牛结节性皮肤病病毒L1R基因的原核表达及多克隆抗体的制备

为了获得牛结节性皮肤病病毒(Lumpy skin disease virus, LSDV)L1R蛋白及其多克隆抗体,试验根据GenBank已公布的LSDV L1R蛋白的编码区合成序列,将合成序列插入原核表达质粒pET-32a,构建pET32a-L1R重组阳性质粒,转化至BL21(DE3)大肠杆菌感受态,用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达。对诱导表达的重组蛋白采用镍离子亲和层析柱进行纯化,通过透析进行纯化蛋白的复性,用Western-blot对复性后的蛋白进行鉴定。将鉴定成功的蛋白免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体,采用间接ELISA测定多克隆抗体的效价。结果表明：L1R蛋白在大肠杆菌中高效表达,在1 mmol/L IPTG、37℃、200 r/min条件下,主要以包涵体的形式表达且纯度较高,表达的蛋白质分子质量约为40 ku,与预期的蛋白质大小一致。纯化后的L1R重组蛋白能被His单克隆抗体及山羊痘阳性血清识别,反应原性良好。制备的小鼠抗LSDV L1R多克隆抗体效价可达1∶102 400,免疫原性良好。说明试验成功在大肠杆菌中表达LSDV L1R重组蛋白,并制备获得多克隆抗...     

林业调查规划设计中3s技术的实际应用初探

随着科学技术的不断发展,林业调查的手段和能力也在逐渐上升,能够有效实现数据采集的精准化和系统化。其中值得注意的是3S技术的应用与发展,通过相应技术更新和转变能够有效降低调查进程中的局误差,实现高精度的测量和研究,为林业调查提供准确的资料,满足相应的林业管理需求。     

催化活化法制备杉木基超高比表面积颗粒活性炭

以杉木屑为原料,在传统磷酸法工艺过程中添加辅助催化剂浓硫酸,制备超高比表面积颗粒活性炭。研究浓硫酸添加量、浸渍时间以及浸渍比对颗粒活性炭比表面积的影响。结果表明,浓硫酸添加量和浸渍时间在磷酸法制备超高比表面积颗粒活性炭中发挥着重要的作用,当浸渍时间为15 h、浓硫酸添加量为6%、浸渍比为2.1∶1和浸渍时间为5 h、浓硫酸添加量为3%、浸渍比为2.1∶1时,分别制备出比表面积为2 825、2 811 m2/g的颗粒活性炭、总孔容分别为1.60、1.59 cm3/g,丁烷工作容量分别为154.8、157.3 g/L。     

草甸草原关键物种功能性状对长期放牧和停牧恢复的响应

【目的】植物功能性状对环境变化及外部干扰的响应，反映了植物的表型塑性、生存策略及适应能力。通过长期放牧条件下草原植物功能性状的变化及停止放牧后的恢复响应研究，为草原恢复管理的研究提供理论依据。【方法】探究了生长季不同放牧梯度下呼伦贝尔草甸草原6个关键物种（羊草、日阴菅、糙隐子草、斜茎黄芪、裂叶蒿、细叶白头翁）叶片功能性状（叶片干重、叶片含水量、叶面积、比叶面积、叶片氮含量、叶片磷含量、叶片C/N、叶片N/P）的变化，以及生长季停止放牧后的草甸草原关键物种叶片功能性状的即时恢复响应。【结果】（1）6个关键物种的相对生物量和重要值随放牧强度增加而减小，轻度和重度放牧强度停止放牧后的值大于继续放牧。（2）6个关键物种的叶片干重、叶片C/N整体随放牧强度的增加呈减小趋势；叶片含水量、比叶面积、叶片氮含量整体随放牧强度的增加呈增大趋势；除裂叶蒿外各物种叶面积都随放牧强度增加而减小；叶片磷含量除糙引子草外都随放牧强度增加呈增大趋势；随放牧强度增加，羊草、日阴菅、糙隐子草、细叶白头翁的叶片N/P整体呈增大趋势，而斜茎黄芪、裂叶蒿呈减小趋势。（3）停止放牧后，重度放牧的恢复程度高于轻度放牧，6个关键物...     

布鲁菌Rev.1株eryA基因的原核表达及间接ELISA方法的建立

通过对布鲁菌优势抗原eryA基因进行原核表达,在获得目的蛋白的基础上建立以该蛋白为包被抗原的间接ELISA方法。构建原核表达载体pET-30a-eryA,并将其转入大肠杆菌BL21（DE3）,IPTG诱导表达,镍柱亲和纯化eryA重组蛋白,SDS-PAGE 鉴定纯化蛋白,Western-Blotting检测反应原性后建立间接ELISA方法。反应条件优化后,抗原包被浓度为0.312 5 μg/mL,37 ℃包被2 h;封闭液为5%猪源明胶,37 ℃作用2 h;血清稀释度为1∶100,37 ℃作用1 h;酶标抗体稀释度为1∶8 000,37 ℃作用45 min。血清稀释度为1∶1 600时,仍然检测为阳性,证明建立的间接ELISA方法灵敏性良好;其他菌种及病毒经过特异性检测,均为阴性,证明建立的间接ELISA方法特异性良好;通过重复性检测,批间及批内变异系数均小于10%,证明建立的间接ELISA方法重复性良好。检测临床血清样品,建立的方法与试管凝集试验总符合率为95.7%,证明该方法可初步应用于临床诊断。     

PCV2感染对仔猪NO-NOS系统的动态影响

将19头PCV2和PRRSV血清抗体阴性的普通断奶仔猪分为对照组(4头)和攻毒组(15头),攻毒组每头仔猪滴鼻接种PCV2病毒悬液4mL(5×105 TCID50/mL)并用KLH刺激,分别在攻毒后14、21、35d各扑杀5头仔猪采集血清和脾脏、淋巴结、胸腺(对照组4头在攻毒当天扑杀)。检测各种组织中NO、TNOS和iNOS的含量。结果显示,攻毒猪各组织中NO含量均在攻毒后14d显著升高(P<0.05),然后缓慢下降;血清和3种免疫器官中NOS(包括TNOS和iNOS)活性的变化趋势比较一致,均表现出先升高然后再逐渐降低的特点。此外,iNOS活性变化与其相应的组织中NO含量呈显著正相关(P<0.01)。结果表明,PCV2在感染早期(1～14d)可激活仔猪多种组织中NO-NOS系统,中后期逐渐恢复,这种变化与PCV2所致的组织损伤密切相关,因此,NO-NOS系统可能是PCV2相关疾病发生发展的重要信号。     

磁性核壳纳米材料的制备及其吸油性研究

利用溶剂热法制备了高分散Fe3O4纳米微球,以此为核,制备了2种核壳型亲水纳米微球Fe3O4@SiO2和Fe3O4@mSiO2,通过TEM、FTIR和N2吸脱附等温曲线来表征微球,并通过表面疏水改性改变微球表面性质得到2种疏水材料:材料1和材料2.将这2种疏水材料应用于机油、柴油的吸油性研究.结果表明:具有介孔结构的材料2对柴油的吸油率可达9.67g/g,对机油的吸油率可达15.03g/g,材料再生后可重复使用5~6次.     

提高灌区农业灌溉工程效益的策略探究

现阶段我国经济社会发展迅速,各地加大力度建设农业灌溉设施。基于此,本文就提高灌区农业灌溉工程效益展开研究,首先阐述了灌溉工程的价值,其次对其中存在的问题进行分析,最后提出了一些提高工程效益的措施,以供参考。     

野生和栽培茭白二化螟感病率与微生物多样性分析

为了明确茭白二化螟的感病死亡率以及携带的优势微生物种类，本文在野生茭白和栽培茭白中共采集二化螟越冬幼虫6000余头，发现二化螟的感病死亡率分别为19.98%和17.00%，二者之间没有显著差异，表明栽培措施没有影响昆虫病原菌的流行。采用18S rRNA和16S rRNA测序方法对死虫标本中的真菌和细菌组成和丰度进行了研究，结果表明95%以上个体的优势真菌为白僵菌，相对丰度在90%以上，没有检出绿僵菌；优势细菌科为肠杆菌科、肠球菌科、根瘤菌科和丛毛单胞菌科，丰度分别为19.37%、17.37%、7.04%和5.04%，含昆虫病原细菌的芽胞杆菌科和梭菌科细菌的丰度只有1.44%和0.41%，表明细菌不是致死的主要原因。本研究证明白僵菌是越冬期茭白二化螟的优势病原菌。因此，在茭白田中开展以菌治虫首选使用白僵菌。