黄瓜单链DNA结合蛋白基因CsWHY1的克隆及表达分析

[目的]单链DNA结合蛋白Whirly(WHY)是植物体内广泛存在的一类转录因子,在植物叶片衰老等方面具有重要作用。本文旨在克隆黄瓜单链DNA结合蛋白基因CsWHY1,初步分析其表达特征,为黄瓜叶片衰老的功能研究提供参考。[方法]以华北型黄瓜‘9930’‘长春密刺’和‘新泰密刺’为试验材料,克隆CsWHY1的c DNA全长,应用生物信息学方法对该基因进行生物信息学分析,并利用洋葱表皮细胞瞬时表达系统对CsWHY1蛋白进行亚细胞定位,同时通过RT-qPCR技术分析CsWHY1基因在3个黄瓜品种不同组织中的表达模式。[结果]CsWHY1基因包含1个长度为831 bp的开放阅读框(ORF),共编码276个氨基酸,蛋白理论相对分子质量为30.729×10~3,理论等电点(p I)为9.00,属于亲水蛋白。氨基酸序列分析表明,CsWHY1蛋白具有保守的Whirly结构域,在双子叶植物和单子叶植物中高度同源,且与甜瓜亲缘关系最近。亚细胞定位发现CsWHY1蛋白在洋葱表皮的质体上表达。荧光定量PCR分析其表达模式,发现CsWHY1在不同黄瓜品种不同组织中均有表达,叶片中表达量最高,根和茎中表达量较低,其中衰老叶片中的表达量显著高于成熟叶片。[结论]CsWHY1基因的表达具有组织特异性,在衰老叶片高表达,参与了黄瓜叶片衰老进程。     

利用几种园艺作物卷须制片鉴定染色体数目的研究

 以几种园艺作物的卷须为材料研究染色体制片方法, 发现卷须制片预处理和盐酸解离等环节的要求比根尖制片严格。利用所确立的卷须制片程序, 验证了Cucumis属种间杂交新种Cucumis×hytivus Chen & Kirkbride 的体细胞染色体数为2n = 38 , 表明在根尖不易获取或材料珍贵稀少的情况下, 卷须制片法是研究有卷须类植物染色体数目的有效方法。     

辣椒属5个栽培种部分种质亲缘关系的RAPD分析

 采用31个10 bp随机RAPD引物对辣椒属(Capsicum ) 5个栽培种31份材料进行PCR扩增,共扩增出276条带, 其中多态性带244条, 占88.41%。C. annuum 多态性位点比例( PPB) 和Shannon多样性指数( I) 分别为32.97%和0.1599, 表明其遗传多态性较低。31份材料两两不同种质间Jaccard相似系数在0.349～0.952之间, 平均为0.729。聚类分析结果显示: C. annuum 与其它4个栽培种的亲缘关系由近至远分别是C. chinense、C. frutescens、C. pubescens和C. baccatum。对C. annuum 24份不同类型材料聚类分析的结果与形态分类不能完全对应, 说明我国现行主要基于果实形态的变种分类体系不能准确反映C. annuum种质的遗传差异。本研究还发现中国云南西双版纳C. frutescens种质与美洲C. frutescens种质具有较大的扩增片段差异, 为进一步考证我国云南西双版纳地区也是辣椒起源地之一提供了新的证据。     

辐射花粉授粉诱导甜瓜单倍体

为了掌握辐射花粉授粉诱导甜瓜单倍体技术,以5种基因型甜瓜为材料,通过应用γ射线辐射的花粉进行授粉结合胚胎培养,从2种基因型中获得了单倍体植株,单倍体的平均诱导频率为0.29%。这2种基因型分别属于厚皮和薄皮甜瓜类型。花粉的辐射剂量为300Gy和600Gy时,供试材料的平均坐果率分别为50%和10%。辐射剂量为300Gy时,诱导厚皮甜瓜4810和薄皮甜瓜新富玉形成了单倍体植株,单倍体植株的诱导频率分别为0.55%和0.63%;剂量为600Gy时未能诱导供试材料形成单倍体。研究结果表明母本的基因型和花粉的辐射剂量对坐果率和单倍体的产生有一定的影响。此外,对单倍体植株与正常二倍体植株的形态学进行了比较观察,结果表明单倍体植株生长势弱,叶片较小,雄花和雌花均败育。     

魔芋光合性能的研究

利用 FQ 型红外线 CO_2分析仪测定的结果表明,白魔芋(A.albusP.Y.Liu et J.F.Chen)最大光合效率为8.20 mg CO_2/dm~2·hr,低于普通作物如水稻、甘薯、菜豆等光合效率的一半。另一方面,阴性植物如蜂斗叶、襄荷、款冬等光合效率只有2—5mg CO_2/dm~2·hr。魔芋光饱和点为20klx,而阳性作物如水稻光饱和点达50—60klx。因此,魔芋应属于半阴性(semi-shading)植物。用不同层数纱布制成的荫蔽罩作荫蔽栽培,结果表明荫蔽和非荫蔽(对照)间产量差异达极显著。对照病毁率达87.5%,而三层纱布荫蔽(4.9%的相对照度)的发病率只有12.5%。     

黄瓜耐热性研究进展

阐述了高温胁迫对黄瓜生理生化过程、细胞膜和相关酶、外部形态和主要经济性状的影响,讨论了黄瓜耐热性遗传规律,总结了耐热性鉴定和提高耐热性的方法,并提出了今后黄瓜耐热性研究的建议。     

辣椒始花节位遗传研究

 应用植物数量性状主基因+多基因混合遗传模型和经典遗传学方法对特早熟辣椒‘B₉₄₃₁ ’与‘吉林长椒’杂交组合多个世代群体始花节位进行了联合分析, 结果表明: ‘B₉₄₃₁ ’始花节位受1对隐性等位主基因控制, B₉₄₃₁ ×吉林长椒始花节位遗传符合1对主基因+多基因混合遗传模型。该杂交组合的B₁、B₂ 和F₂ 群体主基因遗传率分别为83.72%、76.56%和86.63% , 多基因遗传率分别为10.96%、18.58%和7.94%。     

黄瓜株型性状分子基础研究进展

围绕近年来黄瓜株型相关性状在遗传规律、QTL定位以及基因克隆等方面取得的研究结果,从株高、有限/无限生长能力、下胚轴长度、叶形、叶片大小、侧枝分生能力、卷须发育共7个方面在分子基础研究上取得的进展进行综述,分析相关研究中存在的问题及不足,并对理想株型进行展望,以期为黄瓜理想株型的选育提供参考。     

利用卷须制片确认佛手瓜染色体数目

佛手瓜 [Ｓｅｃｈｉｕｍｄｅｕｌｅ (Ｊａｃｑ .)Ｓｗａｒｔｚ]是我国南方一种具有药用价值的特色蔬菜 ,一个瓜只结一粒种子 ,并且其种子脱离果肉不能正常萌发[1 ] ,很难获得足够多的幼根根尖来研究染色体。此外 ,佛手瓜染色体小且染色能力弱[2 ] ,进一步增加了细胞学研究的难度 ,使得佛手瓜染色体数目的研究结果仍不统一 ( 2ｎ =2 6[3] 和 2 8[4] )。本文首次利用数量众多的卷须代替根尖作为制片材料 ,对佛手瓜的染色体数目进行准确鉴定 ,为进一步开展佛手瓜遗传育种奠定细胞学基础。1　材料与方法本文试材佛手瓜系南京农业大学园艺圃中生…     

黄瓜DnaJ基因家族鉴定及对高温胁迫的表达响应

[目的]本文旨在研究黄瓜热激蛋白DnaJ(CsDnaJ)的家族基因鉴定,并分析其在高温胁迫环境下的响应模式.[方法]利用生物信息学软件及黄瓜的全基因组测序数据库、公共数据库对CsDnaJ进行基因家族成员、染色体位置、蛋白特性、结构特征、进化及复制模式和组织表达特性分析,同时通过实时定量PCR技术分析其在高温胁迫环境下的...