橡胶草法尼基焦磷酸合酶基因的克隆与功能分析

【目的】法尼基焦磷酸合酶（farnesyl diphosphate synthase,FPS）是天然橡胶生物合成的甲羟戊酸途径中的关键酶,获得橡胶草FPS基因并转化野生橡胶草,为研究FPS基因在橡胶草橡胶生物合成过程中的调控作用奠定基础。【方法】采用同源克隆的方法获得橡胶草FPS基因全长cDNA序列,并对该基因进行生物信息学分析。对橡胶草和其他18种不同高等植物的FPS氨基酸序列进行多序列比对及进化树分析。提取橡胶草不同组织：根、叶柄、叶、花梗、花和种子RNA,对FPS基因进行组织特异性表达分析,并对不同生长时期的橡胶草FPS表达量进行比较,分析橡胶草生长过程中FPS的调节作用。将该基因在野生型橡胶草中过表达,对得到的转基因和野生型植株FPS相对表达水平进行分析,比较转基因和野生型植株橡胶含量的变化。碱煮法提取转基因和野生型橡胶草根部的橡胶,测定橡胶含量。【结果】获得橡胶草FPS基因全长cDNA序列,命名为TKFPS（GenBank登录号 KJ558350.1）。序列分析表明该基因包含1个1 029 bp的完整开放阅读框,编码342个氨基酸,编码的蛋白质相对分子量为39.35 kD,理论等电点（pI）为5.41,平均疏水性为-0.242。多序列比对结果表明,橡胶草FPS氨基酸序列含有高等植物FPS基因的5个保守结构域,系统发育分析结果显示新疆野生橡胶草与蒲公英处于同一分支,其亲缘关系最近。TMHMM和TargetP亚细胞定位分析得知,TKFPS 蛋白无跨膜区域,可能定位于细胞质中发挥功能。组织特异性分析结果表明TKFPS在橡胶草的根、叶柄、叶、花梗、花、种子中均有表达,其中,在叶中表达量最高,根次之,在花中表达量最低。重组子pCAMBIA2300-35S-TKFPS经农杆菌介导法转化野生橡胶草叶盘,得到6株转基因植株。实时荧光定量PCR检测发现,与野生型相比,转基因株系FPS的相对表达量水平明显升高,6株转基因株系TKFPS表达量平均约是野生型的2.8倍。橡胶含量测定结果表明6株转基因株系的根中橡胶质量分数平均比野生型增加了3.92%。【结论】成功从橡胶草中克隆获得TKFPS,并转化野生橡胶草得到转TKFPS的高产橡胶草株系,FPS在橡胶草产胶过程中发挥重要功能。     

番茄的病害识别与防治技术

常见的番茄病害有早疫病、灰霉病、叶霉病等,为减轻各类病害的发生及危害,生产中我们应采取有效防治措施控制病情发展以减轻危害。     

甘蔗渣熟料袋栽草菇组合配方的研究

研究不同甘蔗渣栽培料配方熟料栽培对草菇产量和品质的影响。采用甘蔗渣为主要原料部分代替稻草熟料栽培草菇,设置6个栽培料配方,观察记录草菇菌丝生长情况及草菇产量和质量。结果表明:甘蔗渣替代稻草做20%处理(配方1)是理想的草菇熟料栽培配方,草菇在此配方上的菌丝生长速度稍低于全稻草配方(CK),但在长势、产量、生物学转化率及投入产出比都强于对照(CK)和其他处理配方。     

水稻和狗尾草来源稻梨孢的鉴定及其交互侵染作用分析

稻梨孢除了能侵染水稻,引起稻瘟病造成严重产量损失外,还能侵染多种禾本科作物和杂草。为了探究水稻来源稻梨孢与狗尾草来源稻梨孢之间是否具有交互侵染作用,本研究以水稻和狗尾草叶片病斑上分离得到的101株稻梨孢作为研究对象。经形态学鉴定,101株菌株都为稻梨孢。对15株代表菌株进行肌动蛋白、β微管蛋白和钙调蛋白基因扩增,构建系统发育树,发现基于钙调蛋白和3个基因联合构建的系统发育树中水稻来源菌株聚为1个分支,狗尾草来源菌株聚为1个分支,表明稻梨孢存在种群分化现象。52株水稻来源稻梨孢可以侵染狗尾草,49株狗尾草来源稻梨孢不能侵染水稻。因此,种植水稻时应及时清除稻田周围杂草,以减少稻梨孢野生寄主数量。     

干制牡蛎营养成分分析及其提取工艺的建立

为了探究近江牡蛎(Ostrea rivularis)中铝(Al)的形态分布,利用化学连续浸提法结合电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)对近江牡蛎总Al质量分数及Al存在形态进行初步研究,并对4种浸提液的浸提条件进行优化。结果显示,其优化参数为0.5 mol·L^–1氯化钾溶液70 mL浸提2 h,去离子水70 mL浸提2 h,4 mol·L^–1盐酸溶液70 mL浸提2 h,浓硝酸70 mL浸提2 h。此条件下,近江牡蛎整体中Al形态存在有机铝<铝离子(Al³⁺)<水溶态铝<氢氧化铝 [Al(OH)₃]<难溶态铝的分布规律,约77.36%的Al以难溶态存在,毒性较大的无机Al主要以Al(OH)₃的形态存在,占总Al的15.87%。通过模拟胃肠消化环境,测定近江牡蛎中Al的溶出率,模拟胃液可溶出Al占总Al的8.16%~32.11%,说明由于胃液的酸性和酶的作用,近江牡蛎中的Al在胃液中形态发生变化。     

艾渣中有效成分的定性检测及含量测定

为给艾渣资源化回收利用提供技术依据,通过显色定性试验和泡沫试验检测艾渣中有效成分,并采用UV法建立艾渣中有效成分含量的测定方法。结果显示：艾渣中含有鞣质、蒽醌类化合物、黄酮类化合物、多糖和皂苷类化合物等多种物质,无生物碱;试验采用UV法,以大黄素、芦丁、绿原酸、人参皂苷Rg1、葡萄糖为对照,在222、420、327、554、620nm处测定艾渣中总蒽醌3.176、总黄酮12.853、总有机酸18.715、总皂苷9.512和总多糖13.120mg/g。方法学研究表明：各有效成分测定方法线性关系良好、精密度高、回收率高、重复性好、稳定性强。综上所述,艾渣提取蒽醌类、黄酮类、皂苷类和多糖化合物等物质具有较高的回收利用价值。     

巧用农药防病治虫

1、看药施药目前市场上农药品种较多．一般按农药的功能分为有杀虫剂、杀菌剂、种子包衣剂、除草剂以及植物生长调节剂等。按加工剂型分为乳剂、水剂、可湿性粉剂、颗粒剂、熏烟剂等。在用药前首先要详细认真地阅读包装说明书,要认清主要性能、剂型、有效成分、生产时间及有效期限、应用范围、主要防治对象、安全间隔期。如发现乳剂有混浊、沉淀,粉剂出现受潮结块、变色等现象,证明该药剂已经变质失效,起不到防病治虫的效果,有时还会出现药害。来历不明没有生产等记号,标签书写不清楚的药剂不可使用。喷药时要严格掌握安全使用量,不能随意加大使用量及浓度。要弄清药剂的使用范围,     

墨鱼干加工技术及质量要求

墨鱼干是我国传统的特色水产加工制品之一，畅销国内外。目前我国有的墨鱼干生产企业专业知识缺乏，加工操作远不符合现代食品加工与食品质量安全的需要。本文详述了墨鱼干的加工技术和质量要求。     

顾客永远是最精明的

正表姐在镇上经营一家五金店。前几年小镇上工厂、工地多,表姐头脑活络,懂得"处世"之道,把供销线上大小领导打点得很满意,单位五金所需都从表姐店里购买。表姐的五金店着实红火了几年。近几年,小工厂或倒闭,或关门,工地也都竣工撤走,表姐的五金店收入遭遇断崖式滑坡,若非门头房是自己家的,根本维持不下去。和表姐一街之隔的另一家五金店却丝毫不受影响,顾客络绎不绝,有时我路过,瞥眼往里瞅,比超市还人多。表姐十分奇怪,那家五金店店铺是租的,店主整天冷个     

基于Web 3D技术的甘肃省农业科学院虚拟展馆设计及实现

参照甘肃省农业科学院科技成果实体展馆，通过虚拟现实技术设计建成具有互动性和沉浸感的Video、Audio、Flash、Java效果组合应用，基于Web3D技术的交互式虚拟展厅系统。该虚拟展览馆具有目标明确、针对性强、实时互动、节约资源等特点。