利用SUMO系统高效表达可溶性猪圆环病毒2型Cap蛋白

利用pCold-SUMO可溶性原核表达载体,构建表达猪圆环病毒2型缺失核定位信号肽的Cap基因的重组表达载体pCold-SUMO-dCap,并将其转入Arctic-Express表达菌株中15℃低温诱导表达.表达产物经SDS-PAGE分析,结果表明SUMO-dCap融合蛋白获得了高效表达,可溶性SUMO-dCap融合蛋白约占总融合蛋白的50%;用NI-NTA树脂纯化可溶性的融合蛋白,然后利用SUMO蛋白酶特异性去除SUMO标签,从而得到不含任何标签的dCap蛋白,进一步的Western-blot分析表明,表达的dCap蛋白具有良好的反应原性.     

表面展示鸡传染性支气管炎病毒M41株S1蛋白的重组假型杆状病毒的构建

以鸡传染性支气管炎病毒M41毒株基因序列为模板,利用PCR方法扩增膜定位信号缺失的S1基因(dS1),将其亚克隆入杆状病毒表面展示质粒pBACsurf-1中,再次将S1及gp64的基因片段克隆到杆状病毒转移质粒pFastBacTMDual,得到重组质粒pFastBac-gp64-dS1.将该重组质粒转化到DH10Bac感受态细胞中,获得重组穿梭载体Bacmid-gp64-dS1,提取重组Bacmid质粒,以PCR验证其正确性.将阳性重组Bacmid质粒利用脂质体转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒BV-dS1.间接免疫荧光试验表明,该重组杆状病毒可以Sf9昆虫细胞膜表达鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白.     

别克参多糖提取工艺优化及体外抗氧化活性研究

以热水浸提法提取别克参[Erythronium japonicum Decne.]多糖,采用单因素和正交试验对其提取工艺进行优化,并考察别克参多糖体外清除DPPH、ABTS、羟自由基的能力,对其抗氧化活性进行研究。结果表明,最佳提取工艺为料液比1∶40(m L∶g),提取温度70℃,提取次数3次,提取时间5 h,提取率为41.893 1%。别克参多糖具有一定的抗氧化活性。     

2.5%高效氟氯氰菊酯乳油防治棉铃虫药效试验总结

高效氟氯氰菊酯系氟氯氰菊酯的高效异构体,2.5%高效氟氯氰菊酯乳油与5.7%氟氯氰菊酯乳油在田间用量相同的条件下,前者的对棉铃虫的防治效果及保蕾效果明显高于后者,二者防效间存在着极显著差异。2.5%高效氟氯氰菊酯乳油防治棉铃虫田间推荐使用的剂量每亩为20-30毫升。     

唇香草脂肪酸的GC-MS分析

[目的]对唇香草脂肪酸成分进行GC-MS分析.[方法]利用索氏提取器提取唇香草脂肪酸成分,对脂肪酸进行甲酯化后,运用气相色谱-质谱联用技术,对分离的化合物进行结构分析.[结果]共鉴定出10个化学成分,其中主要成分为9,12,15-十八三烯酸（12.38％）、棕榈酸（6.28％）和棕榈酸甲酯（5.08％）.[结论]该方法分析了唇香草的脂肪酸成分,为唇香草的进一步开发利用提供了依据.     

染色体原位杂交技术与植物体细胞杂种遗传鉴定

染色体原位杂交技术近年发展较快，已广泛应用于植物遗传育种实践。在植物体细胞杂种遗传鉴定方面，染色体原位杂交技术也日益显示出其优势，可用于倍性变异的来源检测，非对称杂种的非对称程度确认，融合双亲的基因组互作，染色体行为分析，以及融合双亲染色体在体细胞杂种有性过程中的传递等。还探讨了染色体原位杂交技术在柑桔远缘体细胞杂种遗传鉴定中的应用前景。     

水稻2个F-box基因及其启动子的表达特性分析

根据基因序列分析确定Os5h和Os7h是F-box家族的两个基因,荧光定量PCR检测Os5h和Os7h在水稻不同组织器官中的表达模式,结果表明其在茎、叶、根、花等组织器官中均有表达,其中Os5h在花中表达量较高,Os7h在茎中表达量较高.对这2个基因的启动子进行了生物信息学预测分析,并构建启动子融合GFP表达载体,由农杆菌介导转入水稻中花11.对转基因水稻植株中GFP观察表明,2个基因的启动子均在水稻根尖有表达.     

新时期农田水利投资主体构建探讨

通过对我国近年来的农田水利建设所面临问题和困境进行梳理,以农田水利融资方式为切入点,构建了博弈、数理模型加以分析研究,提出建立多主体、多渠道、多元化的农田水利基础设施融资机制,针对不同性质的农田水利项目创新水利融资渠道,以促进农田水利事业的良性发展。     

应用生物学软件分析四季橘染色体核型和带型

【目的】为了改进以往人工方式观测染色体精准度的不足,【方法】采用MicroMeasure软件和Image-Pro Plus图像分析软件对4,6-联脒-2-苯基吲哚(DAPI)荧光染色的四季橘(Citrus madurensis Lour.Tseng)体细胞中期染色体分别进行核型分析和三维重建。【结果】得到四季橘的核型公式2n=18=16 m(2SAT)+2 sm,其核型类型为1B型,属于进化中较原始类型;获得四季橘染色体立体图,并依据每条前中期染色体(从短臂到长臂)DAPI荧光强度变化,构建出染色体带型模式图。【结论】该研究利用染色体图像分析软件对染色体进行识别,获得了较丰富的染色体核型数据信息,为柑橘细胞遗传学研究提供了新方法。     

龙须草核型分析和花粉母细胞减数分裂的细胞学研究

【目的】研究和确定禾本科无融合生殖植物——龙须草（Eulaliopsis binata）的染色体数目并进一步判断其倍性。【方法】采用根尖压片法确定龙须草的染色体数目，通过分析龙须草核型和花粉母细胞减数分裂过程中染色体行为确定其倍性水平。【结果】龙须草根尖细胞染色体数目为40条，核型公式为2n＝40＝18m+2sm，属于1B型。龙须草花粉母细胞减数分裂为连续型胞质分裂，终变期染色体构型为20Ⅱ。在其减数分裂过程观察到中期Ⅰ出现不配对染色体（34.3％），后期Ⅰ出现落后染色体，变幅为1～3个（32.4％），末期Ⅱ～四分体时期可观察到明显的微核（20％）等异常现象。【结论】龙须草是异源四倍体植物，具有40条染色体。