一株纤维素降解菌的鉴定及其对饲料粗纤维的降解效果

【目的】对本课题组分离的一株纤维素降解菌进行鉴定,优化其产酶条件并检测其对饲料粗纤维的降解效果,以期为该菌在饲料粗纤维降解中的应用提供理论依据。【方法】通过菌株形态特征和16SrDNA序列分析鉴定了实验室分离保存的一株纤维降解菌;研究该菌所产纤维素酶的部分酶学性质和酶谱,并优化其产纤维素酶的条件;利用体外发酵和尼龙袋法测定菌株N3所产粗酶液对3种饲料(麸皮、麦草、燕麦)粗纤维的降解率;利用RB亮蓝脱色试验检测该菌的木质素降解能力。【结果】经鉴定,该菌株为枯草芽孢杆菌,命名为Bacillus subtilis N3;N3菌株不产生漆酶,主要向胞外分泌分子质量70ku以上的纤维素酶组分;N3菌株所产纤维素酶的最适反应温度和pH分别为60℃和5.5;N3菌株以体积比1∶50接种至最适发酵培养基(碳源为麸皮、氮源为蛋白胨,初始pH为5),37℃培养24h时,所产纤维素酶活性最高,可达3.50U/mL;菌株N3所产粗酶液对麸皮的粗纤维降解率最高,对麦草秸秆的粗纤维降解率最低。【结论】分离到的纤维降解菌Bacillus subtilis N3主要分泌分子质量70ku以上、耐热的纤维素酶,对饲料粗纤维具有较强的降解能力。     

山羊碱性氨基酸转运载体基因SLC3A1cDNA序列克隆及表达

试验旨在克隆山羊碱性氨基酸转运载体基因SLC3A1 cDNA序列,探究其表达的组织特异性及其在小肠中的表达发育模式。参考GenBank已发表的绵羊、牛SLC3A1基因mRNA序列设计引物,克隆山羊SLC3A1基因的cDNA序列,采用实时荧光定量PCR的方法分析其在1日龄山羊11种组织及其在1日龄、6月龄、8月龄、10月龄、12月龄山羊十二指肠、空肠、回肠中的mRNA表达情况。结果表明,成功克隆得到了山羊SLC3A1基因cDNA序列,其与绵羊、牛、野猪、人、小鼠、大鼠的同源性分别为99%、97%、88%、86%、80%和79%。SLC3A1基因转录表达有明显的组织特异性,其在1日龄山羊肾脏、回肠、空肠、结肠中表达量依次降低(P<0.05),其他组织中表达量很低。同一月龄山羊,SLC3A1基因在不同肠段的表达量数值上回肠>空肠>十二指肠。SLC3A1基因在不同月龄山羊十二指肠表达量以1日龄山羊为最高(P<0.05),6~12月龄山羊相同肠段之间表达量无显著差异(P>0.05);空肠表达量随山羊年龄的增加均呈现逐步降低的趋势;回肠表达量在各个月龄山羊之间差异不显著(P>0.05)。结果说明,山羊碱性氨基酸转运载体基因SLC3A1的主要表达部位在肾脏和肠道,推测b^0,+碱性氨基酸转运系统转运氨基酸的主要部位为肾脏和肠道。SLC3A1基因在山羊小肠受肠段和发育阶段的影响,具有不同的表达发育模式。     

仔猪日粮中添加复合酸化剂的饲喂效果

选择7日龄哺乳仔猪126头，在玉米—豆粕型日粮中，分别添加6种自行研制的复合酸化剂饲喂仔猪，酸化剂的主要成分是柠檬酸、延胡索酸、磷酸、乳酸、草酸、酒石酸。结果表明，断奶仔猪的日增重比对照组分别提高11．94％、14．03％、7．46％、7．46％、17．31％、12．24％；饲料转化率分别提高13．92％、25．26％、7．73％、11．35％、21．65％、11．86％。仔猪的腹泻率也降低了。     

不同绵羊品种膻味物质分离、鉴定和比较分析

为进一步优化4-甲基辛酸和4-甲基壬酸的测定参数和比较不同地域不同绵羊膻味物质的差异,分别采集约6月龄蒙古羊、滩羊、小尾寒羊、同羊皮下脂肪样品,用气相色谱对其分析测定.采用同时蒸馏萃取方法,设定30、45、60、75、90、105、120 min 共7个梯度的蒸馏时间以及0.05、0.10、0.25、0.50、1.0、2.0 mL 6个脂肪酸样品的加入量,来确定最佳蒸馏时间和最低脂肪酸添加量对同时蒸馏萃取灵敏度的影响.结果表明,蒸馏时间为90 min、最低脂肪酸加入量为0.5 mL时,4-甲基辛酸和4-甲基壬酸的回收率最高.4个绵羊品种中,小尾寒羊的4-甲基辛酸含量最高,显著高于蒙古羊和同羊(P<0.05);滩羊的4-甲基辛酸含量显著高于蒙古羊(P<0.05);小尾寒羊与滩羊、滩羊与同羊、同羊与蒙古羊的4-甲基辛酸含量差异不显著(P>0.05).不同地域的绵羊品种对4-甲基壬酸含量的影响差异不显著(P>0.05).说明,在采用同时蒸馏萃取-气相色谱方法分离测定4-甲基辛酸和4-甲基壬酸时,蒸馏时间为90 min、最低脂肪酸加入量为0.5 mL时,4-甲基辛酸和4-甲基壬酸的回收率效果最好,且不同地域绵羊品种膻味物质含量有一定差异,小尾寒羊脂肪组织中4-甲基辛酸的含量最高.     

提高水产饲料水中稳定性的措施

水产饲料在水中的稳定性是指饲料在水中浸泡一定时间后,保持组成成份不被溶解和不散失的性能.一般以一定时间内饲料在水中的散失量与饲料质量之比的百分数(即散失率)表示,也可用饲料在水中不溃散的最少时间表示.技术上鱼饲料水中散失率小于20%(浸泡30min),对虾饲料水中散失率小于12%(浸泡2h),同时,要求饲料在浸泡的过程中表面形成一种保护膜,使料中的水溶性元素不被溶失.否则,容易造成饲料的浪费,水体的污染,消化吸收的障碍和饵料系数的提高.因此,饲料的水中稳定性是评价渔用饲料的一项重要指标.本文笔者就如何提高水产饲料水中稳定性予以介绍,仅供业内人士参考.     

大肠杆菌cysE和cysM基因的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备

【目的】克隆大肠杆菌半胱氨酸合成酶(包括丝氨酸乙酰转移酶(cysE)和O-乙酰丝氨酸硫化氢解酶(cysM))的基因,对其进行原核表达,并制备相应蛋白的抗体。【方法】用PCR方法从大肠杆菌BL21(DE3)中扩增cysE和cysM基因,构建其原核表达载体pET32a(+)-cysE和pET32a(+)-cysM,对其进行BamHⅠ和SacⅠ双酶切鉴定和测序验证后转入大肠杆菌中进行诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot(以His抗体作为一抗)检测。用纯化的cysE和cysM蛋白作为抗原免疫新西兰大耳白兔,制备多克隆抗体,并通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗体效价。【结果】PCR获得了822bp的cysE基因和912bp的cysM基因。原核表达质粒pET32a(+)-cysE和pET32a(+)-cysM构建成功,并可在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,表达的cysE和cysM重组蛋白分子质量分别为56和58ku。制备的多克隆抗体具有较强的免疫结合活性,抗体滴度均达到1∶102 400。【结论】成功克隆了大肠杆菌cysE和cysM基因,并实现了原核表达,同时制备出了相应的多克隆抗体。     

KAP基因的多态性与辽宁绒山羊经济性状的关系研究

 【目的】研究辽宁绒山羊KAP基因的遗传多态性及其多态位点对绒山羊产绒性状和体重性状的关系，寻找可用于标记辅助选择的分子标记，为下一步分子育种提供理论依据。【方法】采用PCR-SSCP技术研究了绒山羊KAP基因的多态性，分析了4个多态位点不同基因型的最小二乘均值（LSM）、最小二乘效应值（LSE）及其遗传方差；通过标记位点与经济性状的遗传相关预测了选择反应。【结果】产绒量性状上，S1-AB和S1-BB的LSM显著高于S1-AA （P＜0.05）,S2-BB 的LSM显著高于S2-AA和S2-AB（P＜0.05），S3-BB的LSM显著高于S3-AA和S3-AB （P＜0.05），S4-AB的LSM显著高于S4-AA和S4-BB（P＜0.05）；在体重性状上，S2-BB的LSM显著高于S2-AA和S2-AB（P＜0.05）,S3-AA和S3-AB的LSM显著高于S3-BB（P＜0.01）；产绒量性状和体重性状上S2位点的选择反应最大。【结论】产绒量性状上，S1-AB，S1-BB，S3-BB和S4-AB基因型可以作为标记基因型；在体重性状上，S3-AA和S3-AB基因型可以作为标记基因型；在体重和产绒量性状上S2-BB基因型可作为多性状标记辅助选择的标记。     

放牧绵羊微量元素舔砖研制与饲用效果研究

[目的]探索放牧绵羊微量元素舔砖的制作工艺及饲用效果。[方法]以石粉、食盐、饲料级微量元素、膨润土和糖蜜等为原料研制放牧绵羊微量元素饲用舔砖,并研究所制舔砖对新疆细毛羊生产母羊和育成羊的饲用效果。[结果]添砖的最佳制作工艺为：微量元素预混料8％,石粉5％,食盐66％,膨润土9％,糖蜜12％,冲击压力50t,阴干时间9d;试验组育成羊体重、毛长、体高、体长分别增加6．12kg、0．96、4．90、6．99cm,而对照组（自由舔食食盐）分别增加1．60kg、0．36、3．73、5．46em;试验组生产母羊的羔羊初生体重、断奶育成羔羊数、羔羊成活率和母羊繁殖率分别为4．02±0．91k/只、64只、94．1％、128％,而对照组分别为3．81±0．86kg／只、54只、81．8％和108％。[结论]所研制舔砖对绵羊的饲用效果较理想。     

紫云英混作栽培在农牧业中的作用

<正>紫云英是我国重要的有机肥绿肥和早春青饲料来源。近年来,因受稻丛基部低光效应等不良环境影响,其生产力明显下降。随着农村"一优二高"农业和市场商品生产的蓬勃发展,     

苹果按距离疏花疏果技术

苹果按距离疏花疏果技术苹果疏花疏果的标准和方法较多，如按枝果比、叶果比疏果等，现介绍一种按一定距离确定疏花疏果的方法，标准明确，容易掌握。－、间距疏花疏果的标准和方法从花序分离期开始，元帅系、白龙、金冠、乔纳金、北斗、富士系、王林大果型品种可按２０～...