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【目的】法尼基焦磷酸合酶(farnesyl diphosphate synthase,FPS)是天然橡胶生物合成的甲羟戊酸途径中的关键酶,获得橡胶草FPS基因并转化野生橡胶草,为研究FPS基因在橡胶草橡胶生物合成过程中的调控作用奠定基础。【方法】采用同源克隆的方法获得橡胶草FPS基因全长cDNA序列,并对该基因进行生物信息学分析。对橡胶草和其他18种不同高等植物的FPS氨基酸序列进行多序列比对及进化树分析。提取橡胶草不同组织:根、叶柄、叶、花梗、花和种子RNA,对FPS基因进行组织特异性表达分析,并对不同生长时期的橡胶草FPS表达量进行比较,分析橡胶草生长过程中FPS的调节作用。将该基因在野生型橡胶草中过表达,对得到的转基因和野生型植株FPS相对表达水平进行分析,比较转基因和野生型植株橡胶含量的变化。碱煮法提取转基因和野生型橡胶草根部的橡胶,测定橡胶含量。【结果】获得橡胶草FPS基因全长cDNA序列,命名为TKFPS(GenBank登录号 KJ558350.1)。序列分析表明该基因包含1个1 029 bp的完整开放阅读框,编码342个氨基酸,编码的蛋白质相对分子量为39.35 kD,理论等电点(pI)为5.41,平均疏水性为-0.242。多序列比对结果表明,橡胶草FPS氨基酸序列含有高等植物FPS基因的5个保守结构域,系统发育分析结果显示新疆野生橡胶草与蒲公英处于同一分支,其亲缘关系最近。TMHMM和TargetP亚细胞定位分析得知,TKFPS 蛋白无跨膜区域,可能定位于细胞质中发挥功能。组织特异性分析结果表明TKFPS在橡胶草的根、叶柄、叶、花梗、花、种子中均有表达,其中,在叶中表达量最高,根次之,在花中表达量最低。重组子pCAMBIA2300-35S-TKFPS经农杆菌介导法转化野生橡胶草叶盘,得到6株转基因植株。实时荧光定量PCR检测发现,与野生型相比,转基因株系FPS的相对表达量水平明显升高,6株转基因株系TKFPS表达量平均约是野生型的2.8倍。橡胶含量测定结果表明6株转基因株系的根中橡胶质量分数平均比野生型增加了3.92%。【结论】成功从橡胶草中克隆获得TKFPS,并转化野生橡胶草得到转TKFPS的高产橡胶草株系,FPS在橡胶草产胶过程中发挥重要功能。 相似文献
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1、看药施药目前市场上农药品种较多.一般按农药的功能分为有杀虫剂、杀菌剂、种子包衣剂、除草剂以及植物生长调节剂等。按加工剂型分为乳剂、水剂、可湿性粉剂、颗粒剂、熏烟剂等。在用药前首先要详细认真地阅读包装说明书,要认清主要性能、剂型、有效成分、生产时间及有效期限、应用范围、主要防治对象、安全间隔期。如发现乳剂有混浊、沉淀,粉剂出现受潮结块、变色等现象,证明该药剂已经变质失效,起不到防病治虫的效果,有时还会出现药害。来历不明没有生产等记号,标签书写不清楚的药剂不可使用。喷药时要严格掌握安全使用量,不能随意加大使用量及浓度。要弄清药剂的使用范围, 相似文献
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为减轻重力侵蚀危害和提高埂坎利用率,以定西市安家沟小流域为试验区,开展梯田埂坎林绿化效益试验。试验结果表明,栽植梯田埂坎林能够有效地拦蓄地表径流和泥沙,能显著降低风速,提高空气湿度,降低地表温度,缩小土壤表层地温的日较差和近地层气温的日较差,并且可以获得稳定的经济效益,是增加经济收入和解决山区"三料"问题的有效措施。 相似文献