马立克氏病病毒囊膜糖蛋白B抗原Ⅰ型特异性和群共同性决定簇的单克隆抗体

用能表达马立克氏病病毒（ＭＤＶ）糖蛋白Ｂ（ｇＢ）的重组杆状病毒感染的Ｓｆ９细胞免疫小鼠，制备针对ＭＤＶｇＢ的单克隆抗体。以Ⅰ型马立克氏病病毒ＧＡ株感染的鸡胚成纤维细胞作为检测抗原，同时以免疫荧光试验（ＩＦＡ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）来筛选杂交瘤细胞，结果获得了ＩＦＡ和ＥＬＩＳＡ均为阳性的２株单克隆抗体细胞株，定名为ＢＡ４和ＢＤ８。在ＩＦＡ和免疫沉淀试验中，单抗ＢＤ８与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型ＭＤＶ均呈阳性反应；单抗ＢＡ４只对Ⅰ型ＭＤＶ（包括ＣＶＩ９８８疫苗株）呈阳性反应。免疫沉淀反应进一步确证２株单抗识别的是ＭＤＶ糖蛋白Ｂ抗原。     

浙江省海宁市直播稻田千金子大发生原因及治理对策

浙江省海宁市恶性杂草千金子发生量大,发生期早,＂草大苗小＂现象较为突出。直播稻田千金子的治理,应积极贯彻＂预防为主,综合防治＂的植保方针,从生态学观点出发,以优化作物生态环境为中心,根据千金子的发生特点,建立以化学除草为主,辅以其他农业措施的系列综合配套防除体系,才能有效控制千金子发生,降低其危害。     

55％硅唑·多菌灵可湿性粉剂防治辣（甜）椒炭疽病的药效试验

使用55％硅唑·多菌灵WP75g／667m2药液能有效防治辣（甜）椒炭疽病。试验结果表明,在辣椒炭疽病发病初期,连续用药3次对炭疽病防效达84．28％,能有效控制辣（甜）椒炭疽病的蔓延,可作为防治该病的备选农药。     

应用拌棉醇处理种子防治玉米细菌性枯萎病的初步研究

玉米细菌病 Erwinia stewartii(E.FSmith)Dye 是我国重要的对外检疫对象之一。带病种子是该病远距离传播的主要途径。随着我国农业现代化的需要,国际间的品种交流日趋频繁,为了防止这一病害传入我国,除了加强种子检疫工作外,辅以种子消毒处理也是防止这一病害传入的重要措施。据文献报道,用0.1%,升汞浸种20分钟可以减少种子带菌率,但是因种子内部带     

斑点免疫金渗滤法检测猪生殖与呼吸综合征抗体的研究

应用提纯的猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗原包被硝酸纤维素膜，然后用胶体金标记的金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)建立了检测PRRS抗体水平的斑点免疫金渗滤法(DIGFA)。该法通过胶体金标记SPA直接显色，阳性者出现红色斑点，整个试验过程仅需5min即可判断结果；与猪瘟、猪伪狂犬病、猪细小病毒病阳性血清不发生交叉反应；纯化PRRSV抗原的最低检测量为0．0553mg／mL，即55．3ng／点。对200份猪血清用该法与ELISA同时进行PRRS抗体检测，两种方法的符合率达98％。     

江门市水稻病虫绿色防控的实践

江门市是珠江三角洲重要的农产品生产基地,是农业大市,水稻全年种植面积18.67万hm2,总产90万t.水稻病虫害常年发生面积60万hm2次,防治面积73.33万hm2次,实际产量损失7万t.2010年以来,全市各级农业部门高度重视水稻病虫害绿色防控技术的推广应用,取得良好成效.     

不同沼液灌溉量对西瓜产量及土壤环境的影响

对规模养殖场沼液灌溉西瓜进行田间试验,结果表明,不同沼液灌溉量处理与常规施用化肥的对照处理相比,对土壤质量基本无影响,用大量沼液浇灌替代化肥使用,对西瓜产量基本无影响,合理施用沼液进行农田灌溉不仅可以减轻规模养殖场污水处理的排放压力,还可以减少化肥施用量,提高西瓜的品质。     

荧光定量RT-PCR检测H5亚型禽流感病毒方法的建立与验证

根据H5亚型禽流感病毒HA基因上的保守序列,设计合成引物,以H5亚型禽流感病毒HA基因重组质粒为标准品绘制标准曲线,建立了荧光定量逆转录聚合酶链反应检测方法。结果表明,本试验建立的标准曲线循环阈值(Ct值)与模板浓度具有良好的线性关系,相关系数为0.995,灵敏度约为8拷贝/μL,相当于8个AIV颗粒,对新城疫病毒和其他禽病病毒无交叉反应,特异性好、重复性佳,为H5亚型禽流感病毒检测提供了一种特异、敏感、快速、低成本、高通量、生物安全性好的定量检测方法。对178份临床泄殖腔棉拭子样品的检测,该方法结果与经典病毒分离方法符合率大于90.0%,在禽流感病毒临床样品快速筛检、流行病学监测等方面显示了良好的应用前景。     

油菜根际内生真菌PI-020的分离鉴定和定殖促生作用

为挖掘农业微生物资源,分离筛选具有促进植物生长作用的内生菌,采用选择性培养基,通过组织分离法自油菜根系皮层组织分离共生真菌,再以无菌油菜苗根际定殖筛选、纯化,获得油菜根际内生真菌PI-020。通过培养形态学观察和转录延伸因子Tef-1α基因序列分析,明确PI-020为梨形孢属(Piriformospora)真菌,与已鉴定种印度梨形孢(P.indica)同源性达98.87%。分离菌株PI-020能在油菜、辣椒、西瓜、水稻等不同植物幼苗皮层细胞定殖,根际皮层附有典型的梨形厚垣孢子,用特异引物进行PCR扩增,获得梨形孢属特有的84 bp基因片段。PI-020在油菜苗根际定殖可显著促进油菜苗生长,表现出油菜株高增加,根系增长,叶面积增大,叶绿素含量显著提高。800、400倍不同浓度PI-020培养液处理15 d后,油菜苗生长量较对照分别提高70.1%和92.7%。这一研究表明分离的梨形孢PI-020是一株对油菜具有定殖促生功能的内生真菌。     

基因组步移技术扩增嗜水气单胞菌J-1株脂酶基因全长及原核表达

根据已发表的引物序列合成一对引物,以嗜水气单胞菌J-1株基因组为模板扩增脂酶基因,得到一个保守的383 bp基因片段。进一步应用基因组步移技术扩增其两侧未知序列,分别以DraⅠ,EcoRⅤ,PvuⅡ,ScaⅠ,StuⅠ,SmaⅠ6个内切酶酶切的基因组构建6个不同的基因组步移文库,再以基因组步移文库为模板,设计引物向已获得的保守片段两侧进行PCR扩增,将扩增到的两侧序列与保守片段拼接后得到一个3 476 bp的片段,通过DNA Star软件分析,找到一个2 415 bp的开放阅读框,经Blast软件分析,其与嗜水气单胞菌ATCC 7966脂酶、嗜水气单胞菌AH-3磷脂酶A1、嗜水气单胞菌H3脂酶、嗜水气单胞菌Mcc-2脂酶、嗜水气单胞菌J MP636磷脂酶C的序列同源性分别为97%、97%、88%、83%和82%。将DNA序列翻译成氨基酸序列后,发现其包含一个多肽序列(VHFLGHSLGA),这个序列在脂酶中高度保守。