斑叶螨的防治,但同时生物杀螨剂的使用也在逐年增加,因为其对环境和非靶标生物的无害性以及可预防靶标生物产生抗性等。因此,使用生物制剂将成为一种具有潜力的替换方式用于二斑叶螨的防治,基于此,综述了目前具有杀螨活性的生物制剂的研究,包括捕食性天敌、植物源产物和微生物制剂,并对其中的出现的问题进行分析和讨论,以期为今后二斑叶螨的防治研究奠定一定的理论基础。     

种植密度和施肥量对“达薯1号”产量的影响

达薯1号为达州市农业科学研究院于2012年选育的马铃薯新品种,是达州市马铃薯主推品种之一。对达薯1号的种植密度和施肥量进行了试验研究,结果表明:不同种植密度和施肥量对达薯1号产量影响显著,以A2B3处理(即种植密度为6 064株·667m~(-2)、复合肥施用量为90 kg·667m~(-2))最优,其产量、出苗率、商品性都居高。     

两个杂交糯高粱新品种通过田间鉴定

<正>近日,由重庆市农科院特色作物研究所和四川省农科院水稻高粱研究所联合选育的2个高粱新组合"45A/R882"和"13163A/20982R",通过了重庆市农作物品种审定委员会组织的专家田间现场技术鉴定。通过实地考察院特作所设在永川区五间镇的高粱种植基地的2个高粱新组合的田间生长情况,并经过挖方测产和听取选育工作情况汇报、审阅相关技术资料与充分讨论后认为:两个高粱新     

人gp130-IL-12Rβ2胞外段融合蛋白基因克隆及真核表达载体的构建

目的 克隆含人gp130和IL-12Rβ2胞外段的基因并构建人gp 130-IL-12Rβ2胞外段融合蛋白基因真核表达载体.方法 设计合成特异性引物,以人外周血单个核细胞(PBMC)cDNA为模板,PCR法扩增gp130胞外段基因和IL-12Rβ2胞外段基因;应用T-A克隆技术和亚克隆技术,构建骨架为GV140的人gp130-IL-12Rβ2胞外段融合蛋白基因真核表达载体.结果 PCR扩增得到人gp130胞外段基因,IL-12Rβ2胞外段基因和gp130-IL-12Rβ2胞外段融合蛋白基因片段,克隆得到重组体GV 140-gp 130-IL-12Rβ2,测序验证了重组体的准确性.结论 成功构建了人gp130-IL-12Rβ2胞外段融合蛋白基因真核表达载体.