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通过免疫筛选法,从构建的犬吉布森巴贝虫cDNA基因表达文库中筛选到1个cDNA克隆,此cDNA核苷酸全长2108bp,包含1个完整的开放阅读框,编码蛋白的分子质量约为62ku。经过分析,此蛋白(BgAMA-1)与其他巴贝虫属的顶膜抗原-1具有较高的同源性。为了研究其生物学活性,以此cDNA为模板,利用PCR扩增BgAMA-1的全基因,并将其克隆到pGEX-4T-3载体上,构建了原核表达载体pGEX-4T-3/BgAMA-1。通过Western—blotting对表达并纯化的重组蛋白的生物学活性进行分析。结果显示,构建的pGEX-4T-3/BgAMA-1能在大肠杆菌DH5口中表达,所获的重组抗原BgAMA-1在Western—blotting上仅与吉布森巴贝虫感染犬血清发生反应,证实其具有种特异性,在诊断方面可能有一定的应用价值。 相似文献
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自2011年1—11月,先后从湖南省19个规模猪场采集1 096份种猪血清、551份仔猪和肥育猪血清样本,利用gE-ELISA(酶联免疫吸附试验)方法对湖南省19个使用伪狂犬病gE基因缺失疫苗的规模化猪场进行野毒血清抗体的监测与全面分析,结果共检出12份阳性样本,总样品阳性率为0.73%,4个猪场检测到伪狂犬病野毒抗体,猪场阳性率21.05%;显示伪狂犬病仍然在湖南省呈地方性流行,感染压力仍然偏高。种猪野毒总阳性率为0.64%,其中阳性场种猪的阳性率为6.19%,种猪带毒现象仍然普遍。在伪狂犬病阳性场的种猪群中,阳性样本主要集中在后备母猪及胎次较高的母猪群,表明近几年伪狂犬病控制在朝有利的方向发展,但种猪阳性率偏高仍是伪狂犬病控制与净化的关键。在所监测的19个猪场中,仔猪群的样品阳性率和伪狂犬病阳性场仔猪的野毒阳性率都低于对应的种猪群,但有个猪场仔猪伪狂犬病野毒阳性,种猪却没有,表明仔猪野毒感染不容忽视;在仔猪伪狂犬病阳性场中,野毒抗体集中在1~4周龄、17~24周龄。由于仔猪伪狂犬病野毒抗体既可能来自感染,也可能来自母源抗体,因此在进行伪狂犬病野毒血清流行病学调查时应分群、分阶段检测,了解检测样品的来源信息和免疫信息,以准确分析和把握流行动态。结果还表明,生长育成阶段后期有野毒感染,此阶段感染是伪狂犬病流行的重要特点,这与有些规模猪场只重视母猪免疫、忽视仔猪的免疫接种工作有关。目前,疾病呈多重、复杂的趋势,使用优质的gE基因缺失疫苗强化免疫是控制和净化伪狂犬病的重要手段,同时要加强环境消毒,细化生产管理,安全引种混群、注重后备猪的选择、加强定期监测工作,采取综合防控措施遏制湖南省伪狂犬病的流行。 相似文献
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近五年湖南省部分地区猪场主要病毒性疫病流行情况调查 总被引:1,自引:0,他引:1
对近5年湖南省部分地区猪场送检的临床病例进行统计,分析猪群病毒性疫病的发生流行情况。包括猪瘟(CSFV)、猪高致病性蓝耳病(HP-PRRSV)、猪伪狂犬(PRV)、猪口蹄疫(FMDV)、流行性腹泻(PEDV)、以及各种混合感染。结果显示近5年猪群感染PRV和PEDV的比例最高,病原阳性率分别为33.7%和34.2%;其次是HP-PRRSV,病原阳性率为33.0%;CSFV和FMDV的感染比例非常低,病原阳性率分别为0.04%和0.7%,甚至在2017年均未检测出阳性。HP-PR R SV和PR V阳性率在2014年到2017年逐年降低,但病原阳性率仍旧很高;PEDV感染率在2014年~2016年一直居高不下,2017年有所降低。根据各猪场监测情况,适时进行疫病净化,并严格执行生物安全措施,从源头控制疫病的发生。 相似文献