大白菜基因组DNA的提取及AFLP反应体系的建立

以大白菜嫩叶为材料,利用改进的CTAB法,提取到高质量的大白菜叶片总DNA,通过优化酶切、连接、预扩增、选择性扩增等试验条件,建立了大白菜AFLP银染反应体系,得到了清晰的大白菜AFLP指纹图谱为大白菜品种的分子标记和大白菜品种间亲缘关系等研究奠定了基础.研究结果表明:(1)DNA模板的质量影响酶切以及后续的连接扩增反应,改良的CTAB提取法可用于大白菜AFLP分析,形成清晰的AFLP指纹.(2)大白菜基因组DNA最佳酶切反应体系为:模板DNA总量150ng,反应体积为12.5μL,EcoR I 1.25 U,Mse I 1.25U,5xReaction Buffer,最佳酶切时间为:37℃酶切4h.连接反应于20℃连接2.5h即达最佳效果.(3)6对引物组合(E-AAC/M-CAG、E-AAG/M-CAC、E-ACA/M-CTG、E-ACT/M-CAC、E-ACT/M-CTT、E-ACT/M-CTC)均获得稳定、清晰的扩增图谱,可进行中国大白菜的遗传变异分析.     

几种蔬菜种子渗透调控的初步研究

浸种自古以来早已作为催芽、提早出苗的一项生产技术措施。但对浸种的实际效果,仍有不同的评价和结论。有人认为浸种不但无益,反而有害。经我们观察研究,菜豆、黄瓜的种子即使短时间的浸种也会明显地损伤种子的活力,反映在种子的发芽势和发芽率的降低上,从而影响到幼苗的长势。多数豆类种子对低温浸种更为敏感,当水温在5-7℃时,浸种4-8小时就会造成严重的冷害,严重时甚至全部丧失发芽力。因此,如何正确评价浸种后效进而合理地应用浸种技术是一个密切与农林园艺生产相关的实际     

用SRAP标记分析黄瓜品种遗传多样性及鉴定品种

利用相关序列扩增多态性（SRAP）分子标记技术对35份不同类型的黄瓜品种进行了指纹图谱遗传多态性分析,从38对引物组合中筛选出3个多态性高的引物组合,此3对引物扩增得到的图谱可将35份黄瓜品种完全区分开来。依据SRAP指纹图谱聚类分析结果确定了品种之间的遗传距离以及鉴别的难易程度。用SRAP分子标记技术得到了两个黄瓜品种杂交组合F1与亲本的指纹图谱中的鉴别条带,可以用于黄瓜杂交种的纯度检测。     

用过氧化物酶及酯酶同功酶鉴定大白菜杂交种纯度

分析子大白菜一代杂交种及其亲本早期幼苗的过氧化酶和酯酶同功酶。发现供试的大白菜１２个组合中有１０个组合的双亲与一代杂交种的过氧化物酶谱带有明显稳定的区别。９个组合的杂种一代酯酶谱带与新本的区别。在此基础上，研究建立了用过氧化物酶电泳分析检测大白菜一代杂交种纯度的技术，检测结果与田间鉴定结果基本一致。     

黄瓜抗枯萎病相关基因cDNA的分离及鉴定

黄瓜枯萎病是造成黄瓜减产的主要病害之一,研究黄瓜枯萎病抗性分子机理对黄瓜抗病育种有重要意义。以黄瓜抗枯萎病材料Cu14为试材,采用基因差异显示技术(DDRT-PCR)研究黄瓜接种枯萎病生理小种4后基因的表达情况,分离出1个接种后在根茎部特异表达的差异cDNA片断,命名为A178-2。A178-2基因片段的328个核苷酸中有145个核苷酸与拟南芥泛素蛋白同源,氨基酸序列同源性达到85%。     

美国的种子检验

在美国不论是普通农户,还是生产并经营种子的种子公司或是其他的农业部门,都是非常重视种子质量的。美国的种子部门每年要提供大约价值50亿美元的高质量的种子供国内和出口。由于耕作都是机械化,很少用人工,选用质量好的种子播种,才能减少以后的工作程序。同时为了播种均匀,给小粒种种子做一种种衣,包上种衣后只有质量好的种子才能基本保持原发芽水平。为此,农家宁愿出高价买质优的种子。种子检验工作是保证种子质量的关键,因此受到多方重视。买方要看见有一定的检验机构的证     

高效液相色谱法在大白菜种子品种鉴定中的应用

该文用高效液相色谱法对北京普遍种植的12个大白菜品种种子的水溶性蛋白进行了色谱分离,同时对北京新二号及其亲本的种子也进行了分析比较。根据不同品种由大小不同的主要色谱峰组成的“指纹”图谱,各品种可以很容易得以鉴别。结果表明:作者发展的高效液相色谱法很适于大白菜种子的品种鉴定.并且为大白菜育种中数量性状的遗传分析提供了有力的手段。     

同功酶电泳与田间种植方法鉴定大白菜杂交种纯度的相关研究

用垂直板和等电聚焦丙烯酰胺过氧化物同功酶电泳方法对14个大白菜杂交品种进行了纯度鉴定,并同时在田间进行重复检测。二者纯度结果相关系数r=0.87,表明电泳鉴定和田间检验结果间存在着显著的正相关关系。因此应用同功酶电泳技术鉴定大白菜杂交种纯度是可行的,可作为鉴定真伪杂种的一种新方法。     

大白菜种子蛋白分离的高效液相色谱法的研究

该文首次利用高效液相色谱法时大白菜种子的水溶性蛋白质进行了分析,确定了适宜的色谱分析条件:选用径向加压型Nova-Pak C_(18)反相色谱柱(规格为8mm (?).d.×10cm length,填充颗粒为球形,直径4μm,Waters Co.)以甲醇水溶液进行洗脱,种子中各蛋白组分得到了比较好的分离。洗脱时采用混合梯度洗脱方式:0-20分钟,从9%甲醇水溶液(A)到35%甲醇 0.02%三氧乙酸(B)的线性梯度洗脱;20-45分钟,以B洗脱液进行等强度洗脱.流速均为0.8ml/min。洗脱后的各组分用紫外光/可见光检测器在280nm处进行监测。实验结果还表明:不同提取液对色谱分离的结果有一定的影响,用0.1%巯基乙醇水溶液提取时,色谱峰的分离效果较好,主要组分的色谱峰比较显著,因而比较适于大白菜种子的分析。     

苹果酸脱氢酶在番茄F1杂种纯度检测中的应用

本文应用垂直板不连续系统的聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）法,分析了５个杂交一代种（佳粉一号、佳粉二号、佳粉十号、佳粉十五号、双抗二号）发芽肿种苗的五种同工酶（苹果酸脱氢酶（ＭＤＨ）、乙醇脱氢酶（ＡＤＨ）、磷酸葡萄糖变位酶（ＰＧＭ）、酯酶（ＥＳＴ）、异柠檬酸脱氢酶（ＩＤＨ）。发现５个杂交一代种中,３个要交一代种与其双亲的苹果酸脱氢酶（ＭＤＨ）谱带有有明显稳定的区别。两个杂交一代种与其双亲酯（ＥＳＴ）