家兔矮小同源盒基因(Shox2)的克隆和表达分析

为了研究新西兰白兔矮小同源盒基因(Shox2)序列,预测其结构和功能,以及研究Shox2基因的时空表达特征,本研究克隆了新西兰白兔Shox2基因全长CDS区,分析其编码蛋白的同源性、亲疏水性、二级和三级结构特点、系统进化树等生物信息学特征,并用Western blot法验证融合蛋白TrxA-Shox2。分别在胚胎中期(E20.5d)、胚胎后期(E28.5d)、幼龄期(出生后10d)、成年期(A)4个时间点采集3只动物的肾、大血管、真皮、心、大脑、肝、肺、脾、肌肉、胆囊共10种组织,采用实时荧光定量PCR技术研究Shox2基因的时空表达图谱。结果,成功克隆了新西兰白兔Shox2基因(登录号:KP726285)。Shox2基因CDS区全长666bp,翻译221个氨基酸。生物信息学分析显示,Shox2为碱性、不稳定蛋白,Shox2蛋白氨基酸二级结构中α-螺旋区域占61.99%,无规则卷曲区域占33.48%,延伸链占4.52%。Western blot验证了融合蛋白TrxA-Shox2的表达。家兔Shox2蛋白氨基酸序列与眼镜猴、猩猩、褐家鼠、人的氨基酸序列同源性较高,说明Shox2蛋白在进化中较保守。Shox2基因mRNA在很多器官都有表达,在E20.5d的家兔胚胎中,Shox2mRNA在肾、肌肉和胆囊的表达量高,在E28.5d时表达量较高的是脾、心,幼龄期时表达量较高的是真皮、肝,成年期时表达量较高的是真皮、脾。本研究成功克隆了新西兰白兔Shox2基因,预测了其结构和功能。Shox2基因mRNA在很多器官都有表达,不同的组织和不同时间特征的表达量变化可能与Shox2功能高度相关,并受到严格的调控。     

抗菌新药与疫苗对猪霉形体肺炎的防治效果研究

用氯甲砜霉素等３种抗菌新药及猪霉形体肺炎疫苗对猪肺炎的使用方法与防治效果进行了比较，试验结果表明，氟甲砜霉素、普乐健，复方中草药及猪霉形体肺炎疫苗等能能提高试验猪的增重与饲料转化率普乐健、复方中草药还能显著减轻病猪的症状与病理变化，其防治效果明显优于其他试验组药物。     

猪支原体肺炎疫苗在生产中的应用效果观察

猪支原体肺炎 (Mycoplasma pneumonia ofswine,MPS)是由猪肺炎支原体引起的一种猪的慢性呼吸道传染病。该病在我国常称为猪喘气病 (或气喘病 ) ,国外常称为猪地方性流行性肺炎 (Swine en-zootic pneumonia)。该病广泛分布于集约化养猪场 ,患猪长期生长不良、继发病原体感染时也会造成严重死亡。 Pointon等 (1 985)报道 ,病猪生长率减少1 2 .7% ,饲料转化率受抑制 1 3 .8% ,体重减少 1 0～2 5kg。 Clark(1 991 )通过调查、研究认为 ,该病每年对美国养猪业造成的损失就达 2～ 1 0亿美元。近年来 ,随着集约化养猪业的不断发展 ,猪支原体肺炎…     

信息产业发展促进经济增长的机制分析

随着社会信息化进程的加快，信息产业已成为当今世界一个新兴的经济增长点，现已发展为主导产业，其兴衰决定着整个经济的走向。本文运用内生经济增长理论说明了信息产业发展促进经济增长的机理，并在此基础上提出了具体的促进经济增长的机制。     

猪γ干扰素基因重组腺病毒的构建与鉴定

干扰素-γ(INF-γ)又称Ⅱ干扰素,主要是由活化的CD4+、CD8+等T淋巴细胞和NK细胞产生的一种细胞因子[1-2],猪γ干扰素全基因为501个碱基,编码166个氨基酸,前23个氨基酸为信号肽,后143个氨基酸为活性成熟蛋白,天然活性状态为同源二聚体,而单体形式没有生物学活性[3].     

肉鸡高效养殖技术要点

养鸡是一个系统工程,根据肉鸡的特性和当前养鸡生产中存在的问题,从雏鸡的选择、环境控制、科学喂养、鸡病预防、适时出栏几个方面对肉鸡生产进行了介绍,为因地制宜地利用现有条件和设备在肉鸡养殖中获得更大的经济效益提供参考.     

土壤有效磷测定方法及注意事项

对石灰性土壤中有效磷含量的测定,宜采用碳酸氢钠—钼锑抗比色法。通过碳酸氢钠—钼锑抗比色法测定有效磷,应注意操作步骤的规范性、实验结果的换算以及影响结果的几个关键因素——温度、钼酸铵、抗坏血酸、水。     

H9亚型禽流感病毒对MDCK细胞增殖及其培养基过氧化氢含量的影响

为了探讨H9亚型禽流感病毒对MDCK细胞增殖及其培养基过氧化氢含量的影响,将不同剂量的H9亚型禽流感病毒接种MDCK细胞单层,吸附1.5h后弃去再加入新的DMEM维持液,每隔12h取上清液测定HA滴度、乳酸脱氢酶(LDH)活力以及过氧化氢(H2O2)含量。同时,本试验采用MTT法测定不同剂量病毒接种对MDCK细胞增殖的影响。结果表明,以10-3EID50、10-4EID50病毒剂量接种细胞后,病毒HA滴度分别在36h和48h达到滴度最大值(9log2)以及LHD活力的最大值,上清液中H2O2含量在48h时显著(P<0.05)高于空白对照组和低剂量病毒接种组;接种病毒后36h以内对MDCK细胞生长具有显著地(P<0.05)促进作用,之后会显著(P<0.05)抑制细胞的增殖。综上所述,H9亚型禽流感病毒能在前期促进MDCK细胞的增殖,随着病毒增殖对细胞损伤加大,LDH漏出量增加,促凋亡因子H2O2参与介导了这一过程。     

内蒙古兴安里湿地自然保护区植物区系的初步研究

文章对内蒙古兴安里湿地自然保护区植物区系进行了初步分析,为更好地保护生物多样性,维持物种稳定性,提供基础资料。     

非洲猪瘟病毒p72蛋白原核表达及单克隆抗体制备

【目的】表达与纯化非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)p72蛋白,并制备其单克隆抗体。【方法】构建原核表达载体pET-28b-p72,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞并进行诱导表达和蛋白纯化;用纯化后的p72蛋白免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合并制备单克隆抗体,通过间接ELISA法和亚克隆筛选出分泌抗体的阳性杂交瘤细胞;通过小鼠抗体类型检测试剂盒检测抗体类型;通过体内诱生法制备抗ASFV p72蛋白的单克隆抗体腹水,使用饱和硫酸铵沉淀法进行抗体纯化,通过间接ELISA法、间接免疫荧光试验(IFA)和Western blotting检测单克隆抗体效价和特异性。【结果】ASFV p72重组蛋白在大肠杆菌中以包涵体形式表达,将纯化的p72蛋白制备单克隆抗体,获得4株分泌IgG1抗体的单克隆细胞株,分别命名为6F8、7C3、8H7和9G2。间接ELISA结果显示,6F8与8H7细胞株分泌的抗体效价均为1∶64 00,7C3与9G2细胞株的抗体效价均为1∶12 800,且4株细胞株分泌的抗体与p72蛋白反应结果均呈...