沙田柚×枳杂交群体创建与InDel标记鉴定

【目的】以沙田柚为母本，枳为父本杂交，以期获得具有枳优良特性并与柚嫁接亲和性强的砧木品种。【方法】2018—2021年在广西阳朔进行常规有性杂交，共采集274个果实，已播种70个果实的种子获得1830株F1代植株，结合形态学与InDel分子标记对F1代进行鉴定。【结果】授粉果实种子数量及形态与母本沙田柚相似，数量多，平均达123粒，但较母本大并稍圆；含饱满种子与败育种子，饱满种子∶败育种子≈1∶2.64；其中28个杂交果实繁育群体的叶片均为三出复叶，计551株；42个杂交果实繁育群体的叶片均为单身复叶，计1279株，通过InDel标记鉴定出杂种苗698株。【结论】沙田柚×枳的杂交后代叶型差异较大，需结合InDel标记进行精准鉴定。     

红三叶引种试验研究初报

2001￣2003年,在岷县寺沟乡奔直寺对美国红三叶、加拿大红三叶、岷山红三叶进行引种对比试验。结果表明:岷山红三叶比美国红三叶生育期短35d、比加拿大红三叶生育期短45d;现蕾期平均株高:岷山红三叶为95.8cm,比美国红三叶(株高90.4cm)高5.4cm、比加拿大红三叶(株高90.1cm)高5.7 cm;全年鲜草产量:岷山红三叶为70 995kg/hm 2,比美国红三叶(53970kg/hm 2)高17025 kg/hm2,是美国红三叶鲜草产量的1.32倍;比加拿大红三叶(41475kg/hm 2)高29520kg/hm 2,是加拿大红三叶鲜草产量的1.71倍,差异极显著(p<0.01)。说明岷山红三叶更适宜在高寒阴湿地区种植。     

‘沙田柚’与枸橼杂交后代叶形态学性状遗传分析

【目的】探究‘沙田柚’与枸橼杂交后代叶形态学性状的遗传趋向性与相关性。【方法】以单胚、易感溃疡病品种‘沙田柚’为母本,与单胚、抗溃疡病种质枸橼C-05进行杂交,将得到的848株杂种后代作为研究对象,对其叶片形态学性状进行遗传趋向分析与偏相关分析。【结果】F_1代叶尖指数、叶形指数、翼叶宽度性状受母本的影响较大,叶柄长度性状、新叶颜色性状受父本的影响较大,叶尖指数、叶形指数表现为趋小变异,翼叶宽度表现为趋大变异,叶柄长度表现为趋中变异;有翼叶对无翼叶表现为显性,紫色新叶对绿色新叶表现为显性;新叶颜色与翼叶宽度、叶柄长度呈极显著负相关,与叶尖指数呈显著负相关,而与叶形指数呈极显著正相关,叶形指数与翼叶宽度呈极显著负相关,而翼叶宽度与叶柄长度呈极显著正相关。【结论】杂种F_1代叶尖指数、叶柄长度、叶形指数、翼叶宽度、新叶颜色等性状均有一定的遗传趋向性与相关性,可能为多基因控制的数量性状;新叶颜色性状可以作为类似杂种鉴定的形态学标记。本研究对于多年生木本植物杂交育种的性状选择、变异趋势研究有一定的指导作用。     

行距对不同品种紫花苜蓿生长和产量的影响

试验采取随机区组设计,设置4个不同行距,对挑战者、岩石、WL363、WL343、WL319、阿尔冈金、陇东7个苜蓿品种以及阿尔冈金和陇东1:1混合,进行生长高度、产草量、茎叶比等指标测定,结果表明:不同行距处理中,各苜蓿品种的生长高度和鲜草产量均以行距30cm为最高;当行距大于30cm时,随着行距的增大,生长高度和鲜草产量逐渐减小,由此可见,30cm是苜蓿种植的最佳行距。另外,挑战者、WL343、WL363、WL319,5个品种在鲜干比和茎叶比两个指标上表现较为突出。     

裹包青贮燕麦和苜蓿饲喂肉羊育肥效果试验研究

设置青贮燕麦与青贮苜蓿的质量比分别为1∶0(A组)、7∶3(B组)、1∶1(C组)、3∶7(D组)、0∶1(E组)的5组混合饲草,研究不同比例的混合饲草对羔羊育肥效果的影响,筛选适宜的饲草搭配比例。结果:青贮燕麦与青贮苜蓿混合饲喂育肥羔羊,均有较好的育肥效果,羔羊的采食量显著增加,但综合采食量、增重和经济效益等指标,认为D组是青贮燕麦与青贮苜蓿混合饲草组合中的最佳组合,只均日增重0.184 kg,经济效益159.08元,较饲喂裹包青贮燕麦A组的0.123 kg、53.68元分别增加49.59%、105.4元,较饲喂裹包青贮苜蓿E组的0.161kg、120.81元分别增加14.29%、38.27元。     

药用岷山红三叶工厂化草产品加工技术分析

通过分析定西市两家药用岷山红三叶生产企业的生产设备及工艺,认为最适合我市药用岷山红三叶的工厂化加工技术是：在生产设备上,采用立式热风炉进风干燥;在生产工艺上,先对药用岷山红三叶进行茎叶分离,再分别进行烘干销售。可以使企业生产及经济效益达到最好。     

转chit42基因柠檬的分子鉴定及抗炭疽病研究

以转chit42基因柠檬为试材,对其进行了分子鉴定和抗炭疽病研究。用PCR和Southern杂交证实外源基因chit42已经整合到转化植株基因组中,chit42基因在转基因柠檬SR23株系中为3个拷贝,在SR24株系中为2个拷贝。对转基因柠檬进行离体和活体抗炭疽病试验表明转基因柠檬抗炭疽病能力得到明显提高。利用半定量RT-PCR技术检测chit42基因在柠檬中的表达,结果表明用炭疽病病菌接种处理24h后,chit42基因表达量开始增加;接种48h后,chit42基因表达量进一步明显增大;接种72h后,表达量开始有所下降,但仍然高于正常情况下chit42基因的表达量。     

岷山红三叶在高寒阴湿地区天然草场改良中的作用

在我市高寒阴湿地区岷县旋窝退化草场上补播岷山红三叶，补播当年生长缓慢，第2年开始生长势变强，侵占速度加快，其盖度、密度、频度等特征值相应增加，并成为草地优势种之一，对不同类型退化草场有一定治理效果。     

岷山红三叶改良退化山地草甸效果研究

2001-2003年进行了岷山红三叶Trifolitm pretense直播改良长花马先蒿Pedicularis longiflora退化山地草甸效果研究.经过观察生育期、盖度和地上生物量测定,结果表明:岷山红三叶在山地草甸的生长发育推迟1～2个生育期;岷山红三叶竞争性强,含有对长花马先蒿相克的未知因子,第3年盖度由18.3%下降为0.3%,而成为优势种,盖度达38.7%;岷山红三叶改良退化草甸效果显著,第3年鲜草产量4 347.0kg/hm2,占草甸产草量的37.3%.     

抗PthA-NLS多肽单克隆抗体的制备及单链抗体基因的构建

 【目的】制备抗PthA-NLS多肽单克隆抗体并构建其单链抗体（single chain variable fragment,ScFv）基因,为从PthA角度进一步研究柑橘溃疡病致病机理创造条件,并为构建单链抗体基因植物表达载体,尝试利用转基因和植物抗体技术创制抗溃疡病柑橘新种质奠定基础。【方法】利用PthA-NLS重组多肽免疫Balb/c小鼠,制备抗PthA-NLS多肽单克隆抗体,从分泌抗PthA-NLS多肽单克隆抗体的杂交瘤细胞中提取总RNA,采用RT-PCR和重叠延伸PCR（splicing by overlap extension PCR,SOE-PCR）法构建其单链抗体基因,并克隆到pGEM-T载体和原核表达载体pET32a(+)中,重组原核表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)后诱导重组蛋白的表达。【结果】获得了3株能稳定分泌抗PthA-NLS多肽的单克隆抗体杂交瘤细胞株1C8H1、2D12B6、3D8A10。成功构建了单链抗体基因ScFv,获得的ScFv基因大小约750 bp,其中重链可变区（VH）基因有360 bp,轻链可变区（VL）基因有342 bp,中间连接肽基因45 bp,经过IPTG诱导ScFv原核表达,获得了大小为44.5 kD的ScFv重组蛋白。【结论】试验获得了3株能稳定分泌抗PthA-NLS多肽的单克隆抗体杂交瘤细胞株,成功构建了ScFv基因,并实现了原核表达,为进一步探索PthA的致病机理和下一步利用抗体技术获得抗溃疡病柑橘种质的研究打下了基础。