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【目的】探究咖啡酸苯乙酯(caffeic acid phenethyl ester,CAPE)通过AMPK/FOXO3a信号通路缓解氧化应激对猪精液的影响及其分子机制。【方法】选取8头成年(1—2岁)、健康状况良好长白种公猪进行鲜精采集,将质检合格的样品混池待用。试验设计如下:首先,在常温基础稀释液中分别添加0、0.02、0.04、0.06、0.08和0.10 g·L-1浓度的CAPE,将精液样品与各个浓度组依次混合后放置室温平衡,随即转入17 ℃电子恒温冰箱进行常温保存。全自动精子分析仪(CASA)测定1—5 d精子运动学参数(总活率与渐进性活力),筛选出最佳适宜浓度为0.06 g·L-1。其次,将0.06 g·L-1 CAPE与400 μmol·L-1的H2O2建立氧化胁迫模型,在第1、3、5天分别采用CASA测定精子总活率与渐进性活力,荧光探针技术评估质膜完整性与顶体完整性,抗氧化试剂盒检测过氧化氢酶(catalase,CAT)与超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,在第5 天利用实时荧光定量 PCR技术测定AMPK/FOXO3a信号通路下游靶向基因(AMPK、FOXO3a、SOD1、SOD2、CAT)及凋亡基因BAX的mRNA表达水平,蛋白免疫印记技术测定AMPK、p-AMPK蛋白表达。【结果】(1)浓度筛选试验中,0.06 g·L-1的CAPE在保存第3 天显著提高精子的总活率并维持至第5天(P<0.05),不仅如此,精子的渐进性活力在第1 天显著高于其他处理组(P<0.05)。(2)氧化胁迫试验中,H2O2处理组的精子质膜完整性、顶体完整性、总活率、渐进性活力、SOD与CAT活性在保存的第5天均极限显著低于空白组与CAPE+H2O2混合组(P<0.001),而空白组与CAPE+H2O2混合组的总活率、顶体完整性、CAT与SOD活性不存在显著差异(P>0.05)。与CAPE+H2O2混合组相比,H2O2处理组AMPK、FOXO3a、SOD1、SOD2、CAT的mRNA表达水平显著降低(P<0.05),BAX的表达水平显著升高(P<0.05),而空白组与CAPE+H2O2混合组的AMPK、SOD1、CAT与BAX不存在显著差异(P>0.05)。在蛋白表达水平中,CAPE+H2O2混合组与H2O2组相比,AMPK、p-AMPK 与p-AMPK/AMPK比率显著提升(P <0.05)。【结论】在常温基础稀释液中添加0.06 g·L-1CAPE可通过促进磷酸化AMPK的表达,诱导AMPK/FOXO3a信号下游抗氧化分子的转录,继而缓解H2O2介导的氧化危害对精液品质产生的影响,延长精液的保存时间,但CAPE保护精子氧化损伤更为深入的分子机制仍需作进一步探究。 相似文献
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利用[C4MIm]HSO4离子液体为催化剂,对其催化文冠果种仁油超临界甲醇酯交换法制备生物柴油进行了研究.考察了醇油摩尔比、反应温度、反应时间、反应压力、催化剂用量及催化剂重复使用对酯交换反应的影响.结果表明,在300℃,醇油摩尔比42∶1,反应时间25 min,反应压力11 MPa,催化剂用量为0.5wt%的优化工艺条件下,产物中甲酯收率可达92.33%,催化剂可重复多次使用. 相似文献
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农机推广工作是农业机械生产进步的基础保证,有利于农业机械的合理购置和科学使用,有效保证了现代化农业生产的合理性。从农机推广工作基本内涵出发,说明了农机推广对农业技术创新的作用,并总结了推广工作对农业经济振兴的积极影响。 相似文献
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抗冻蛋白(antifreeze proteins,AFPs)是一类能抑制冰晶生长并提高机体抗冻功能的蛋白质。AFPs来源广泛,在动物、植物、细菌、真菌等不同生物体内都存在。目前,研究较多、有望被推广应用于畜牧生产实践的主要是具有热滞活性和抑制冰晶重结晶活性的鱼类AFPs。鱼类AFPs的种类主要包括AFPⅠ、AFPⅡ、AFPⅢ、AFPⅣ和抗冻糖蛋白(AFGP)。尽管不同鱼类AFPs都具有抗冻功能,但是它们的组成和结构差异很大,而且对应的基因在核苷酸序列上几乎没有相似性。鱼类AFPs抗冻机制主要包括吸附-抑制学说、刚体能量学说、包合物锚定学说、亲和相互作用偶联团聚学说等。在人类、鱼类、家畜和小鼠等精液的低温保存中,鱼类AFPs可通过维持细胞膜完整性、抑制冰晶生长及减少DNA损伤等保护精子;在卵母细胞、精原细胞、红细胞及动物胚胎的低温保存中,鱼类AFPs可通过阻止冰晶化及抗氧化功能等改善保存效果。作者主要概述了鱼类AFPs种类及其结构特征和作用机制,总结了鱼类AFPs在精液、卵母细胞、精原细胞、红细胞及胚胎低温保存中的应用进展,以期为鱼类AFPs作为候选抗冻剂应用于种质资源保护和畜牧业生产提供科学依据。 相似文献
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近年来,宁夏中宁县农村沼气建设有了长足的发展,建成沼气池1.5万余口,人户率达25%,使用率达40%,为农村开辟了新的洁净能源,改变了农民的生活方式,成为农民增收节支的新途径.但是随着建设数量的逐年扩大,因后续管理维修跟不上已经严重制约着沼气池效益的正常发挥.建立健全农村沼气服务体系,解决沼气使用过程中出现的各种问题已刻不容缓.
1 中宁县农村沼气服务体系的现状
在国家项目资金的支持下,先后两批采购抽渣车74辆,抽渣泵45个,确定服务人员74名,配发沼气服务设备的村达97个,占沼气建设项目村的75%.建立服务网点运行管理制度20条,签订服务合同74份. 相似文献
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根据贵阳市蔬菜产业发展现状,分析了蔬菜产业在生态文明城市建设中的地位和作用,指出了贵阳市蔬菜产业存在的主要问题,提出贵阳市蔬菜产业应突出集群发展,大力实施蔬菜产业园区建设、蔬菜标准化生产、蔬菜品牌建设,积极探索“创新驱动”机制,建立生态效益补偿制度,大力拓宽投资渠道。 相似文献