采用IMS-RT-PCR方法快速检测肉制品中大肠杆菌O157

建立免疫磁珠分离法(immunomagnetic separation,IMS)与实时荧光定量PCR(Real-time fluorescent quantitative PCR,RT-PCR)技术相结合快速检测肉制品中肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157的方法。利用改良热酚-水法提取EHEC O157的O-特异性多糖(O-specific polysaccharides,O-SP)作为筛选抗原,制备抗EHEC O157 O-SP单克隆抗体。将PM 3-50纳米磁珠经3-乙基碳二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活化后,与抗EHEC O157 O-SP单克隆抗体结合,得到偶联量为150μg/mg的免疫磁珠。免疫磁珠的最高捕获量为13748.33 CFU/0.2 mg,在肉制品中特异性捕获的最低检测限为2.2 CFU/m L。根据EHEC 0157血清型的特异性基因rfb E(Gen Bank登录号:S83460)设计引物和荧光探针,将IMS与RT-PCR相结合进行检测EHEC O157。当肉制品中EHEC O157含量≥1 CFU/g(2.5 g样本),免疫磁珠能捕获,并通过EC肉汤培养基增殖3h后,RT-PCR即可成功检测,全程只需6-7 h。IMS-RT-PCR相结合的检测方法,在大大缩短了检测时间的基础上,再次降低了EHEC O157的检测限,在防范肉制品源性致病性EHEC O157传染方面具有重要意义。     

茶皂素杀灭钉螺的初步研究

钉螺是日本血吸虫的中间宿主,消灭钉螺是防治人畜血吸虫病的重要环节。本试验采用茶籽中提取的茶皂素杀灭钉螺。试验分５组,每组钉螺３０只,各组分别以４×１０－６,６×１０－６,８×１０－６,１０×１０－６,１５×１０－６浓度的茶皂素醋酸溶液浸没钉螺,浸杀时间分２４ｈ和４８ｈ两组。结果２４ｈ组的钉螺死亡率分别为２３％、３０％、３０％、３７％和３３％;４８ｈ组死亡率分别为６１％、９６％、８５％、９３％和９６％。说明茶皂素对钉螺有一定的杀灭作用。     

地膜覆盖栽培模式对冬小麦种植的影响

黄淮及北部冬麦区是中国小麦主产区,现有的栽培模式下产量已经达到了较高的水平。本研究分析了地膜覆盖对地温、水分利用率、根系活力以及产量性状的影响,结果表明:地膜覆盖栽培模式相对于露地栽培种植冬小麦在不同时期及不同深度土层的地温均有明显的提高,而出苗期及分蘖期差距较拔节期和抽穗期明显;在对0～20、20～40、40～60 cm土层土壤水分含量研究表明地膜覆盖栽培模式在冬小麦生长前期及上层土壤的保墒效果更明显;地膜覆盖栽培冬小麦在测定的3个时期的根系活力均明显高于露地栽培,随着植株生长,差值逐渐减小,但依旧有较大优势;地膜覆盖栽培对冬小麦产量性状均有不同程度的提高,其中结实小穗数增加22%,穗粒数增加37%,穗数增加9.9%,千粒重增加3.4%,产量增加32.2%,产量增加的主要因素是穗粒数,其次是穗数和粒重。地膜覆盖成本低、使用方便、增产幅度大,是提髙作物产量的一项重要措施。建议加大地膜覆盖栽培方式的推广应用。     

不同生育期水分胁迫对杂交水稻光合及产量性状的影响

对两个籼型杂交水稻B优827和冈优725分别在分蘖期、孕穗期、开花期进行不同水分胁迫处理,研究光合速率、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及其同功酶等生理特性和产量变化。结果显示,轻度水分胁迫下,随着胁迫时间的增加,叶片中光合速率下降、活性氧含量上升,SOD活性也相应增加;重度水分胁迫下,随着胁迫时间的增加,光合速率下降迅速,活性氧含量和SOD活性比轻度胁迫上升幅度大,但胁迫第7～9 d SOD酶活性出现降低。不同程度水分胁迫处理收获后其产量大小分别为对照>轻度>重度。对开花期的SOD进行凝胶电泳显示6条同功酶谱带,并随着胁迫程度的增加其亮度明显升高,而且品种间有明显差异。三个时期抗旱能力比较表明,其大小为孕穗期>开花期>分蘖期。B优827在三个时期的轻度、重度水分胁迫下都表现为抗旱能力比冈优725强。     

呋喃它酮代谢物人工抗原及多克隆抗体的制备

本文利用对醛基苯甲酸(CPA)与呋喃它酮代谢物(AMOZ)进行衍生化,得到衍生物CPAMOZ,并通过质谱法对其结构进行确证。然后采用混合酸酐法将CPAMOZ与载体蛋白偶联,采用紫外扫描(UV)法对偶联物进行验证。用偶联成功的人工全抗原(CPAMOZ-BSA)免疫BALB/c小鼠,间接ELISA测定小鼠血清抗体效价为1∶8×104,对NPAMOZ的半数抑制量为26.55μg/L,间接竞争ELISA鉴定小鼠血清多克隆抗体,与NPAMOZ、CPAMOZ的交叉反应率分别为100%、44.8%,与AMOZ、对醛基苯甲酸、对硝基苯甲醛以及同类其他三种药物呋喃妥因、呋喃西林、呋喃唑酮等原药及其代谢物以及代谢物衍生物的交叉反应均小于0.01%。结果表明,制备的AMOZ多克隆抗体效价高、特异性强,灵敏度高,为进一步制备AMOZ单克隆抗体和研制快速筛选检测试剂盒奠定了基础。     

四碘甲状腺原氨酸单克隆抗体的制备

采用碳二亚胺(EDC)法合成游离3,3',5,5'-四碘甲状腺原氨酸(FT4)的完全抗原FT4-BSA和FT4-OVA,将FT4-BSA作为免疫原,免疫BALB/c雌鼠,以FT4-OVA为包被原,利用ELISA方法确定抗FT4多克隆抗体的效价和敏感性。通过杂交瘤技术筛选出分泌抗T4单克隆抗体(T4 McAb)的杂交瘤细胞株,制备腹水单抗。经检测,腹水单抗效价是1∶9.0×104,以此建立的间接竞争ELISA方法,半数抑制质量浓度(IC50)是24.7 ng/mL;FT4单抗与游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)的交叉反应率是4.2%,与促甲状腺激素(TSH)无交叉反应;经抗体类型鉴定,获得的单抗重链属于IgG1亚类,轻链属于κ型。结果表明:本试验制备的单抗特异性强、敏感性高,能够为T4免疫学检测方法的建立和相关研究奠定良好基础。     

高产优质水稻品种B优827干物质积累与分配特性研究

试验以汕优63为对照,初步测定、分析了B优827和汕优63各生育时期干物质积累、变化规律及产量结构差异.从各时期不同器官干物质的积累、分配及发根力、根冠比、根系活力等方面分析比较了B优827和汕优63的异同.B优827中后期干物质的积累量均显著大于汕优63,且各时期不同器官干物质的分配合理,干物质输出量大,有效转化率高,在后期仍能保持较高的茎叶等器官干物质含量和根系活力,抗衰老能力较强.从产量结构看,B优827穗大、粒多、结实率高、千粒重大,产量达到9.06×103kg/hm2,较汕优63增产8.50%.表现了库大、源足、流畅的物质积累和运转特点.     

警犬气味鉴别技术在交通肇事案件中的应用

十年来,唐山市公安局将警犬气味鉴别技术成功应用于交通肇事案件侦破和处理的准确率达到了100,实现了当事人、保险公司、交通事故处理部门和人民法院"四满意",上访率为零,为国家挽回经济损失200     

汕优63在四川省水稻区试中的产量和抗病性分析

对汕优６３自１９８６年至１９９３年在四川省水稻区试验中的产量表现和抗稻瘟病鉴定结果分析表明，汕优６３由产高、稳产、中抗稻瘟病而逐渐丧失抗性，产量呈波动状态，１９９３年降至最低点。指出了现阶段水稻栽培必须以多组合当家。     

呋喃妥因代谢物AHD单抗的制备及鉴定

将呋喃妥因代谢物1-氨基-乙内酰胺脲(AHD)的衍生物1-氨基乙内酰脲-4-羧苯基肟(CPAHD)分别与牛血清蛋白(BSA)和Jeffamine修饰的卵清蛋白(OVA)偶联,经紫外光谱扫描鉴定,成功合成了免疫抗原CPAHD-BSA和包被抗原CPAHD-Jeffamine-OVA。应用杂交瘤技术将免疫鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,获得了稳定分泌抗4-NPAHD单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为B10E7。使用本细胞株制备的McAb对4-NPAHD的半数抑制质量浓度(IC50)为3.65 ng/mL,与同类抗生素及其代谢物未发现交叉反应,显示高度的灵敏性和特异性。本抗体的研制为建立间接竞争酶联免疫方法奠定了基础。