辣椒全基因组测序材料Capsicum annuum cv.CM334再生体系的建立

选用辣椒全基因组测序材料Capsicum annuum cv. CM334、高抗CMV辣椒材料C. frutescens cv.PBC688和高感CMV辣椒材料C. annuum cv. G29,以其幼苗的子叶、下胚轴作为外植体,研究了不同激素组合对辣椒组织培养再生的影响。结果显示:最佳的芽分化培养基为MS+5.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L IAA+5000.0mg/L DJ+10.0 mg/L AgNO_3;促进再生芽伸长的最优培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L IAA+2.0 mg/L GA_3+5000.0 mg/L DJ+10. 0 mg/L AgNO_3; 3个基因型子叶的平均芽分化率(5.9%)高于下胚轴的(2.4%);CM334的再生能力最强,以子叶和下胚轴作为外植体时,其芽分化率分别为10.74%和4.85%,芽伸长率分别为54.54%和53.33%,分别获得可移栽的生根再生植株30株和8株; PBC688和G29的再生能力较差,只获得少量的再生植株。     

核酸疫苗上游生产工艺探讨

核酸疫苗为科研人员在疾病预防控制方面开辟了新的途径，然而目前大规模制备既符合相关质量要求，又经济的重组质粒 DNA，特别是药品级重组质粒 DNA，仍是制约核酸疫苗和基因治疗研究的瓶颈。如何获得合格的药用质粒 DNA 并建立大规模生产平台成为一个重要的研究课题，论文综述了近年来核酸疫苗上游生产工艺的技术进展，以供参考。     

产肠毒素性大肠杆菌K88与K99菌毛蛋白的串联表达

根据GenBank中发表的E.coli K88、K99基因序列,分别设计合成1对引物.利用PCR技术,以大肠杆菌C83907和C83644的质粒为模板分别扩增不含信号肽的K88及K99基因.通过分离、纯化、限制性核酸内切酶酶切,连接和转化,构建了含K88-K99串联表达载体的重组菌株BL21(DE3)(pETK88CK99).结果显示,经酶切,PCR鉴定和DNA序列分析,证实了构建的重组质粒pETK88CK99中含有K88K99融合基因,且基因序列和阅读框架均正确.经过SDS-PAGE分析,串联表达蛋白含量占菌体蛋白的40%左右,经Western blotting检测,该串联表达蛋白能被大肠杆菌K88、K99标准血清识别.结果表明,构建的重组菌株可以作为预防新生仔猪大肠杆菌性腹泻基因工程疫苗的候选菌株.     

逆转录病毒载体及其在动物病毒病的研究进展

逆转录病毒系统由于其病毒的高感染效率,在RNA干扰中的应用越来越多,在对基因功能的研究中起了很大的作用.逆转录病毒表达系统是一种新的重组蛋白高效表达系统,由逆转录病毒载体、包膜蛋白载体和包装细胞系组成.逆转录病毒载体具有基因组结构简单,便于基因操作、转染效率高、容量较大、宿主范围广、易于分离等优点,在外源基因表达、基因...     

新城疫病毒SDWF2003株F基因的克隆与分子特征分析

将新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）SDWF2003株经10日龄SPF鸡胚增殖后,提取病毒基因组RNA,并以此为模板,RT-PCR扩增获得与F基因预期大小一致的DNA片段,亚克隆到pMD18-T载体并酶切鉴定正确后进行测序。软件分析显示：基因全长1662bp,编码553个氨基酸,裂解住点为^112R-R-Q-K-R-F^117,是典型强毒株氨基酸序列结构;此分离毒株属于基因Ⅶ型,该型F蛋白第101位、第121位特征性氨基酸残基分别是K（赖氨酸）和V（缬氨酸）,而本研究分离病毒F蛋白第101位、第121位分别是Q（谷氨酰胺）和V（缬氨酸）;同源性比较,与LaSota、F48E9、Ch99核苷酸同源性分别为84．4％、87．1％、98．9％,氨基酸同源性分别为88．3％、91．7％、98．4％。     

辣椒新品种苏椒27号的选育

苏椒27号是以羊角椒自交系09Q37为母本、以甜椒自交系G09005为父本配制的一代杂种。中熟,始花节位为第12节,果实牛角形,长19.0 cm,果肩宽4.8 cm,果肉厚度0.37 cm,单果质量95.2 g,果表光滑,青熟果浅绿色,辣味淡,质脆,商品性好。每667 m2产量约3 850 kg,适于长江中下游地区春季保护地栽培。     

平台扫描仪结合ImageJ软件测定番茄叶面积

利用扫描仪获取标准图形,对ImageJ软件测定番茄叶面积的准确性进行了验证.发现不同的扫描分辨率(100、200和300DPI)对图形面积没有显著影响,200DPI的分辨率为较好的扫描参数.以番茄叶片为试材,对剪纸法与图像处理法进行比较,发现二者差异不显著.在此基础上,建立了一种扫描仪结合ImageJ软件测定番茄叶面积的方法.     

副猪嗜血杆菌Shandong2007株的分离与鉴定

对1例临床症状、病理剖检变化疑似副猪嗜血杆菌病的仔猪病料进行实验室诊断,进行了细菌形态观察、培养特性和生化特性等鉴定,根据副猪嗜血杆菌的16 S rRNA基因设计特异性引物进行PCR扩增,将822 bp片段连入T-载体后测序,再通过GenBank进行比对分析.生化试验结果为接触酶阳性,氧化酶和H2S阴性;生长需要NAD,发酵果糖、半乳糖和蔗糖等,不分解D-甘露醇和D-山梨醇.药敏试验显示,对氨苄青霉素、丁胺卡那霉素等药物敏感.PCR鉴定结果与国外副猪嗜血杆菌菌株16 S rRNA序列的同源性为99%以上,初步鉴定该分离菌株为副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps).     

番茄抗B型烟粉虱相关叶表腺毛性状及其次生代谢物质分析

以2份普通番茄、3份多毛番茄、1份潘那利番茄和2份醋栗番茄为试验材料,采用离体叶片接B型烟粉虱的方法,以番茄叶背表面虫卵量作为抗性鉴定指标,进行抗虫性鉴定;利用扫描电子显微镜观察番茄叶表腺毛形态,解剖镜计数叶片背面不同类型腺毛密度;利用GC–MS分析叶表次生代谢物质种类和相对含量;使用SAS V8进行方差分析(ANOVA)和多个变量间的简单相关性分析。抗虫性鉴定发现3份多毛番茄‘LA2329’、‘LA1777’、‘PI134417’和潘那利番茄‘LA0716’具有稳定的抗虫性,醋栗番茄‘TO937’随植株生长抗性相对增强,普通番茄‘9706’、‘LA3556’和醋栗番茄‘PI126933’不具有抗虫性。番茄叶表腺毛类型和密度分析显示:抗虫的3份多毛番茄叶表主要为有腺体的Ⅳ型和Ⅵ型腺毛,二者密度分别介于8.0~15.4和4.7~19.5个·mm~(-2);抗虫的潘那利番茄‘LA0716’和醋栗番茄‘TO937’叶表主要为有腺体的Ⅳ型腺毛,密度分别为15.4和6.7个·mm~(-2);不抗虫的普通番茄‘9706’、‘LA3556’和醋栗番茄‘PI126933’叶表主要为无腺体Ⅴ型腺毛,密度介于3.6~10.6个·mm~(-2),有腺体的Ⅳ型和Ⅵ型腺毛密度显著低于5份抗虫番茄材料,分别介于0~1.5和2.3~4.1个·mm~(-2)。番茄叶表次生代谢物质种类和含量分析显示:3份多毛番茄叶表萜类物质含量显著高于其他番茄材料;甲基酮类物质仅存在于多毛番茄‘PI134417’中;叶表蜡质含量在抗虫和感虫番茄材料间无显著差异。多个变量间的简单相关性分析显示:番茄叶表有腺体的Ⅳ型腺毛密度和萜类物质含量与叶表烟粉虱虫卵量负相关;无腺体腺毛密度与虫卵量显著正相关;有腺体的Ⅵ型腺毛密度与叶表萜类物质含量正相关,与虫卵量无相关性;叶表蜡质与8 h虫卵量负相关,与24 h虫卵量无相关性。叶表Ⅳ型腺毛密度和萜类物质含量可作为抗烟粉虱鉴定指标。烟粉虱倾向于在Ⅴ型腺毛浓密的番茄材料上产卵,抗烟粉虱育种时应注意剔除Ⅴ型腺毛密度较高的植株。Ⅵ型腺毛密度对烟粉虱无直接抗性,其主要是通过其产生的萜类物质发挥抗性。叶表蜡质短期内可以发挥一定抗性,无长效性。