肠型点状气单胞菌和鱼害粘球菌融合子的构建

为探索鱼类病原菌融合疫苗制备的可行性,以肠型点状气单细胞菌58-20-9菌株和鱼害粘球菌G4菌株作为初发菌株进行原生质体融合,构建融合子.在酶解温度37℃下,筛选出最适酶解时间为40min,最适溶菌酶质量浓度为4mg/mL.以PEG为促融剂的条件下,58-20-9菌株与G4菌株的原生质体进行了融合,58-20-9菌株的原生质体形成率为54.7%,原生质体再生率为18.2%,G4菌株的原生质体形成率为50.8%,原生质体再生率为12.2%,初筛的原生质体融合率为4‰.点种500个初筛融合子菌落在双抗培养基上连续传代12次,得到1个稳定的融合子菌落,其稳定率为0.2%.     

HA基因138位点突变提高H5亚型禽流感疫苗候选株在鸡胚中的繁殖能力

目前,H5亚型禽流感疫苗的大规模生产仍使用鸡胚培养的重组病毒灭活疫苗.为加深对重组病毒在鸡胚中繁殖适应性分子机制的理解,并获得在鸡胚中的高产疫苗候选株,以反向遗传技术构建了H5亚型禽流感疫苗候选株SF/H5N1,并在鸡胚尿囊腔中连续传代.同时对第1、6、7和10代病毒的全基因组序列进行了分析和发生点突变片段的结构模拟.结果均表明,HA片段138位丙氨酸(A)向丝氨酸(S)的突变与重组病毒SF/H5N1在鸡胚传代过程中繁殖性能升高相关.对不同来源重组病毒LF/H5N1进行A138S突变,产生了相似的效果.并且,A138S突变未明显改变重组病毒的抗原性和对鸡胚的致病力.因此,A138S突变对H5亚型禽流感疫苗候选株的鸡胚适应性具有重要影响,在疫苗生产中具有应用价值.     

一株鸭源H4N8亚型禽流感病毒的全基因测序及遗传进化分析

【目的】禽流感病毒(avian influenza virus, AIV)根据其表面糖蛋白血凝素(hemagglutinin, HA)和神经氨酸(neuraminidase, NA)的不同,可分为16种HA和9种NA亚型。根据其致病力的差异可分为高致病性禽流感病毒(highly pathogenic avian influenza virus, HPAIV)和低致病性禽流感病毒(low pathogenic avian influenza virus, LPAIV)。虽然H4亚型禽流感病毒为低致病性AIV,感染家禽表现为无症状感染,但其对禽类甚至是哺乳动物是一个潜在的威胁,因此必须要加强对H4亚型禽流感病毒的调查监控。【方法】为了探讨H4亚型禽流感病毒的分子特征及遗传演化规律,对2010年在中国华东地区某活禽市场进行流行病学监测时分离到的一株H4N8亚型禽流感病毒A/duck/Nanjing/1102/2010（简称DK/NJ /1102）进行了全基因组序列测定及遗传进化分析。通过常规的血清学试验确定其HA亚型,提取病毒总RNA,并通过RT-PCR方法分别扩增出其各基因片段,连接 pGEM-Teasy载体上后进行序列测定。利用GenBank中的BLAST工具进行核苷酸序列的同源性分析,并与GeneBank 中的H4亚型流感病毒及其它相关序列进行遗传进化分析。【结果】DK/NJ/1102的HA基因与Mongolia 分离株A/duck/Mongolia/274/2007(H4N3)的核苷酸同源性最高,为98.9%。推导的氨基酸剪切位点序列为“P-E-K-A-S-R-G”,符合典型的低致病性禽流感病毒特征;NA基因与华东地区分离的鸭源毒株A/Duck/Eastern China/n91/2009(H3N8)核苷酸同源性最高,达99.4%;PB1、PA和NP基因均与H1亚型禽流感病毒亲缘关系最近;M基因与A/wild duck/Korea/CSM4-12/2009(H5N1)核苷酸同源性最高,高达99.9%;NS基因与韩国2009年分离的H7N7亚型流感病毒遗传距离最近。NS1蛋白的80-84处氨基酸没有发生氨基酸缺失。【结论】该H4N8亚型禽流感病毒基因组构成比较复杂,可能是一株多基因重组病毒。     

固体碱KF/CuAl-LDOs催化制备生物柴油工艺的研究

采用共沉淀法合成铜铝水滑石,并以此为载体负载氟化钾(KF)制备了负载型铜铝水滑石催化剂(KF/CuAl-LDOs),用于大豆油酯交换制备生物柴油.考察了铜铝摩尔比、催化剂用量、KF负载量、醇油摩尔比、反应温度和反应时间等因素对该反应的影响,通过正交试验得到了反应的最佳条件:铜-铝摩尔比为3:1,催化剂用量为3％,KF负...     

稻穗枝梗和颖花形成的基因型及播期效应分析

以71个不同基因型水稻为材料,通过大田条件下的分期播种,于齐穗期考查了稻穗枝梗和颖花形成有关指标,分析了各指标的基因型和播期效应及其相互关系。结果表明： 1）各基因型间现存一次枝梗数、一次枝梗退化数、现存颖花数、一次枝梗分化数、现存二次枝梗数的基因型值和播期效应值差异均显著,且5个指标的差异仅与特定的基因型有关,而与其是否属于杂交组合、常规品种和雄性不育系等类型无关。2）现存一次枝梗数、现存二次枝梗数、现存颖花数、一次枝梗分化数4个指标的基因型值较大,播期效应值较小;一次枝梗退化数播期效应值较大。3）单穗颖花现存数（即每穗总粒数）与现存一次枝梗数、一次枝梗分化数、现存二次枝梗数呈密切正相关,与一次枝梗退化数相关性小,现存一次枝梗数主要通过改变现存二次枝梗数来影响单穗颖花现存数。另外,还综合分析了供试71个材料单穗颖花现存数的基因型值和播期效应值,并对其大穗潜力进行了评价。     

不同蛋白及喷浆玉米皮水平对斑点叉尾鮰生长性能、体色及肠道健康的影响

为精确斑点叉尾鮰蛋白需求量及其饲料中喷浆玉米皮的添加量,试验以初始体重（50.0±0.2）g的斑点叉尾鮰作为试验对象,在基础饲料上添加0%（对照组,CON组）、3%(CG3组)、6%(CG6组)和9%(CG9组)的喷浆玉米皮配制成蛋白含量依次为34%、35%、33%、32%的四种饲料,研究其对斑点叉尾鮰（Ictalurus punctatus）生长、体色及肠道健康的影响,每组5个重复,每个重复50尾,试验持续8周。结果表明：各组间斑点叉尾鮰增重率无显著差异（P>0.05）。与对照组相比,CG3、CG6、CG9组斑点叉尾鮰腹脂率显著降低（P <0.05）,但CG3、CG6、CG9组斑点叉尾鮰背部肌肉b*值均显著提高（P <0.05）;CON、CG3组斑点叉尾鮰肠道肌层厚度显著高于CG6、CG9组（P <0.05）;各组间斑点叉尾鮰肠道优势菌门均为梭杆菌门、拟杆菌门、厚壁菌门和变形菌门,与对照组相比,CG9组使斑点叉尾鮰肠道梭杆菌门、厚壁菌门相对丰度下降,变形菌门相对丰度上升。综上所述,在本试验条件下,饲料中添加喷浆玉米皮低于9%（粗蛋白质水平32%）时不影响班点叉...     

割茬再生处理对培矮64S育性的影响

对光温敏核不育水稻培矮64S进行了割茬再生处理,比较了再生稻与同期抽穗的头季稻的育性差异,结果表明:无论是长日高温下还是短日低温下,割茬再生处理均可明显提高培矮64S花粉可育度;短日低温下,割茬再生处理对培矮64S套袋自交结实率的提高有一定的效果,但幅度远小于花粉可育度而长日高温下割茬再生处理对培矮64S套袋自交结实率基本无影响.     

不同投喂量对两种规格黄鳝生长性能及体成分的影响

本试验设定不同的投喂量,饲喂大、小两种规格的黄鳝,通过对其生长性能和体成分进行合理的分析,根据综合数据做出科学的、合理的评价,以得到两种规格黄鳝最适宜的投喂量.     

细胞来源流感疫苗研究进展

当面临高致病性流感全球大流行时,传统的鸡胚生产方法可能不足以满足疫苗市场的需求.研究机构和疫苗公司正在合作开发新的生产技术,以达到省时高效的目的.细胞培养作为鸡胚生产方式的一种补充或替代方法,不仅适用于人用疫苗的生产,而且正逐渐引起禽用疫苗生产商的重视.本文对细胞培养疫苗生产方式的特征和优点,以及近年来利用Vero、MDCK和PER.C6细胞生产疫苗的研究进展作一综述.