杨梅果实品质分析和红色素稳定性研究

在杨梅红色素提取工艺条件的基础上,研究杨梅红色素的稳定性.结果表明,红色素在酸性条件下为稳定的红色;在60 ℃以下耐热性较好;H2O2、Na2SO3对杨梅红色素的影响显著,维生素C、K2S2O8对杨梅红色素基本无影响;蔗糖基质、葡萄糖基质、食盐基质、淀粉基质和K+、Ca2+、Mg2+、Zn2+对杨梅红色素吸光度基本无影响,Bi3+、Cu2+和Fe3+的影响很大,加入Fe3+的溶液,颜色由红色变为浅橙色.     

缺失rfaH基因的鸡白痢沙门氏菌株的构建及鉴定

为研制可以鉴别检测基因缺失型鸡白痢疫苗与自然感染菌,本研究通过基因同源重组技术,利用高效自杀性载体系统,敲除鸡白痢沙门氏菌(S.pullorum)CVCC 79201株的rfaH基因,同时未引入任何抗生素抗性基因等外源DNA序列,经筛选获得重组S.pullorum(rSp)株。检测结果显示缺失菌由光滑型转变为粗糙型。rSp在普通琼脂培养基上传15代后,仍然保持粗糙型表型。动物试验结果表明,rSp免疫伊莎褐蛋鸡后,其抗血清可通过平板凝集试验与CVCC 79201免疫的血清相区分。本研究为S.pullorum缺失疫苗的研制提供了技术平台。     

血清9型鸭疫里默氏杆菌在华南地区的分离鉴定

本研究于2009年7月～2010年4月针对广东、广西、福建等养鸭密集地区进行鸭疫里默氏杆菌(RA)流行病学调查,并分离到5个RA分离株。经形态特征、生化特性和血清学鉴定表明,5个分离株与血清9型RA相似。对16S rRNA部分基因进行序列测定,并与GenBank中登录的菌株16S rRNA基因序列进行比对及系统进化分析显示:该5株分离株与报道的RA H-1785、H-2199、H-2565和P-2123的16S rRNA序列相似性较高,同源性达99.1%～99.7%,进一步证实这5个分离株为血清9型RA。     

仔猪益生乳酸菌的分离及其抗逆性筛选

从仔猪肠道中分离出45株乳酸菌,从中筛选出4株耐酸、耐胆盐并具有良好益生性的菌株,小鼠试验证明其具有可靠的安全性,所分离出的4株乳酸杆菌可用于仔猪生产中用。     

陕253γ-醇溶蛋白基因的克隆与序列分析

针对γ-醇溶蛋白基因家族成员,设计了覆盖其启动子及全长编码区的3对特异引物,从强筋小麦品种陕253中克隆了8条1000 bp左右的片段(GenBank登录号为GQ871770～GQ871777).该片段群包含典型醇溶蛋白亚基的完整编码序列,并在重复区存在丰富的插入/缺失(InDel);推导的氨基酸序列显示,8个基因均具有γ-醇溶蛋白亚的典型结构特征,其中GQ871771为假基因,4条序列(GQ871770、GQ871772、GQ871776和GQ87177)具有9个半胱氨酸残基;启动子区序列分析表明,GQ871770、GQ871772、GQ871774和GQ871776在胚乳框存在6处SNP变异,其中两处变异发生于GCN4基序内,利用WebLogo3在线构建了储藏蛋白更具代表意义的30bp保守胚乳盒模式.进化分析证实克隆序列属于γ-醇溶蛋白基因家族成员.     

南疆杏棉复合系统条件下棉花冠层的光特性

为了探明杏棉复合系统条件下棉花冠层光合特性及遮荫对棉花产量的动态影响,以中棉43号为试材,研究了4种复合系统下棉花冠层光照强度、光合有效辐射(PAR)、叶面积指数(LAI)及产量构成要素。结果表明:宽幅棉花冠层光照强度、PAR、LAI优于窄幅棉花(即:6 m×4 m6 m×3 m4 m×2 m4 m×1.5 m),棉花冠层各光合指标在间作带中从东到西呈现出由小增大再减小的变化趋势;4种复合系统下棉花产量及主要生长指标有较大差异,其中各系统间籽棉产量、蕾铃脱落率、收获株数均达到极显著差异,6 m×4 m模式下平均籽棉产量达到6 092.59 kg/hm2,是4 m×1.5 m模式的3.1倍;各复合系统产值与单作田产值的大小表现为6 m×4 m6 m×3 mCK4 m×1.5 m4 m×2 m。     

猪圆环病毒2型ORF2重组腺病毒的构建与鉴定及其免疫效果研究

为了研究含有猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)的重组腺病毒作为基因工程疫苗的潜在应用价值,本试验根据GenBank中猪圆环病毒2型基因序列,设计了1对引物,用于猪圆环病毒2型ORF2基因的扩增。将目的基因T/A克隆后,亚克隆至腺病毒转移载体pShuttle-CMV,构建重组穿梭质粒pShuttle-CMV-ORF2。经PCR方法和限制性内切酶酶切法及测序证明该基因已成功连接后,重组腺病毒转移载体经PmeⅠ酶切线性化,在BJ5183细菌中与腺病毒骨架载体pAdEasy-1同源重组获得重组腺病毒质粒pAd-CMV-ORF2。经PCR方法和PacⅠ酶切方法及测序鉴定表明该重组腺病毒载体已构建成功。PacⅠ酶切线性化pAd-CMV-ORF2,脂质体法转染AD293细胞进行病毒的包装和扩增。PCR及RT-PCR、IFA、Western blotting检测目的基因及其表达。结果表明,本试验成功构建了重组腺病毒pAd-CMV-ORF2。3次噬斑试验纯化重组腺病毒,测得其TCID50为10-8.75/0.1 mL。将重组腺病毒接种SPF级雌性BALB/c小鼠,用ELISA抗体检测试剂盒检测特异性抗体水平。小鼠免疫试验测得其特异性抗体水平较高,为PCV2重组腺病毒基因工程疫苗的进一步研究打下基础。     

BVDV荧光RT-PCR检测方法的建立及应用

根据GenBank中登录的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)毒株序列,选择5'NTR保守区域设计1对特异性引物和1条Tagnum探针,通过矩阵法筛选引物探针的最佳浓度,建立了检测BVDV的荧光RT-PCR方法.结果显示,用1.5μL上下游引物混合液(10 μmol/L)和0.5 μL探针溶液(10 μmol/L)对BVDV进行检测,可获得较小Ct值、较高吸光值,并可降低检测成本.对该方法进行特异性、敏感性和重复性试验,结果表明,该方法敏感性高、特异性强、重复性好.将该方法应用在疫苗生产中,可快速准确地筛选出合格的原辅材料和半成品,为生产提供及时准确可靠的数据.     

2种生物杀虫剂对稻纵卷叶螟的防效

对1.2%烟碱·苦参碱水剂、0.5%藜芦碱水剂2种生物杀虫剂进行防治稻纵卷叶螟试验,结果表明,667 m2 0.5%藜芦碱水剂100 g处理对稻纵卷叶螟具有良好的控制作用,药后7和16 d防效分别为95.0%和93.4%。     

两种纯化兔抗酸性红73免疫球蛋白G方法的比较研究

分别采用饱和硫酸铵法和辛酸—硫酸铵法纯化兔抗酸性红73(acid red 73,AR73)免疫球蛋白G(IgG)。通过二喹啉甲酸(BCA)法、十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)试验、间接ELISA法分别测定IgG的浓度、纯度及效价。结果显示,饱和硫酸铵法所提IgG浓度为36.44 mg/mL,最高效价达1.6×10⁵;辛酸—硫酸铵法所提IgG浓度为15.79 mg/mL,最高效价达3.2×10⁵。提示,辛酸—硫酸铵法IgG纯度优于饱和硫酸铵法。