鸡TIGAR基因真核表达质粒的构建及其抗凋亡功能评价

【背景】 TP53诱导的糖酵解和凋亡调节因子（TP53-induced glycolysis and apoptosis regulator,TIGAR）是p53下游的靶基因,具有调节糖酵解水平和去除活性氧（Reactive oxygen species,ROS）并降低由活性氧诱发的细胞凋亡水平。【目的】 构建鸡源TIGAR基因的真核表达质粒,并检测TIGAR基因在DF1细胞中的抗凋亡作用,为建立稳定表达鸡TIGAR基因的细胞系做准备。【方法】根据GenBank（登录号：XM_417232.6）中预测基因设计引物,利用RT-PCR的方法从SPF鸡脾脏中扩增鸡TIGAR基因,将扩增产物克隆至载体（Flag-CMV14）后送公司测序验证;随后构建进化树对鸡TIGAR基因与其他哺乳动物及水生动物的TIGAR基因进行同源性分析。将重组质粒（Flag-TIGAR）转染入DF1细胞24 h后,使用新城疫病毒诱导细胞凋亡,利用Western Blot检测重组质粒表达情况以及Poly ADP-Ribose Polymerase（PARP）裂解情况。此外还将重组质粒（Flag-TIGAR）转染入DF1细胞,并于收样前2 h使用Staurosporine刺激细胞发生凋亡,分别在转染后24、48 h收集样品,并用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。【结果】 RT-PCR扩增TIGAR基因,在843 bp处出现目的条带与预测相符,构建的TIGAR真核表达质粒（Flag-TIGAR）经测序,结果显示其序列与GenBank上预测的基本一致。Western Blot结果显示在30 h、36 h收集的样品中PARP均被裂解且转染重组质粒（Flag-TIGAR）的实验组与未转染质粒（MOCK）组或转染空载体（Flag-CMV14）组的样品相比,裂解的PARP表达量明显降低,且差异极显著（P<0.01）。流式结果显示：24 h 检测转染Flag-CMV14后细胞总凋亡率为11%（早期凋亡7.8%,晚期凋亡3.2%）,而转染Flag-TIGAR后细胞总凋亡率仅为4%（早期凋亡3.7%,晚期凋亡0.3%）,转染Flag-CMV14的早期凋亡率和晚期凋亡率均高于转染Flag-TIGAR组,且差异显著（P<0.05）。48 h转染Flag-CMV14后细胞总凋亡率为20.3%（早期凋亡14.3%,晚期凋亡6.0%）,而转染Flag-TIGAR后细胞总凋亡率为6.4%（早期凋亡4.8%,晚期凋亡1.6%）,转染Flag-CMV14组的细胞早期凋亡和晚期凋亡率均高于转染Flag-TIGAR的组,且差异极显著（P<0.01）。【结论】成功扩增出鸡TIGAR基因,并构建了其真核表达质粒,通过Western Blot和流式实验均证实过表达TIGAR后可降低细胞的凋亡程度并有利于细胞存活。     

中国木薯褐斑病发病规律调查及田间防治药效试验

褐斑病是世界木薯种植中的常见病害,也是危害中国木薯的重要病害。在前期工作基础上,2011—2018年,笔者们对中国木薯主栽区开展了褐斑病的普查及发生规律研究工作。结果表明,褐斑病在中国木薯主要种植区域均有发生,部分地区发病严重,主栽品种均不具备抗病性。2个地点3个木薯品种的3年系统病情调查结果表明,病害通常在木薯生长中期发生,随后逐渐加重,中后期流行为害。田间试验结果表明,咪鲜胺、多菌灵、丙环唑、保叶清等杀菌剂对褐斑病的危害有较好的减轻作用,建议在生产中推广应用。     

优质高产春小麦新品种—临麦37号

<正>临麦37号(原品系代号06-066-12)是临夏回族自治州农业科学院农作物育种所以辽春6号为母本,以临麦32号为父本进行杂交,经南繁北育选育而成的优质、高产春小麦新品种。2019年通过甘肃省农作物品种审定委员会审定,审定编号为甘审麦20190003。1特征特性该品种属普通春性小麦,中熟品种,生育期103 d。幼苗直立,叶色深绿,旗叶上举,株型紧凑,株高106 cm,穗呈长方型,顶芒,白颖壳,群体均匀整齐,千粒重38.78 g,     

基于线性谱聚类的林地图像中枯死树监测

【目的】将基于线性谱聚类超像素的方法应用在森林病虫害防治领域,可智能监测无人机森林虫害图像中的枯死树,为森林有害生物的监测工作提供技术支撑。【方法】分别以湖北省受松材线虫与辽宁省受红脂大小蠹侵害的松林无人机图像为试验数据,首先使用线性谱聚类超像素分割算法将图像划分为多个超像素;然后基于枯死树木的颜色特征,初步提取可能为枯死树的超像素区域;最后基于枯死树木与其他干扰地物具有不同的纹理特征,计算超像素的区域密度和缝隙量,利用支持向量机对初步提取的超像素进行分类,从而检测出图像中的枯死树。【结果】基于线性谱聚类超像素和支持向量机的枯死树监测方法可有效排除与枯死树木颜色相近的其他干扰地物,较准确地提取出枯死树木。使用该方法与基于植被颜色指数的阈值分割方法、基于简单线性迭代聚类超像素和随机森林的方法,对35幅受灾松林无人机图像进行试验,并选用交并比、虚警率和漏检率3个评价指标对3种方法进行定量对比分析。结果表明,基于线性谱聚类超像素的方法监测出的枯死树区域最精确,其监测结果与人工检测结果的交并比均值大于58%,且虚警率和漏检率均优于另外2种方法。【结论】基于线性谱聚类超像素的枯死树监测方法能实现松林中枯死树的快速、准确检测及定位。     

基于离散元法的凸圆刃式深松铲减阻效果仿真分析与试验

针对深松作业阻力大、能耗高等问题,该文在深松铲铲尖顶部设计了一种能有效减阻降耗的凸圆刃。以安装凸圆刃的凸圆刃式深松铲为研究对象,建立了土壤模型。为提高土壤模型的准确性,选用非线性粘结弹性塑形接触模型(edinburgh elasto-plastic adhesion model,EEPA),对凸圆刃式深松铲进行耕作阻力虚拟仿真。利用插件将颗粒与深松铲接触作用力导出,分析凸圆刃式深松铲应力和形变,校验其结构强度;采用EDEM软件分析不同耕深和速度对深松耕作阻力的影响,并以国标深松铲为比较对象,分析了凸圆刃式深松铲的减阻效果;通过田间试验验证了土壤模型和凸圆刃式深松铲设计的准确性和可行性。田间试验结果表明,与国标深松铲相比,凸圆刃式深松铲耕作阻力平均降低了10.24%。仿真结果与实测值较为接近,数值误差在3%～10%,证明土壤模型基本符合土壤的力学特性,能近似代替真实的土壤环境。该研究证明了采用离散元法分析深松耕作阻力可行性,可为进一步优化深松铲结构提供参考。     

贵阳花溪古茶树遗传进化的SNP分析

试验采用SNP(单核苷酸多态性)技术对贵阳花溪古茶树资源的遗传多样性、群体结构和遗传进化进行了分析.结果表明,利用生物信息学分析古茶树样品的重测序数据,获得了1 656 258个SLAF标签,古茶树样品平均测序深度为24.21x,其中多态性的SLAF标签有462 897个,共得到283 376个高一致性的群体SNP标记.从基于SNP标记获得的进化树可以看出,来自相近地方的古茶树在进化树上基本上处于相近位置,但是花溪古茶树存在着广泛的遗传变异,主成分分析(PCA)获得了与进化树一致的结果.群体结构分析可清晰地把古茶树资源分为乔木型和灌木型2个类群.乔木型古茶树位于进化树下部,而灌木型古茶树处于进化树上部,表明茶树是由乔木型向灌木型进化的.     

基于NH_2-MIL-101(Fe)过氧化物模拟酶特性测定葡萄糖

研究发现NH_2-MIL-101(Fe)金属有机框架材料可催化H_2O_2氧化3,3,5,5-四甲基联苯胺(TMB)显蓝色,表现出过氧化物模拟酶特性,而且在较宽的温度(4～80℃)及pH值范围(2～10)内保持其模拟酶活性,结合葡萄糖氧化酶,建立了测定葡萄糖的方法.在优化条件下,吸光度与葡萄糖浓度在0.75～50μmol/L范围内呈现良好的线性关系,对葡萄糖的检出限为0.75μmol/L.将本法用于血清中葡萄糖的测定,获得满意结果.     

苏州市吴江区鲜食甜糯玉米品种比较试验

为筛选出适合江苏省苏州市吴江地区种植的优质、高产鲜食玉米新品种,优化玉米种植结构,开展了甜糯、甜玉米新品种的比较试验。结果表明,通过从生育期、播后3 d出苗率、株高、产量及其相关性状、品质、抗病虫性等方面进行综合比较,认为"苏科糯10号""明玉1203""双萃2750"3个鲜食甜糯品种株型较好、产量较高、抗病虫性较强、品质和感观更佳,深受当地群众欢迎,在吴江区具有较大的推广前景。     

育雏育成期饲粮添加益生菌对蛋鸡生长性能、血清指标、肠道健康及后续生产性能的影响

旨在研究育雏育成期饲粮中添加屎肠球菌(EF)和枯草芽孢杆菌(BS)对蛋鸡生长性能、血清生化和肠道健康的影响及育雏育成期饲喂效果对产蛋期生产性能的影响。试验选取528只1日龄罗曼粉蛋鸡,采用2×2试验设计,BS包括两个添加量即0或200 mg·kg^-1(BS活菌数为：3×10¹⁰ CFU·g^-1),EF包括两个添加量,即0或200 mg·kg^-1(EF活菌数为：2×10⁹ CFU·g^-1),共分4个处理,每个处理6个重复,每个重复22只鸡。试验期共30周,在育雏育成期1～20周进行试验处理,产蛋期21～30周所有组饲喂基础饲粮,不进行益生菌处理。结果表明：1)添加BS和EF对蛋鸡1～20周料肉比(F/G)存在显著交互作用,表现为两种益生菌联合添加提高了F/G(P<0.05)。2)添加BS有降低20周血清谷丙转氨酶含量的趋势(P=0.067)。BS和EF对蛋鸡20周血清生化存在交互效应,表现为两种菌联合添加降低了血清总蛋白、血清高密度脂蛋白和总胆固醇的含...